脂肪酸转运蛋白4在肾透明细胞癌中的表达及临床意义

朱 军，唐 矛

（上海市宝山区中西医结合医院泌尿外科，上海 宝山 201900）

肾透明细胞癌（clear cell renal cell carcinoma，ccRCC）是最常见的肾恶性肿瘤类型，占所有肾细胞癌的80%~90%[1]，以含有脂质和糖原的透明细胞质为主要组织学特征。细胞质脂质含量增加提示ccRCC肿瘤细胞中脂质代谢发生改变，脂肪酸转运蛋白4（fatty acid transport protein 4，FATP4）属于哺乳动物长链脂酰辅酶A合成酶家族，通过与辅酶A的酯化作用激活脂肪酸。FATP4擅长激活超长链脂肪酸，且自身具有转运功能[2]。一项研究FATP4功能的报道表明，FATP2、FATP4的过度表达增强了人肝癌细胞对脂肪酸的摄取[3]。此外，Yen等研究提示了高FATP4表达与通过上皮间质转化的人类乳腺癌肿瘤进展相关[4]。本研究评估了ccRCC肿瘤组织和正常肾组织之间FATP4表达的差异。并分析了ccRCC病人中FATP4表达的临床病理特征的相关性，探讨其临床意义，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2017-12~2019-12本院收治的ccRCC病人80例为研究对象，根据国际抗癌联合会（UICC）TNM分类分期标准Ⅰ期25例，Ⅱ期39例，Ⅲ期10例，Ⅳ期6例。其中男性53例，女性27例，年龄51～79岁，平均年龄（63.7±8.5）岁。另选取40例因非肿瘤或肿瘤疾病手术切除的正常肾组织样本作为对照组，排除标准：排除伴有急性心肌梗死、严重感染性疾病、阻塞性肺病等。每例做成4μm厚的切片并做免疫组化。本研究通过医院伦理委员会审核批准。所有病人均签署知情同意书。两组病人的年龄、性别等一般资料差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 处理方法

收集经手术取得的组织标本，标本切片厚为5μm，全部标本均常规脱蜡、水化，免疫组织化学染色，采用免疫组化二步法测定FATP4的表达。将已知阳性片作为阳性对照标准，采用PBS取代第一抗体作为阴性对照。

结果判定：应用免疫组化S-P法染色，在免疫组化染色中，FATP4阳性信号为细胞浆或细胞膜的棕黄色颗粒物质。将每个组织切片在光镜下观察5个高倍视野（×200），统计阳性细胞数并计算阳性细胞率，根据阳性细胞在观察细胞中所占比例定义如下：阳性细胞数<25%（-），25%~50%（+），50%~75%（++），>75%（+++）。其中（++）和（+++）定义为高表达，（-）和（+）定义为低表达。

比较FATP4的阳性表达率在ccRCC病人不同临床病理特征中的差异。采用spearson秩相关分析FATP4的阳性表达率与临床病理特征的相关性。

1.3 统计学方法

应用SPSS 18.0软件处理数据，两组间的FATP4的阳性表达率的比较采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。FATP4的阳性表达率与临床特征的相关性分析采用spearson相关性分析（检验水准P=0.01）。

2 结果

2.1 FATP4在正常肾组织和ccRCC肿瘤组织中的表达率的比较

通过比较ccRCC肿瘤组织和正常肾组织中FATP4的表达，结果显示ccRCC肿瘤组织的FATP4的阳性表达率显著高于正常肾组织，差异有统计学意义（P<0.05）。

表1 FATP4在正常肾组织和ccRCC肿瘤组织中的表达（n，%）

2.2 FATP4表达与ccRCC临床特征的关系

FATP4的阳性表达在ccRCC病人的不同临床病理特征中的差异如下表所示，不同年龄、性别、临床分级病人之间FATP4的阳性表达差异无统计学意义（P>0.05），是否转移，是否伴肉瘤样特征病人的FATP4的阳性差异无统计学意义（P>0.05）。在TNM分期Ⅲ-Ⅳ的病人中，FATP4高表达的比率显著高于低表达的比率（P＜0.05）。在合并肿瘤坏死和复发的病人中，FATP4高表达的比率显著高于低表达的比率（P＜0.05）。提示FATP4高表达与TNM分期、肿瘤坏死和复发有关。

