血管内皮损伤生物标志物联合载脂蛋白A1、NALP3检测对青年痛风的诊断价值

吕 秋，李 伟，应长江

1.徐州医科大学附属淮海医院内分泌科，江苏徐州 221002;2.徐州医科大学附属医院内分泌科，江苏徐州 221000

痛风为一种嘌呤代谢紊乱性疾病，多为尿酸排泄障碍引起，发病率为1%～3%，男女患者比例为15∶1[1]。随着饮食和生活方式的改变，痛风患者有年轻化的趋势[2]。早期积极干预及降低尿酸水平能够延缓疾病进展或阻止脏器损害。核苷酸结合寡聚化结构域(NOD)样受体蛋白3(NLRP3)为NOD样受体家族成员，能够识别多种病原微生物，在炎性联级反应、固有免疫等过程中有重要作用[3]。载脂蛋白A1(ApoA1)是高密度脂蛋白(HDL)的结构蛋白，有着逆向转运胆固醇、抗炎、抗氧化、抗动脉粥样硬化的作用[4]。内皮素1(ET-1)和细胞间黏附分子1(ICAM-1)为临床常见的血管内皮损伤生物标志物，与心血管内皮损伤关系密切[5]。既往报道显示，ET-1、ICAM-1、ApoA1、NALP3均与痛风有关，但目前国内关于其联合应用于青年痛风诊断的报道较少[6-8]。本研究分析了血管内皮损伤生物标志物ET-1、ICAM-1联合ApoA1、NALP3诊断青年痛风的价值，旨在为临床工作提供参考。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2017年8月至2020年8月徐州医科大学附属淮海医院收治的123例青年痛风患者作为病例组，病程(7.85±2.13)年,其中慢性痛风69例、急性痛风54例；另外，选取同期在徐州医科大学附属淮海医院体检的健康者60例作为对照组。两组一般资料[包括性别、年龄、体质量指数(BMI)等]比较，差异无统计学意义(P>0.05)，见表1。纳入标准：(1)痛风的诊断参照《中国高尿酸血症与痛风诊疗指南(2019)》中的相关诊断标准[1]；(2)青年人群(年龄16～44岁)；(3)依从性好，可配合完成随访；(4)自愿签署知情同意书。排除标准：(1)继发性痛风；(2)合并代谢性疾病、自身免疫性疾病、血液系统疾病、传染性疾病、感染性疾病、恶性肿瘤、高血压、冠心病；(3)妊娠期或哺乳期妇女；(4)临床资料不齐全；(5)心、肝、肺、脑等重要脏器功能异常。本研究取得本院医学伦理委员会批准。

1.2方法 询问并记录受试者的吸烟史、饮酒史、高嘌呤饮食情况。于入院次日清晨采集肘静脉血5 mL，采用Optima MAX-XP台式超速离心机(贝克曼库尔特商贸有限公司)，以3 000 r/min离心15 min，分离血清，采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清ET-1、ICAM-1、NALP3水平，仪器为ELx808LBS酶标仪(北京泽平科技有限责任公司)，检测试剂为原厂配套试剂；采用透射免疫浊度法检测血清ApoA1水平，仪器为PUZS-300全自动生化分析仪(上海帝博思生物科技有限公司)，检测试剂为原厂配套试剂。

2 结 果

2.1两组一般资料及4项检测指标的比较 两组间吸烟史比较差异无统计学意义(P>0.05)；病例组有饮酒史、高嘌呤饮食比例显著高于对照组(P<0.05)；病例组血清ET-1、ICAM-1、NALP3水平显著高于对照组(P<0.05)，病例组血清ApoA1水平显著低于对照组(P<0.05)。见表1。

表1 两组间一般资料及4项检测指标的比较

2.2急、慢性痛风患者血清ET-1、ICAM-1、ApoA1、NALP3水平的比较 急性痛风患者血清ET-1、ICAM-1、NALP3水平显著高于慢性痛风患者(P<0.05)；急性痛风患者血清ApoA1显著低于慢性痛风患者(P<0.05)，见表2。

表2 急、慢性痛风患者血清ET-1、ICAM-1、ApoA1、NALP3水平的比较

2.3青年痛风的危险因素分析 性别、年龄、BMI和吸烟史都不具有统计学意义(P>0.05)；饮酒史(OR=3.384,95%CI：1.797～7.143)、高嘌呤饮食(OR=4.011,95%CI：1.439～10.058)、血清ET-1高水平(OR=2.996,95%CI：1.622～6.602)、血清ICAM-1高水平(OR=2.626,95%CI：1.865～7.127)、血清NALP3高水平(OR=2.342,95%CI：1.741～5.806)、血清ApoA1低水平(OR=2.757,95%CI：1.630～6.984)是青年痛风的危险因素(P<0.05)，见表3。

表3 青年痛风的危险因素分析

2.4血清ET-1、ICAM-1、ApoA1、NALP3水平与青年痛风的相关性 根据Spearman相关性分析，将不同类型的青年痛风分别赋值：慢性痛风=1；急性痛风=2。血清ET-1、ICAM-1、NALP3水平与急性痛风相关(r=0.813、0.657、0.663，P<0.05)；血清ApoA1水平与慢性痛风相关(r=-0.356，P<0.05)。

