子宫内膜癌中SOX11 表达及其与血管新生的相关研究

徐晓冬

近年来,我国子宫内膜癌的发病率不断攀升。血管新生与子宫内膜癌的生长和转移密切相关。血管生成不仅可以判断肿瘤预后,也成为肿瘤治疗新的靶点。然而血管新生与子宫内膜癌之间的相关机制并不明确,能否将抗血管生成应用于肿瘤的治疗尚需进一步探讨［1］。一系列与性别决定区Y 框基因［sex-determining Y(Sry) box-containing gene］同源、编码转录因子的基因统称SOX 家族,其共同特点是具有高度保守的HMG框(high-mobility group box,HMG-box)。SOX 家族近年来被广泛关注,它与胚胎的早期发育有关。在肿瘤的发生发展中,SOX 基因的变异起到了至关重要的作用。SOX11 是SOX 家族中非常重要的干细胞标志蛋白,已被证实与多种恶性肿瘤的发生和发展有关,例如乳腺癌、胃癌、子宫内膜癌,SOX11 与这些恶性肿瘤的生物学行为密切相关。本研究通过检测子宫内膜癌组织中SOX11 的表达与血管新生的相关性,探讨SOX11在子宫内膜癌发病中的作用机制和诊治前景。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2016 年1 月～2019 年12 月本院收治的182例子宫内膜癌、子宫内膜癌前病变、子宫附件无病变的子宫脱垂或无器质性病变的异常子宫出血患者的病理组织标本。依据子宫内膜癌临床分期(2015 FIGO 分期)分为子宫内膜癌组(62例)、子宫内膜癌前病变组(60例)、正常子宫内膜组(60例)。所有入组患者术前均未行激素、放化疗。

1.2 染色方法 采用PV-9002 二步法免疫组化法进行免疫组化染色。采用SOX11 鼠多克隆抗体(ab154138,工作浓度1∶200)。所有实验步骤严格遵守说明书进行。

1.3 观察指标及判定标准 比较SOX11 在正常子宫内膜组、子宫内膜癌前病变组及子宫内膜癌组中的表达情况,采用免疫组化检测在10×40 倍显微镜下观察SOX11 蛋白的表达,评分参照Fromowitz 综合计分法［1］。在统计分析中除外阴性均视为阳性。分析子宫内膜癌中SOX11 阳性表达与子宫内膜癌临床特征的关系。比较正常子宫内膜组、子宫内膜癌前病变组、子宫内膜癌组的MVD 水平,MVD 计数遵从Weidner［2］推荐的测量方法。分析SOX11 的阳性表达与MVD 之间的关系。

1.4 统计学方法 采用SPSS23.0 统计学软件处理数据。计量资料以均数±标准差(±s)表示,采用t检验；计数资料以率(%)表示,采用χ2检验；相关分析采用Spearman 相关分析。P<0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 SOX11 在正常子宫内膜组、子宫内膜癌前病变组及子宫内膜癌组中的表达比较 子宫内膜癌前病变组与子宫内膜癌组SOX11 表达阳性率比较,差异无统计学意义(χ2=0.270,P=0.604>0.05)。正常子宫内膜组的SOX11 表达阳性率低于子宫内膜癌前病变组和子宫内膜癌组,差异具有统计学意义(χ2=43.926、49.842,P=0.000、0.000<0.05)。见表1。

表1 SOX11 在正常子宫内膜组、子宫内膜癌前病变组及子宫内膜癌组中的表达比较 (n,%)

2.2 SOX11 阳性表达与子宫内膜癌临床病理特征的关系 不同年龄子宫内膜癌患者SOX11 表达阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05)；不同病理组织学分级、淋巴结转移、癌组织浸润深度及临床分期子宫内膜癌患者SOX11 表达阳性率比较差异具有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 SOX11 阳性表达与子宫内膜癌临床病理特征的关系 (n,%,n=62)

2.3 正常子宫内膜组、子宫内膜癌前病变组、子宫内膜癌组的MVD 比较 子宫内膜癌组的平均 MVD 明显高于子宫内膜癌前病变组及正常子宫内膜组,差异具有统计学意义(t=10.601、26.225,P=0.000、0.000<0.05)。子宫内膜癌前病变组的平均 MVD 明显高于正常子宫内膜组,差异具有统计学意义(t=11.690,P=0.000<0.05)。见表3。

