雏番鸭鸭3型腺病毒与鸭圆环病毒共感染诊断报告

王秀娟 福清市农业综合执法大队 福建福清 350300

鸭3型腺病毒（Duck adenovirus 3，DAdV-3）属于腺病毒科（Adenoviridae）I群腺病毒属成员[1]，是2014年以来在我国流行的一种引起番鸭肝脏肿大、出血和坏死为特征的新发疫病病原[2]，最早由张新珩等在广东的番鸭养殖场报道发生该病[3]，现已在我国的安徽、福建、浙江、江西、河南、云南等大部分地区流行，对我国番鸭养殖业造成了重大的经济损失[4-5]。鸭圆环病毒（Duck circovirus，DuCV）病是近些年来新发现的一种高度接触性传染病，主要侵害鸭的免疫系统，临床上以鸭生长迟缓、器官萎缩和淋巴细胞减少为主要致病特征，可感染各品种、各日龄鸭。临床上由于鸭圆环病毒感染多呈亚临床状态，患鸭常因机体免疫应答能力下降，易导致其它疫病并发或继发感染，从而造成更大的经济损失[6-7]。现将2021年5月福清市渔溪镇郭某番鸭养殖场雏番鸭鸭3型腺病毒与鸭圆环病毒共感染的诊断情况报道如下，以期为同行提供参考。

1 发病情况

2021年5月，该养殖场饲养的番鸭14日龄时发病，鸭群采食量和饮水量下降、喜扎堆蹲伏、体温升高、排水样稀粪，随后陆续出现死亡，至21日龄时，鸭群发病率为45%左右，病死率约25%；就诊时患鸭体况消瘦、羽毛杂乱、翅尖和尾部被毛断裂严重、背部皮肤外露。

2 剖检病变

剖检病死鸭，可见肝脏肿大、出血，质地变脆；脾脏呈大理石样外观，肾脏肿大、出血；胰腺有弥散性出血点；肠道充盈，肠壁稀薄。

3 实验室检测

无菌采集病死鸭肝脏、脾脏、肾脏和脑组织进行实验室检测。采集的样品分成2份，一份用于细菌分离，另一份用于鸭常见病毒检测。

无菌取病死鸭肝脏和脑组织等病料分别接种于麦康凯琼脂平板和血琼脂平板上，于37℃恒温培养24~48 h。以病毒DNA/RNA抽提试剂盒，按照产品说明书提取样品中的核酸，以提取的核酸作为模板，开展禽流感病毒、水禽细小病毒、鸭3型腺病毒、鸭甲肝病毒、鸭呼肠孤病毒、鸭圆环病毒、水禽禽1型副黏病毒等雏番鸭常见病毒核酸检测，(RT-)PCR扩增产物经1%琼脂糖凝胶进行电泳。

采集的样品经平板划线培养未分离到细菌。

针对7种病毒的核酸(RT-)PCR检测发现，从样品中检测到鸭3型腺病毒和鸭圆环病毒核酸双阳性（见图1），其余病原均呈阴性。将（RT-）PCR阳性扩增产物送福州尚亚生物科技有限公司进行测序，对获得序列编辑后使用NCBI blast进行在线比对。结果，两组序列分别与NCBI数据库中的鸭3型腺病毒和鸭圆环病毒核苷酸序列同源性分别为100%和98.6%。

图1 样品PCR产物电泳图

根据以上发病情况、临床症状、剖检病变及实验室检测结果，初步判定该群雏鸭发生鸭3型腺病毒与鸭圆环病毒共感染。

4 讨论与体会

禽腺病毒是一类侵害禽类的病毒群，根据其抗原结构不同分为3个群，即Ⅰ群禽腺病毒、Ⅱ群禽腺病毒和Ⅲ群禽腺病毒。危害鸭群的腺病毒主要包括Ⅰ群腺病毒属的Ⅰ群腺病毒血清4型、鸭腺病毒2型（DAdV-2）、鸭腺病毒3型（DAdV-3）和III群腺病毒属的鸭腺病毒1型[DAdV-1，即产蛋下降综合征病毒（EDSV）][1-2]。鸭3型腺病毒是近年来我国鸭群新出现的一种鸭源腺病毒，临床上鸭感染该病毒后引起实质性脏器尤其是肝脏肿大、局灶性散状出血，脾脏肿大，肾脏肿大、出血。该病发病率20%~50%、病死率40%~60%[2]。该病毒最早由张新衍等[3]从广东地区表现为精神沉郁，剖检肝脏黄化和出血的20~30 d番鸭组织中分离发现，经血凝试验、理化试验、透射电镜观察及基因组序列测定及分析，确定该病病原为鸭3型腺病毒。随后万春和等[4]、程龙飞等[5]先后报道了鸭腺病毒病的发生和流行。

鸭圆环病毒最早由Hattermann等[6]于2003年发现并报道。2008年，傅光华等[7]在我国大陆地区鸭群中首次检测到鸭圆环病毒感染。该病临床上主要表现为鸭免疫器官萎缩和生长受阻等，在鸭群中感染该病十分普遍，已成为威胁我国养鸭业的重要免疫抑制性疫病之一[2]。

近年来，养禽业发展迅猛，涌现出许多不同规模养禽企业、养殖合作社及大量散养户，各自的饲养条件、设施、技术力量参差不齐。鸭场多数仍沿用传统水面养殖，环境调控能力差、生产性能不稳定，导致鸭病频发，疫病发生常呈亚临床症状或多病原共感染情况，防疫形势日益复杂，常出现老病未除新病不断的局面。鸭圆环病毒和鸭3型腺病毒都是DNA病毒[1]，随着养殖规模和密度的增加，鸭病的发生愈发频繁，我国鸭群感染这两种病毒较为普遍，临床上二者单独感染的病例较多，且严重阻碍鸭的生长发育，极大降低了鸭肉的产品质量，严重损害养殖生产企业的市场竞争力和经济效益。鸭3型腺病毒与鸭圆环病毒共感染的病例报道较少，共感染病例的出现给临床诊断带来一些困难，容易造成误诊或漏诊，因此，在诊断时除了要了解患鸭临床症状和剖检病变，还应结合病原流行病学、利用实验室检测等手段，以提高诊断的准确性。