2.3 FATP4的表达和TNM分期、肿瘤坏死和复发的相关性分析

采用Spearson相关分析法对ccRCC组织中FATP4的阳性表达率进行相关性分析，结果显示ccRCC组织中FATP4的表达与TNM分期、肿瘤坏死呈显著正相关关系（P＜0.01），与是否复发无显著相关性。

3 讨论

表2 ccRCC病人中FATP4的表达

肾癌是全球第12位最常见的实体肿瘤[5]，ccRCC是最常见的组织学亚型，占所有肾脏肿瘤的90%左右[6]。ccRCC组织细胞起源于肾近端小管，具有丰富的透明细胞质，原因在于糖原和脂质含量较高。由于线粒体数量较多，因此也可能存在嗜酸性细胞或颗粒细胞[7]。ccRCC通常表现为15.3%~21.5%的转移率和71%~81.3%的5年存活率[8]。高达30%的病人在诊断时出现转移性疾病，约20%~30%的接受手术的受试者会复发。因此，早期诊断或探索敏感的因子对于提高这些病人的生存率至关重要。

脂质代谢失调被认为是肿瘤的特征之一，癌细胞不仅能合成脂肪酸，还会增强外源性脂肪酸的摄取，以应对特定遗传和环境条件下对脂肪酸的需求增加。有报告发现，在缺氧等代谢应激条件下，细胞外脂质清除是癌细胞维持活力和/或生长的重要适应机制[9]。另一项研究表明，当癌细胞从增殖状态转变为迁移状态时，会降低脂质的生物合成并依赖于外源性脂质摄取[10]。在各种实验模型中，已建议FATP作为膜转运蛋白和/或作为具有CoA合成酶活性的酶来促进长链脂肪酸的转运[11]。哺乳动物FATP家族由六个成员组成，FATP1到FATP6[12]。其中FATP4通常可在多种细胞中检测到，包括心脏、肝脏、大脑、肾脏、肌肉、皮肤和内皮细胞[13]。

本研究表明，ccRCC肿瘤组织中FATP4的表达高于正常肾组织，研究结果提示，通过FATP4跨细胞膜的脂肪酸转运增加可能是ccRCC的肿瘤特异性特征。此外，FATP4表达与ccRCC高TNM分期、肿瘤坏死和复发有关。这些结果表明FATP4在ccRCC肿瘤组织中的高表达可能有助于ccRCC的肿瘤发生和肿瘤进展。同时，ccRCC肿瘤细胞显示出FATP4表达显著增加，FATP4在80例ccRCC病人中有35例高表达。表明ccRCC细胞在代谢上与正常细胞不同，并且在肿瘤发生过程中更倾向于从细胞外来源摄取脂肪酸的机制。本研究结果与既往报道结果相似，毛英等研究结果显示FABP4可通过促进EMT等促进肿瘤细胞的侵袭[14]。

此外，临床上，肿瘤细胞中FATP4高表达与TNM分期、肿瘤坏死和肿瘤复发有关，与ccRCC的其他临床病理参数无相关性。推测其原因可能在于在ccRCC肿瘤组织中，FATP4的高表达可能会降低线粒体中脂肪酸的利用并促进脂肪酸通过质膜的摄取，导致细胞质积累并促进肿瘤进展[15]。

本研究又分析了ccRCC组织中FATP4的阳性表达率与临床特征的相关性，结果显示FATP4的表达与TNM分期、肿瘤坏死呈显著正相关关系（P＜0.01），与是否复发无显著相关性。提示随着ccRCC病人TNM分期的增加，病人FATP4水平随之升高（P<0.05），能够预测病人的严重程度。然而在本研究中，尽管在合并复发的病人中，FATP4高表达的比率显著高于低表达的比率，但FATP4的表达增加与是否复发无显著相关性。

综上所述，ccRCC肿瘤组织中FATP4的表达与肾癌的临床病理特征关系密切，包括TNM分期和肿瘤坏死，检测FATP4的阳性表达对于评估肾癌的恶性程度和预后具有重要临床指导价值。