表3 正常子宫内膜组、子宫内膜癌前病变组及子宫内膜癌组的 MVD 比较 (±s,个/HP)

表3 正常子宫内膜组、子宫内膜癌前病变组及子宫内膜癌组的 MVD 比较 (±s,个/HP)

注：与子宫内膜癌组比较,aP<0.05；与子宫内膜癌前病变组比较,bP<0.05

2.4 SOX11 的阳性表达与MVD 之间的关系 根据每例癌组织标本中每个标本SOX11 的免疫组化计分及MVD 计数行Spearman 相关分析,子宫内膜癌中SOX11阳性表达与MVD 显著相关(r=0.869,P<0.05)。

3 讨论

在女性生殖道三大恶性肿瘤中,子宫内膜癌近年来发病率逐年上升。探索子宫内膜癌的发病机制,寻找对肿瘤有效的治疗办法已经迫在眉睫［3］。相关研究表明,在血管生成前,实体肿瘤的平均直径约为1.0～1.3 mm,从而保持肿瘤生长的平衡状态,肿瘤处于休眠阶段。一旦新生血管开始生长,肿瘤细胞将加速生长［4］。由于该理论的形成,在肿瘤治疗的研究中,越来越多的研究者将目光聚焦到了抗血管生成治疗中［5］。相关研究发现,血管新生是肿瘤组织生长所必须的［6,7］。Weidner 等［2］认为,在肿瘤组织中一些具有较高水平血管新生活性的肿瘤细胞成为了肿瘤生成和转移的源头。因此在肿瘤中对MVD 的相关研究成为热点,通常采用对内皮细胞能够进行特异性抗原染色的蛋白进行研究。

SOX11 属于SOX 基因家族C 亚群编码转录因子,在胚胎分化、神经细胞存活和细胞变异中起重要作用［8］。SOX11 的致癌潜力已在异种移植模型中得到证实,但其促进功能的具体机制仍不清楚［9］。研究结果证实,SOX11 可以促进肿瘤血管生成并使其生长和扩散［9］。Chang 等［10］发现,在子宫内膜癌组织中SOX11的表达较癌旁组织的表达明显增高,SOX11 低表达的患者总生存期和无病生存期明显高于SOX11 高表达的患者。敲除SOX11 基因后,子宫内膜癌细胞增殖和迁徙明显受到抑制。Inoue 等［11］发现,在Ishikawa 细胞中SOX11 促进ALK 基因表达,进而通过NF-κB 和pAkt 通路促进上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)、抑制细胞凋亡,提示SOX11 可以促进子宫内膜癌的进展。血管新生是肿瘤细胞生成的最重要机制之一［12］。Palomero 等［13］在研究中发现,与敲除SOX11 基因相比较,更多的血管生成基因富集在SOX11 中从而使MVD 增加。血小板衍生生成因子A(platelet-derived growth factor A,PDGFA)是一种唯一以SOX11 为靶点的染色质免疫沉淀反应因子。PDGFA参与肿瘤血管生成,促进内皮细胞的形成和招募间充质基质细胞。荧光素酶标记检测显示,SOX11 能够通过旁分泌增加PDGFA 的转录。研究发现［14］,PDGFA分泌的条件是SOX11 阳性的细胞系中血管的增殖和迁移。因此,肿瘤中的血管新生是依靠PDGFA-SOX11而实现的。本研究中发现,SOX11 在正常子宫内膜组织中低表达,在子宫内膜癌组织中表达明显增高,在子宫内膜癌中SOX11 的阳性表达和MVD 呈正相关(P<0.05)。SOX11 在子宫内膜癌中导致新生血管增加的机制可能是复杂的。在肿瘤的发生、发展和转移中新生血管的生成起到重要的作用。

综上所述,随着子宫内膜癌的分期增加,血管新生逐渐增加,SOX11 的阳性表达增加。因此检测SOX11蛋白表达可能为子宫内膜癌的发生、发展及诊治提供关键线索。