不同包装对抗病毒口服液中连翘苷稳定性的影响

宋 瑛， 王红芳， 张溪杨， 刘 甜， 王 彦， 王捧英*

(1.河北工业职业技术学院环境与化学工程系，河北 石家庄 050000；2.河北中医学院药学院，河北 石家庄 050200)

抗病毒口服液由板蓝根、连翘、知母、芦根、广藿香、地黄、石菖蒲、郁金、石膏9味中药组成，具有清热祛湿、凉血解毒的功效，用于治疗风热感冒、温热、上呼吸道感染、流感、腮腺炎等病毒感染疾病[1]。该制剂中连翘为君药，其活性成分连翘苷是抗病毒的主要成分[2]，具有抗菌、抗病毒、强心、抑制毛细血管通透性、抗肝损伤等作用，其含量质量评价的重要指标[3]。

抗病毒口服液在放置过程中会出现含量下降的现象，这是制备工艺、贮存条件[4]、包装材料等多因素综合作用的结果[5]，国内已对影响该制剂中连翘苷含量稳定性的因素进行了研究[6]，但尚未涉及包装方面，由于它会直接接触药品，故对药品质量影响很大。目前，抗病毒口服液市售包装有玻璃瓶、聚酯瓶(PVC)2种，其中前者具有一定的稳定性，不易被污染、分解或溶解，也难以被氧化和发生化学反应，但易碎；后者运输便捷，不易与空气接触，但会改变药物成分，加快其聚合反应[7]，并且其中树脂含量及生产过程中加入的增塑剂、稳定剂等会产生迁移[8]。本实验对不同包装抗病毒口服液进行长期稳定性试验、加速试验，采用HPLC法测定连翘苷含量，根据其变化情况考察包装材料该制剂稳定性的影响。

1 材料

1.1 仪器 高效液相色谱仪(型号LC-15C，日本岛津公司)；电子分析天平(型号BSA224S-CW，德国赛多利斯公司)；药品稳定性试验箱(型号SHH-150SD，重庆市永生实验仪器厂)；超声波清洗器(型号KQ2200E，昆山市超声仪器有限公司)。

1.2 试剂与药物 连翘苷对照品(8Z3F-VS4V，国家标准物质)。抗病毒口服液(石家庄某药业公司，玻璃瓶装，批号01160902、01160903、01160904、01160905、01160906；聚酯瓶装，批号160903、160904、160905、160906、160907)。板蓝根、石膏、芦根、地黄、连翘、郁金、知母、石菖蒲、广藿香均为市售，经石家庄北方药业集团有限公司赵美芳高级工程师鉴定为正品。乙腈为色谱纯(天津市康科德科技有限公司)；甲醇为色谱纯(天津市大茂化学试剂厂)；乙酸乙酯为分析纯(天津市永大化学试剂有限公司)；水为超纯水。

2 方法与结果

2.1 溶液制备

2.1.1 对照品溶液 精密称取连翘苷对照品0.82 mg，70%甲醇超声溶解后定容于10 mL量瓶中，即得(质量浓度为82.00 μg/mL)。

2.1.2 供试品溶液 精密量取10种抗病毒口服液各25 mL，乙酸乙酯振摇提取6次，每次25 mL，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加70%甲醇溶解，置于10 mL量瓶中，70%甲醇定容至刻度，摇匀，即得，置于4 ℃冰箱中备用。

2.1.3 阴性样品溶液 按照处方和制备工艺，取除连翘以外的其他药材，按“2.1.2”项下方法制备，即得。

2.2 色谱条件 参考文献[1]报道。Wondasil C18色谱柱 (250 mm×4.6 mm，5 μm)，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相乙腈-水(23∶77)；体积流量1.0 mL/min；柱温30 ℃；检测波长277 nm；进样量20 μL。理论塔板数按连翘苷峰计，不低于3 000。

