转化生长因子-β与妊娠期亚临床甲减的相关性分析

杜碧君，王晨虹

(1. 广州医科大学附属第二医院妇产科，广东 广州 510260；2. 南方医科大学深圳医院妇产科，广东 深圳 518000)

亚临床型甲状腺功能减退症是以血清甲状腺激素正常，而促甲状腺素升高为特征的内分泌代谢性疾病，其发病率约占世界总人口的4%～10%，而且每年约有2%～5%会进展为临床型甲状腺功能减退症[1]。其病因尚不明确，目前国内外普遍认为亚临床型甲减与甲状腺的自身免疫功能受损有关系，尤其是与T淋巴细胞介导的细胞免疫调节密切相关[2]。有研究发现：调节性T淋巴细胞(Treg)产生的转化生长因子-β(TGF-β)在妊娠的生理过程中起重要作用[3-5]。但TGF-β对妊娠期亚临床甲减的发生，以及TGF-β与甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAB)之间的关系如何少见报道，因此，为了探索更加有效、准确的早期筛查妊娠期亚临床甲减的手段，本文作者回顾性分析了妊娠期亚临床甲减患者的相关资料，分析了TGF-β细胞因子与妊娠期亚临床甲减发生之间的关系，发现TGF-β对早期预测妊娠期亚临床甲减有一定帮助，值得临床推广，现汇报如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 回顾性分析66例2018年1月—2018年12月在我院确诊为妊娠期亚临床甲状腺功能减退症的孕妇，根据TPOAB是否阳性进行分组，分为TPOAB阳性组33例(A组)和TPOAB阴性组33例(B组)，与同期正常妊娠的33例孕妇(C组)进行病例对照研究。研究对象均达到妊娠期亚临床甲状腺功能减退临床诊断标准，诊断依据参照我国《妊娠和产后甲状腺疾病诊治指南》(2012年版)[6]，并排除高血压、糖尿病、血液病等影响甲状腺功能的相关疾病。

1.2观察指标 该研究经广州医科大学附属第二医院伦理委员会批准同意，所有孕妇均在知情同意原则下签署自愿接受随访和跟踪同意书。定期抽取晨起8时的外周血检查血清TGF-β、甲状腺相关激素(包括FT3、FT4、TSH)和TPOAB。

1.3检测方法

1.3.1激素检测 应用电化学免疫发光法进行甲状腺相关激素(包括FT3、FT4、TSH)的检测(仪器型号：贝克曼DX1800)，所检测原理和操作步骤均参照各种激素检测试剂盒的相关要求进行规范操作。

1.3.2抗体检测 采用北京利米生物科技有限公司的TPOAB抗体检测试剂盒(酶联免疫法)进行抗体的检测。操作步骤参照检测试剂盒要求。

1.3.3细胞因子检测 应用间接荧光染色法进行TGF-β因子的检测，取微量全血样本，采用流式细胞仪(型号：CytoFLEX，厂家：美国贝克曼库尔特公司)进行检测，获取1×105个细胞进行数据分析(分析软件：CellQuest)。

1.4统计学方法 所得数据均用EXCEL 2010进行保存，应用SPSS 19.0进行统计分析，三组比较采用单因素方差分析，两组比较采用t检验系数(Pearson)；计数资料比较用χ2检验；相关性采用双变量皮尔逊相关分析法进行分析；P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1一般资料比较 三组孕妇的一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性，见表1。

表1 三组孕妇一般资料比较

2.2甲状腺相关激素比较 亚临床甲减组FT3、FT4低于正常妊娠组，TSH高于正常妊娠组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 两组甲状腺相关激素比较

2.3外周血清TGF-β均值比较 66例妊娠期亚临床甲减患者的TGF-β显著低于同期正常妊娠者，差异有统计学意义(P<0.05)，见表2；但TPOAB阳性A组与TPOAB阴性B组之间比较，差异无统计学意义(P>0.05)，见表3。

表3 不同妊娠状态TGF-β均值比较

表4 不同TPOAB状态TGF-β均值比较

2.4Pearson相关分析 Pearson相关分析表明：TGF-β与妊娠期亚临床甲减(以下TSH数据作为运算依据)的发生呈负相关(r=-0.312，P=0.002)，与TPOAB不相关(r=-0.132，P=0.191)。

3 讨论

妊娠期甲状腺疾病主要包括妊娠期甲状腺功能亢进、亚临床型甲状腺功能亢进、妊娠期甲状腺功能减退症、亚临床型甲状腺功能减退症、低甲状腺素血症、甲状腺自身抗体阳性、产后甲状腺炎、妊娠期甲状腺毒症、碘缺乏、先天性甲状腺功能减退症、甲状腺结节性和甲状腺癌等。随着临床观察的深入，越来越多的孕妇表现为介于健康和临床甲状腺功能异常的中间状态，即出现促甲状腺素异常升高或者降低，而甲状腺素水平却在实验室正常参考范围内的状态。有研究显示，妊娠期甲状腺疾病中甲亢、临床甲减、亚临床甲减、单纯低甲状腺素血症发病率分别为1.0%、0.3%～0.5%、3%～5%、1.3%[7-8]。可见亚临床甲减的发病率最高，成为越来越多学者关注的焦点。