2.5血清ET-1、ICAM-1、ApoA1、NALP3对青年痛风的诊断价值 4个指标对青年痛风的诊断均有一定的准确度，4项指标联合检测的AUC>0.5，准确度比单个指标更高。ET-1、ICAM-1、ApoA1、NALP3单独检测的AUC比较，差异无统计学意义(P>0.05)；4项指标联合检测的AUC高于4项指标单独检测，差异有统计学意义(P<0.05)，见表4、图1。

表4 血清ET-1、ICAM-1、ApoA1、NALP3对青年痛风的诊断价值

图1 血清ET-1、ICAM-1、ApoA1、NALP3诊断青年痛风的ROC曲线

3 讨 论

痛风的病理基础为高尿酸血症，而高尿酸血症是心血管疾病的危险因素[9]。痛风的主要诱发因素是饮酒及高嘌呤饮食。目前青年人群的生活、饮食方式发生了显著改变，高尿酸血症和痛风的发病年龄在逐渐年轻化。调查发现，高尿酸血症在男/女童中的发病率分别为8.8%、0.6%[10]。研究显示，北京某高校新生中男生与女生的高尿酸血症的患病率分别为34.47%和11.64%[11]。有研究监测了5 896例17～95岁普通人群的尿酸水平，发现25岁及以下男性的平均尿酸水平相对较高[12]。可见痛风不只是中老年人群的常见病，青年人群也受到了该疾病的影响。痛风若不及时诊治，可导致痛风性关节炎、肾脏疾病及心血管系统疾病，危害患者健康。因此，早发现、早诊断、早干预对于改善青年痛风患者临床症状、控制疾病发展、减少或预防并发症意义重大。

ApoA1是载脂蛋白A家族中的重要成员之一，主要在肝脏和小肠中合成，可参与脂蛋白代谢，还可影响脂代谢相关酶活性、炎性细胞之间的相互作用，降低炎性反应程度。ApoA1水平与高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平呈正相关。ApoA1低水平是心肌梗死的危险因素，而ApoA1高水平可能具有保护效应[13]。ApoA1在高尿酸血症患者血浆中呈低水平，其水平检测可为后期治疗提供参考[14]。本研究显示病例组血清ApoA1水平显著低于对照组，这与既往报道相符[15]，提示ApoA1可能参与了青年痛风的发病过程；血清ApoA1低水平可提示青年痛风高风险，其原因可能为高尿酸水平引起血脂水平紊乱，导致血清ApoA1水平异常降低。NLRP3是炎性小体的组成部分，主要表达于单核细胞、巨噬细胞、T细胞等细胞的细胞质内，可调控促炎性细胞因子分泌，调节炎性反应和免疫细胞功能[16]。当炎性反应发生时NLRP3大量释放，其下游的促炎性细胞因子白细胞介素1β(IL-1β)水平会显著升高。NALP3与痛风的炎性反应密切相关[17]，IL-1β受体拮抗剂可以改善慢性痛风患者的临床症状，预防降尿酸水平治疗过程中的痛风急性发作。本研究提示NALP3在青年痛风患者血清中呈高水平，NALP3高水平是青年痛风的危险因素，这与以往的研究一致[18]。分析其原因，单钠尿酸盐晶体作为一个“危险信号”被细胞内模式识别受体识别，导致NALP3炎性小体形成，促使IL-1β前体迅速转化为成熟的IL-1β，从而诱导青年痛风发生。

ET-1是一种强烈的缩血管肽，由血管内皮细胞(VEC)分泌，可促进细胞外基质合成及细胞增殖，参与缺血、缺氧等情况下VEC损伤过程。ICAM-1是介导人白细胞(WBC)与内皮细胞黏附的重要分子，能够稳定细胞之间的相互作用，促进内皮细胞的活化和迁移，促进炎症受损部位的组织粘连。ICAM-1在静息的VEC中呈低水平表达，而在受损的VEC中呈高水平表达，是血管内皮损伤的重要标志物，与VEC损伤关系密切。本研究显示，病例组血清ET-1、ICAM-1水平显著高于对照组，这与郭敏等[19]的研究结果一致，提示ET-1、ICAM-1与青年痛风的发生有关。进一步分析发现，血清ET-1、ICAM-1水平与青年痛风呈正相关，且血清ET-1、ICAM-1水平越高青年痛风发生风险越大。有研究报道，高尿酸血症是VEC受损的危险因素，当高尿酸血症发生时，机体局部氧化应激的发生可导致ET-1、ICAM-1水平升高，造成局部血管内皮的炎性损伤，引起NALP3水平上升，同时高尿酸水平引起血脂水平紊乱造成血清ApoA1水平下降[20]，这可能解释了血清ET-1、ICAM-1、ApoA1、NALP3在青年痛风患者中水平异常的原因。进一步分析得出，血清ET-1、ICAM-1、ApoA1、NALP3联合用于青年痛风诊断的AUC为0.978，灵敏度为92.70%，特异度为95.00%，准确度为91.69%，提示血清ET-1、ICAM-1、ApoA1、NALP3联合用于青年痛风诊断具有较高的价值，若患者血清ET-1>77.82 pg/mL、血清ICAM-1>534.44 μg/L、血清ApoA1<0.87 mmol/L、血清NALP3>6.44 ng/mL，则提示青年痛风发生风险较大。此外，与痛风发生、发展有关的指标还有清蛋白、糖类抗原(CA)724、IL-1β、IL-6、IL-8等[21-23]，这些指标参与青年痛风的具体机制有待进一步研究。

综上所述，血管内皮损伤生物标志物ET-1、ICAM-1联合ApoA1、NALP3诊断青年痛风的价值较高。