利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术诊断涂阴肺结核的临床意义

王欣

（辽宁省抚顺市第四医院，辽宁抚顺 113123）

肺结核属于经呼吸道传播的慢性疾病，在全球范围内有超过10万患者单耐利福平（RIF）[1]。现阶段我国结核发病率呈逐年升高的趋势，且涂阴肺结核的诊断难度较高[2]。痰结核分枝杆菌培养阳性率高于涂片，但所需培养周期较长，会延误最佳治疗时机，进而导致病情进一步发展[3]。因此，积极探寻涂阴肺结核的有效诊断技术对控制结核病具有重要意义[4]。基于此，本研究旨在探究利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术在结核病中的诊断价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料选取2019年1月至2020年3月于本院接受治疗的涂阴肺结核患者60例作为A组，另选取同期确诊为肺结核的患者50例作为B组，其他肺病患者55例作为C组。A组男33例，女27例；年龄25～58岁，平均年龄（43.26±6.98）岁。B组男28例，女22例；年龄27～59岁，平均年龄（42.68±6.74）岁。C组男31例，女24例；年龄24～59岁，平均年龄（43.28±6.52）岁。3组患者临床资料比较差异无统计学意义，具有可比性。本研究经本院医学伦理委员会审核批准。涂阴肺结核诊断标准[5]：①≥3次的涂片镜检查显示为阴性；②经检查其结果与活动性肺结核病变的胸片表现一致；③经由临床判断已排除其他肺结核性肺部病变。纳入标准：患者均存在肺部疾病者；签署知情同意书。排除标准：影像学不典型者；结核感染者。

1.2 方法所有患者均行痰抗酸染色、结合菌素皮肤试验（TST）检测。①TST试验方法：对患者前臂内侧上中1/3部位内皮注入5 U试剂，形成皮丘。对患者注射部位给予为期3 d的观察，由于近年来卡介苗的接种率较高，因此，还需结合实际情况进行判断。②痰固体培养：将痰液标本置于处理管后倒入4%的氢氧化钠前处理液，放置15 min用吸管吸取前处理液接种至培养基斜面，持续观察标本的变化情况。③XpertMTB/RIF检测方法：基于1∶2的比例标准，混合1 mL痰液标本与含有氢氧化钠与异丙醇的处理液，在涡旋振荡器中震荡20 s左右，存放于常规室内温度下15 min。在一次性多室塑料反应盒中放入混合液2 mL，并将其放入检测模块，采用相关仪器完成自动化分析，并在2 h左右记录测定结果。

1.3 观察指标比较3组检出率和特异度。

1.4 统计学方法采用SPSS 21.0统计软件进行数据分析，计数资料组间率（%）比较采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 B组与C组XpertMTB/RIF检测结果比较B组患者XpertMTB/RIF检测阳性率为82.00%，C组阳性率为2.00%，差异有统计学意义（P＜0.05）；B组阳性预测值为97.62%，阴性预测值为84.38%。

2.2 A组与C组XpertMTB/RIF、TST检测结果比较A组XpertMTB/RIF检测阳性率为81.67%，C组XpertMTB/RIF检测阳性率为1.82%，差异有统计学意义（P＜0.05）。A组TST检测阳性率为65.00%，C组TST检测阳性率为29.09%，差异有统计学意义（P＜0.05）。A组XpertMTB/RIF检测阳性率高于痰培养。A组XpertMTB/RIF检测特异度为98.18%，痰培养特异性为100.00%，差异无统计学意义，见表1。