众所周知，Treg与辅助性T淋巴细胞(Th)是体内免疫调节的两大主帅，它们分别赋值不同的免疫调节功能，当两者比例达到平衡状态的时候，体内免疫系统得以稳定而保持常态，但当两者出现配比异常时，体内免疫应答机制就会被激活或启动，从而产生一系列的免疫反应。多数研究认为[9-10]：Treg是一种抑制性免疫调节细胞，主要产生负性调节作用，通过其表面的CD4+CD25+Foxp3分子信号通路启动对细胞增殖、细胞活化负性调节，从而抑制反应性T细胞、细胞毒性T细胞、效应性T细胞的功能，使机体免受自身免疫系统的攻击。而辅助性T淋巴细胞则是促进性调节细胞，包括Th1和Th2两种亚群。其中Th1细胞可以在白介素-12的作用下，分泌肿瘤坏死因子α、干扰素γ等，限制B淋巴细胞的功能，促进机体免疫反应，从而产生各种器官特异性免疫性疾病；Th2细胞则可以在多种白介素因子的作用下，参与B细胞成熟，介导体液免疫，促进抗原抗体免疫反应，对机体免疫活化或免疫启动起到正性调节作用。两种T淋巴细胞比例的失衡会导致多种疾病的发生已经在各学科都得到了国内外大量学者的检验和实证，已经成为了从自身免疫角度分析疾病发生的方向和主流。

国内外学者研究发现[11-12]：树突状细胞在启动和维持自身免疫性甲状腺疾病中起重要作用，同时还可对甲状腺细胞生长和激素分泌产生影响，它所分泌的一系列细胞因子可以诱导和激活免疫性炎症的发生，对调节无能/功能性T细胞，指导Th1/ Th2的极化有积极作用。陈玉敏等[13]发现Treg细胞的功能失衡在桥本氏甲状腺炎的发病中起着重要作用。Shum L等[14]发现TGF属于表皮生长因子家族中的一个成员，其基因位于人类2号染色体，是包含有50个氨基酸的残基单链多肽，其在正常人和动物的血液、尿液、唾液中都能检出，多见于生长迅速的细胞或组织，主要介导胞内信号传导，引起生物学效应。Emilce等[15]通过免疫组化的方法检测到在甲状腺病变的组织中存在大量的TGF因子表达。越来越多的研究也表明TGF与甲状腺疾病的发生有着重要关系。

我们在研究中也发现在亚临床甲减的患者中，不论是TPOAB阳性组(A组)或者是TPOAB阴性组(B组)，他们的TGF-β均显著低于正常妊娠组。这表明，发生妊娠期甲状腺功能减退的早期，孕妇体内自身免疫系统平衡可能出现了失常，体内调节性T淋巴细胞和辅助性T淋巴细胞的负性和正性调节功能不均衡，促使某些炎性细胞因子表达异常，尤其是甲状腺组织内这些炎性因子表达过高，就容易造成甲状腺细胞功能受损，从而更容易诱发甲状腺功能减退症的发生。因此，孕妇体内的生长因子TGF-β会表现为下降的水平，这对于早期诊断和预防妊娠期临床甲状腺功能减退症可能有一定的指导意义，值得深入研究。这与国内外学者在其他学科的研究有类似结论[16-17]。

此外，我们在研究中还发现：在确诊的66例亚临床甲减孕妇中，TPOAB阳性组与TPOAB阴性组的TGF-β相互比较却未见差异。相关性分析也提示虽然TGF-β与妊娠期亚临床甲减的发生呈负相关，但与TPOAB相关性却不高。出现这样的结果，前期研究我们认为：可能是样本量小、观察周期较短，误差偏倚较大或者是TGF-β与TPOAB的表达存在时间差而引起[18-19]。结合前期观察结果，我们认为亚临床甲减孕妇体内TGF-β的产生和变化可能受相对独立的调节系统所控制，其与TPOAB的关联不大，而TGF-β的产生受体内炎性免疫因子的干扰较大，对于免疫应答的反应性较敏感，当体内正性和负性调节系统出现失衡时，TGF-β会及时作出调节反应，而TPOAB敏感性较低，时效性不及TGF-β，这就类似两个不同的员工对于领导指示的理解和接受程度不同，从而导致所作出的反应和应答有差异相类似。在这种情况下，积极响应身体调节方向的TGF-β发生的变化调节会更早于TPOAB，因此，我们认为TGF-β可能是独立于TPOAB而存在的一个诊断指标，它在机体出现亚临床甲减的早期病理生理改变时就发生了早期的变化，它对于早期预测妊娠期亚临床甲减的发生可能更为敏感，值得临床上进一步推广研究。

综上所述，在进一步的深入研究中我们仍需要进行大样本、长时间的观察，并且对于TGF-β的调节发生和妊娠期亚临床甲减的发生的机制进行深入剖析。