紫草中吡咯里西啶生物碱的杀虫活性
2021-09-22单世斌
单世斌
(福建省中科生物股份有限公司, 福建 厦门 361000)
我国自古便有将植物中的杀虫活性物质应用于农业害虫的防治,具有杀虫活性物质的植物中,药用植物占绝大多数。中药紫草具有清热凉血和透疹解毒的作用,且其含有的吡咯里西啶生物碱具有一定的杀虫活性。吡咯里西啶类生物碱(pyrrolizidinealkaloids)属于植物性毒素,对大部分昆虫及食草动物能够产生一定的杀伤力。据不完全统计,全球有6 000种左右的植物含有吡咯里西啶类生物碱。吡咯里西啶类生物碱种类繁多,分布在豆科、菊科以及紫草科植物之中,当前已从植物中分离出660多种,如从菊科千里光属千里光中所分离得到的千里光碱,从菊科款冬属款冬中所分离得到的克氏千里光碱,从紫草科天芥菜属天芥菜中所分离得到的天芥菜碱等[1]。一般常见的吡咯里西啶主要包含Retronecine 型(7 位为 R 构型)、platynecine 型及otonecine型。目前,有关紫草紫草中吡咯里西啶生物碱的杀虫活性研究较少,因此,进行了紫草中吡咯里西啶生物碱的杀虫活性研究,以期为植物源农药的开发研究提供理论支持。
1 材料与方法
1.1 吡咯里西啶类生物碱的制备
紫草中吡咯里西啶类生物碱使用盐酸-氢氧化钠为提取溶剂,酸提碱沉法后用60%乙醇水溶液过D101大孔树脂柱进行提取,将提取的紫草吡咯里西啶类生物碱原液制备成5.00 mg/mL、10.00 mg/mL和15.00 mg/mL 3种剂量的供试药液备用。
1.2 紫草中吡咯里西啶类生物碱对甜菜夜蛾的触杀活性试验
试验共设4个处理,处理1~处理3分别为5.00 mg/mL、10.00 mg/mL和15.00 mg/mL的紫草提取物生物碱,以60%乙醇水溶液为对照(CK),将甜菜夜蛾为靶标对象,常温条件下将甜菜夜蛾3龄幼虫浸渍于3种供试药液和60%乙醇水溶液之中,持续5 s,之后将其取出置于加入新鲜大白菜叶片的培养皿中,每个培养皿放10只幼虫,盖上保鲜膜,在保鲜膜上用针刺孔通气,每处理重复3次,于试验1 d、3 d、5 d之后观察甜菜夜蛾的死亡数,计算死亡率并进行校正。
1.3 紫草中吡咯里西啶类生物碱对甜菜夜蛾的拒食活性试验
通过浸叶法对生物碱的拒食活性进行判断。用打孔器把新鲜大白菜叶片制作叶碟,在常温条件下将其浸渍于3种供试药液和60%乙醇水溶液之中,持续5 s后取出置于培养皿中,并在每个培养皿中添加10只甜菜夜蛾幼虫,加入4片叶碟,同时将保鲜膜盖于培养皿之上,通过针刺保鲜膜给予培养皿中一定的氧气[2]。这一试验流程重复3次,并在试验1 d和3 d之后对甜菜夜蛾的实际情况进行观察,通过坐标值测量法对甜菜夜蛾的取食面积进行判定,记录中毒死亡的个数,按照如下公式计算拒食率。
2 结果与分析
2.1 紫草生物碱对甜菜夜蛾3龄幼虫的触杀效果
从表1看出,紫草生物碱能够对甜菜夜蛾3龄幼虫产生一定的触杀作用。随着浓度的提升和时间的延长,甜菜夜蛾3龄幼虫的死亡率均增加。当药液浓度达15.00 mg/mL时,幼虫的死亡率由(8.86±1.98)%增长至(34.44±1.64)%,增幅较大,证明了紫草总生物碱有一定的杀虫活性,但活性较弱也较缓慢。
表1 不同浓度紫草生物碱处理甜菜夜蛾3龄幼虫的触杀死亡率 %
2.2 紫草生物碱对甜菜夜蛾3龄幼虫的拒食效果
从表2看出,紫草生物碱对甜菜夜蛾有一定的拒食活性,不同浓度的拒食效果相差较大。在5.00 mg/mL的浓度之下,1 d拒食率为(38.23±1.95)%,但浓度为15.00 mg/mL时,1 d的拒食率高达(82.18±3.06)%。取食速度以对照组叶碟最快,并且在完成取食之后甜菜夜蛾的幼虫没有出现异常;处理组的叶碟取食速度较慢,且药液浓度越高取食率越低。取食处理组叶碟的试虫表现出活动力下降等中毒现象,说明紫草总生物碱具有一定的胃毒作用。
表 2 紫草生物碱对甜菜夜蛾3龄幼虫的非选择性拒食率 %
3 结论
甜菜夜蛾是一种世界性分布、间歇性大发生,以危害蔬菜为主的杂食性害虫,危害大葱、甘蓝、大白菜、芹菜、菜花、胡萝卜、芦笋、蕹菜、苋菜、辣椒、豇豆、花椰菜、茄子、芥兰、番茄、菜心、小白菜、青花菜、菠菜、萝卜等蔬菜,探寻良好的生物杀虫剂对其进行防治对提高蔬菜的食用安全性、减少农药污染显得尤为重要。试验结果表明,紫草生物碱能够对甜菜夜蛾3龄幼虫产生一定的触杀作用,药液浓度达15.00 mg/mL时,幼虫的死亡率由8.86%增至34.44%,但杀虫活性较弱也较缓慢。紫草生物碱对甜菜夜蛾有一定的拒食活性,高剂量的拒食活性效果较佳,浓度为15.00 mg/mL时,1 d的拒食率高达82.18%。紫草生物碱对害虫具有触杀作用和拒食作用,可将其作为杀虫剂原料进行开发利用。