表1 A组与C组XpertMTB/RIF、TST检测结果比较

3 讨论

肺结核疾病具有传染性，在世界各国均被认为是影响人类健康的重大疾病之一，且具体原因尚不明确[6]。对疾病给予有效诊断是肺结核疾病防控的前提，早期诊断可显著提高治疗效果，同时，也可控制疾病的扩散。现代临床中针对肺结核疾病的实验室常规检查项目为痰涂片[7]，其检测时间较短，检测费用较低，但检测结果敏感性较低，同时，对于检测标本的含菌量具有较高要求，可出现漏诊情况[8]。而涂阴肺结核是在涂片中未发现结核杆菌存在的特殊病例，常规可借助非细菌学方法判断为肺结核病例。两者可存在痰结合杆菌培养阳性但涂片为阴性和痰培养阴性且涂片也为阴性两种情况，即可判断为涂阴肺结核。痰培养结合杆菌属于涂阴肺结核诊断的主要办法，该检测方法的周期较长，诊断敏感性较低，同时，对实验室生物安全性具有较高要求，导致其临床运用受限[9]。

涂阴肺结核是在痰液标本检查期间并未观察到结核分枝杆菌，即疾病所存在的传染可能性极小，但并不能完全证实疾病痊愈[10]。在此种检测结果的基础上，患者仍需遵医嘱服药或参与其他治疗，但预后良好。在患者的生活中也需避免与他人密切接触，在临床检查明确痊愈后才可恢复正常生活状态[11]。结核患者可进一步分为开放性与非开放性，其中开放性患者痰液标本中发现结核分枝杆菌，常规具有较强传染性，也被称之涂片阳性结核。不开放患者痰液中未发现结核，涂片阴结核，理论上不存在传染性，但实际上也可判断为不完全具有传染性。其原因为，肺结核杆菌多经由痰检验确定，日常需控制不良生活习惯，避免病情发展。

涂阴肺结核患者若未能及时就诊，可能会延误最佳治疗时机，进而导致病情恶化，增加治疗难度，甚至可直接威胁患者的生命安全[12]。基于此，利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术属于综合性诊断方案，具体涉及到标本处理与基因突变检测以及结核杆菌特异核酸检测等。整个检测流程仅需1.5 h左右，同时，还能实现利福平耐药与结合分枝杆菌的检测。近年来，该检测技术多被应用于结核性淋巴炎、纵膈淋巴结、脊柱结核等疾病的诊断中，临床实践表明，其检测结果的灵敏度与特异性较高。本研究结果表明，B组阳性预测值为97.62%，阴性预测值为84.38%，而涂阴肺结核患者XpertMTB/RIF检测特异度为98.18%。该结果进一步证实了，在肺结核与涂阴肺结核患者诊断中应用XpertMTB/RIF检测具有较高的特异性。在结核感染病情判断以及临床诊断中，主要参考TST检查结果，因此，在肺结核疾病判断中，其可作为关键性参考指标。若患者存在结核感染情况，能观察到红肿与硬结情况，且存在超敏反应炎症。但若患者接种卡介苗则可能会影响TST检查最终检测结果的可靠性。基于此，在此项检查项目中，对于检测标本具有较高要求。本研究结果表明，A组XpertMTB/RIF检测阳性率为81.67%，明显高于C组的1.82%，差异有统计学意义（P＜0.05）；A组TST检测阳性率为65.00%，明显高于C组的29.09%，差异有统计学意义（P＜0.05）。A组XpertMTB/RIF检测阳性率高于痰培养，差异有统计学意义（P＜0.05）。A组XpertMTB/RIF检测特异度为98.18%，痰培养特异性为100.00%，差异无统计学意义，提示，对于可能为涂阴肺结核的患者，在对病情给予进一步诊断时，参考XpertMTB/RIF检测结果有助于提高诊断准确度。痰培养对实验室生物安全等级要求较高，常规开展该检查项目难度较高，且耗时较长，不利于患者的早期治疗。而XpertMTB/RIF检测可实现高度自动化，检测所需时间较短，能为患者争取到更早的救治时间。

综上所述，涂阴肺结核与其他肺病等存在一定鉴别难度，而应用XpertMTB/RIF检测具有较高特异性，能为临床判断提供可靠依据。