2.3 系统适用性试验 取对照品溶液、供试品溶液(批号01160904)、阴性样品溶液适量，在“2.2”项色谱条件下进样测定，结果见图1，可知该方法适用性良好。

1.连翘苷图1 连翘苷HPLC色谱图

2.4 方法学考察 参考文献[9]报道。

2.4.1 线性关系考察 精密量取对照品溶液2.5、5.0、7.5、10.0、12.5、15.0 μL 至10 mL 量瓶中，70%甲醇稀释至刻度，摇匀，在“2.2”项色谱条件下各取20.0 μL 进样测定，重复3次。以峰面积为纵坐标(Y)，对照品质量浓度为横坐标(X)进行回归，得方程为Y=181 922X+747.93(R2=0.999 8)，在19.54～117.22 μg/mL 范围内线性关系良好。

2.4.2 精密度试验 精密量取对照品溶液20 μL，在“2.2”项色谱条件下进样测定6次，测得峰面积RSD 为0.64%，表明仪器精密度良好。

2.4.3 稳定性试验 按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液(批号01160904，24.10 μg/mL)，于0、2、4、6、8、10、12、24 h在“2.2”项色谱条件下各进样20 μL 测定，测得峰面积RSD为1.62%，表明溶液在24 h 内稳定性良好。

2.4.4 重复性试验 按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液(批号01160904，24.10 μg/mL)6份，在“2.2”项色谱条件下各进样20 μL 测定，测得峰面积RSD为1.51%，表明该方法重复性较好。

2.4.5 加样回收率试验 取口服液(批号01160904)8.0 mL，按“2.1.2”项下方法平行制备6份供试品溶液，精密加入1 mL对照品溶液，在“2.2”项色谱条件下进样测定，计算回收率，结果见表1。

表1 连翘苷加样回收率试验结果(n=6)

2.5 稳定性考察

2.5.1 长期稳定性试验 取口服液10批(常温贮存)，于生产后第0、3、6、9、12、18、24个月取样，按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，在“2.2”项色谱条件下进样测定，平行3次，计算连翘苷含量及与第0个月相比的下降率，结果见表2。

表2 连翘苷含量及下降率测定结果(长期稳定性试验)

2.5.2 加速试验 取口服液10批，置于在药品稳定性试验箱中[温度(40±2)℃，相对湿度(75±5)%]，于生产后第0、1、2、3、6个月取样，按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，在“2.2”项色谱条件下进样测定，平行3次，计算连翘苷含量及与第0个月相比的下降率，结果见表3。

表3 连翘苷含量及下降率测定结果(加速试验)

2.5.3 结果分析 由表2可知，24个月后各批口服液中连翘苷含量均有所下降，其中在第12个月时玻璃瓶装、聚酯瓶装的下降率分别大约为4%、5%，而在第24个月时分别大约为9%、12%～13%。由表3可知，6个月后各批口服液中连翘苷含量均有所下降，其中在第3个月时玻璃瓶装、聚酯瓶装的下降率分别大约为6%、8%，而在第6个月时分别大约为9%、12%～13%。综上所述，玻璃瓶装连翘苷含量下降率均低于聚酯瓶装。

3 讨论

本实验对2种包装的抗病毒口服液进行了长期稳定性试验、加速试验，发现该制剂中连翘苷含量会随着贮存时间延长而下降，但玻璃瓶装下降速率低于聚酯瓶装。2015年版《中国药典》一部规定，抗病毒口服液每1 mL含连翘量以连翘苷计，不得少于25 μg[10]，而本实验结果显示虽然在24个月的有效期内2种包装抗病毒口服液中该成分含量均达到了药典要求，但玻璃瓶装下降率为9%，而聚酯瓶装达到了12%～13%。由此可知，虽然聚酯瓶具有安全、卫生、携带方便等特点[11]，但不利于抗病毒口服液贮存[12]，而玻璃瓶包装更有利于保持该制剂质量稳定。