尿液中红细胞免疫球的检测及其临床意义

卢 佩， 丁振若， 郑善銮， 刘海波

（1. 空军军医大学西京医院检验科，陕西 西安 710032；2. 陕西省中医医院检验科，陕西 西安 710003）

通过多年对尿液中红细胞形态的观察，我们发现在不同泌尿系疾病中红细胞形态会有所不同，并对临床诊断有一定提示价值。本研究主要介绍在尿沉渣中发现的一种由小红细胞紧密聚集成团的特殊细胞，我们将其命名为红细胞免疫球；并探讨检出红细胞免疫球对肾小球肾炎等泌尿系疾病进行鉴别诊断与定位诊断的临床价值。

1 材料和方法

1.1 研究对象

选取2017年1月—2018年11月空军军医大学西京医院肾内科、泌尿外科住院患者260例（实验组），其中男135例、女125例，年龄（37±2）岁。260例患者中，肾盂肾炎患者50例，经X线肾盂造影显示异常改变；肾小球肾炎患者140例，其中IgA肾病患者32例、紫癜性肾小球肾炎患者40例、隐匿型肾小球肾炎患者38例，且均通过肾活检确诊，另有慢性肾小球肾炎患者30例；尿路感染患者60例，其中膀胱炎患者22例、尿道炎患者38例均有尿急、尿频、尿痛等尿路刺激症状，膀胱镜、尿道镜和细菌培养异常；膀胱肿瘤患者10例，经膀胱镜、电子计算机断层扫描、磁共振成像检查确诊。以同期100名体检健康者作为对照组，其中男52名、女48名，年龄（39±2）岁，对照者X线肾盂造影均无异常改变，肾功能检查、B超等各项检查均正常。

1.2 方法

收集所有研究对象新鲜中段晨尿10 mL，430×g离心5 min，弃上清液，留取0.2 mL沉淀，混匀后取0.1 mL沉渣涂片，用高倍镜全片检查寻找红细胞免疫球，检测要求2 h内完成。全片发现红细胞免疫球≥1个按阳性计算，并通过免疫荧光染色对比试验确定；采用兔抗人免疫球蛋白荧光抗体的方法进行荧光素细胞染色[1]。检测多型红细胞百分比，记录>75%的例数。EURostarⅢplus荧光显微镜、荧光染液购自欧蒙医学诊断（中国）有限公司。BX53显微镜购自日本OLYMPUS公司。

1.3 统计学方法

采用SPSS 18.0软件进行统计分析。计数资料以率表示，比较采用χ2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 红细胞免疫球的形态学特点

在高倍镜下，红细胞免疫球是一群小红细胞黏附聚集成的团状物，常有丝状物缠绕，也可有膜状物包裹，形态不规则，可呈圆形或椭圆形，每个细胞之间结合紧密，看不到膜间隔，有部分已融合在一起，见图1。加荧光标记兔抗人免疫球蛋白荧光抗体后，出现明显黄绿色荧光。红细胞免疫球经兔抗人免疫球蛋白荧光染色后可呈明亮黄绿色荧光，单个红细胞已融成一体，看不到单个红细胞胞界，见图2。

图1 湿片中红细胞免疫球形态（×400）

图2 荧光染色后红细胞免疫球形态（×400）

2.2 非红细胞免疫球红细胞聚集特点

在高倍镜下观察非红细胞免疫球红细胞聚集现象，可见每个红细胞之间结合较松散，一般是由黏液丝黏附在一起，形状不规则，表面没有膜状物包裹，见图3。单纯红细胞聚集现象表现为荧光染色后可见红细胞松散结合，可见单个红细胞胞界，没有融合，也没有包膜包裹，见图4。

图3 湿片中红细胞聚集形态（×400）

图4 荧光染色后红细胞聚集形态（×400）

2.3 不同泌尿系疾病患者尿液中红细胞免疫球和多型红细胞观察结果

尿液中红细胞免疫球多见于IgA肾病，以及由微生物、内毒素引起的急性肾小球肾炎、过敏性肾小球肾炎、隐匿型肾小球肾炎，多出现在早期未经治疗患者的尿液中；多型红细胞常见于IgA肾病、紫癜性肾小球肾炎、慢性肾小球肾炎等疾病，多型红细胞>75%为肾性红细胞。见表1。

表1 不同泌尿系疾病患者尿液中红细胞免疫球和多型红细胞观察结果

3 讨论

红细胞免疫球在尿沉渣湿片中为圆形、椭圆形红细胞团块，是数个小红细胞黏附聚集在一起形成的成团单个红细胞，间隔不清晰，相互融合，不易解离。红细胞免疫球周边光滑，用兔抗人免疫球蛋白荧光抗体染色后，呈明亮黄绿色，有荧光[2]，说明表面被免疫球蛋白覆盖。已有研究证实，在肾小球、肾小管病变患者尿中免疫球蛋白数量有所增加[3-4]，借此可区分是肾性红细胞，还是非肾性红细胞。而一般红细胞聚集形态不规则，红细胞间结合松散。单个红细胞胞界清晰，无融合现象。荧光染色后呈黄绿色荧光，但结合疏松，形态多样，周边不光滑。本研究结果显示，IgA肾病、紫癜性肾小球肾炎、隐匿型肾小球肾炎患者尿沉渣中均能检出红细胞免疫球，且阳性率较高；慢性肾小球肾炎红细胞免疫球阳性率不高。观察尿沉渣中红细胞免疫球有助于鉴别红细胞来源，有利于泌尿系统疾病的鉴别诊断与定位诊断。

红细胞免疫球在肾小球肾炎初期未经治疗患者尿中出现率较高，患者红细胞形态也较差[5]，多出现在急性期。本研究结果显示，红细胞免疫球在IgA肾病中检出率最高，阳性率为93.7%；在紫癜性肾小球肾炎中检出率也较高，阳性率为87.5%；隐匿型肾小球肾炎患者的阳性率为65.8%；慢性肾小球肾炎的阳性率为16.7%。红细胞免疫球在免疫因素介导的急性肾小球肾炎中检出率较高，而在慢性肾小球肾炎中检出率较低，在尿路感染和泌尿系肿瘤患者尿液中没有发现。提示通过检测红细胞免疫球阳性率，可鉴别肾小球肾炎种类，结合红细胞形态可鉴别红细胞来源是肾性红细胞，还是非肾性红细胞。红细胞免疫球的形成可能由免疫反应介导，但具体形成机制还需进一步研究。

尿液红细胞形态学检测作为血尿来源定位初筛试验[6]，患者留取标本简单，且无创伤性，能较为准确地判断血尿来源。多型红细胞指红细胞大小不等，形态呈2种及以上多型性变化，显微镜下根据尿液中多型红细胞的百分比来判断是否为肾源性血尿，与病理学诊断的符合率高，能快速鉴别尿液中红细胞是否来源于肾脏，已越来越广泛地被应用于临床肾病筛查。尿液中红细胞免疫球和红细胞形态学检测联合应用，对肾脏疾病，特别是肾小球肾炎有重要提示作用。