周围型肺癌胸水T细胞亚群定量分析对生存时间的预测价值研究

田 文，魏志江，赵云燕，张菁华，高敬华

（沧州市中心医院肿瘤内科，沧州 061000）

周围型肺癌在各种类型的肺恶性肿瘤中占有相当比例和重要性，流行病学数字提示，周围型肺癌在全部原发性肺癌患者中所占比例约为30%上下，年龄和性别分布特征上以老年男性相对更为多见。恶性肿瘤患者因病情、化疗所造成的细胞毒性等，均由不同程度的免疫力下降，而免疫力低下是癌细胞蔓延、转移，导致病情进展的一个重要诱因，故提高患者免疫功能尤为关键［1-2］。 T淋巴细胞亚群分析是检测细胞免疫功能的重要指标，CD3+是外周血肿总的成熟T细胞，CD4+、CD8+分别为辅助性T细胞和抑制性T细胞，其与病情的发生以及发展均密切关联，因此可以为癌症转归预测提供细胞生物学方面的依据，与此同时，这些指标水平还与细胞周期关联紧密［3-4］。本文拟围绕周围型肺癌胸水T细胞亚群定量分析对生存时间的预测价值进行分析。

1 资料与方法

1.1 研究对象研究收集本院就诊且接受手术治疗的周围型肺癌患者（n=48）纳入本次研究作为试验观察组受试对象，病例收集时间为2015年3月～2019年3月；同期选取并接受其他开胸手术治疗的胸外科疾病（非肺癌）患者作为对照组（n=48），于术中留取患者的胸水脱落细胞液样本。分别于治疗前、治疗后，无菌环境下采集患者外周血，采用流式细胞仪检测淋巴细胞亚群及其组分比例分析。分别于治疗前、治疗后，采用欧洲癌调查治疗组织生存质量中心调查表评价患者的生活质量。入选标准：确诊的周围型肺癌患者，全部受试对象均经活检病例确诊；全部受试对象在均为本院接受治疗者。排除标准：中途转院患者；各种原因不能或不愿参与本研究以及不配合本研究的受试对象。研究中的试验与对照组患者基本特征充分可比，见表1。

表1 实验组与对照组患者一般资料分布特征（n，%）

1.2 研究方法分别于治疗前、治疗后，无菌环境下采集患者外周血，采用流式细胞仪（型号：DxFLEX，贝克曼库尔特公司）检测淋巴细胞亚群及其组分比例分析。分别于治疗前、治疗后，采用欧洲癌调查治疗组织生存质量中心调查表（European Organisation for Research and Treatment of Cancer Quality of Life Questionnaire Core 30，EORTCQOL-C30）［6］评价患者的生活质量。治疗相关毒副反应依据1992年WHO制定的“抗癌药物急性和亚急性毒副反应的表现和分度标准”进行评价，分为0～IV度。于治疗后根据RECIST标准（Response Evaluation Criteria in Solid Tumors）［5］对治疗效果进行评价，根据影像学检查结果分为完全缓解（Complete remission，CR）、部分缓解（Partial remission，PR）、病变稳定（Stable disease，SD）和疾病进展（Progression disease，PD），以CR+PR为临床有效，CR+PR+SD为临床受益，计算临床有效率、临床受益率。

由于本研究需要对周围型肺癌并接受手术治疗患者进行随访并根据随访信息进行生存分析。

1.3 统计学方法采用描述性统计学指标（根据数据类型分别使用率、构成比以及均数、标准差完成描述）对患者的基本情况进行统计学描述；采用t检验或两独立样本秩和检验比较周围型肺癌并接受手术治疗患者中位生存时间的影响因素；采用H检验分析影响患者生存的因素，同时绘制生存曲线比较不同组别周围型肺癌并接受手术治疗患者的生存情况差异。α=0.05为研究的统计检验标准（双侧概率）。

2 结果

2.1 试验与对照组患者临床有效率、临床受益率等疗效对比对比试验和对照组患者临床有效率未见差别有统计学意义（P＞0.05），但是实验组患者可见临床受益率更高（P＜0.05），见表2。

表2 试验与对照组患者临床有效率、临床受益率等疗效对比（n，%）

2.2 两组患者治疗前、治疗后T细胞亚群的比较治疗前，两组患者CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），治疗后，两组患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均较治疗前明显升高，CD8+明显降低，差异均具有统计学意义（P＜0.05）；治疗后，试验组患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+明显高于对照组患者，CD8+明显低于对照组患者，差异均具有统计学意义（P＜0.05），见表3。

表3 两组患者治疗前、治疗后T细胞亚群的比较

2.3 两组患者治疗前、治疗后生活质量的比较

治疗前，两组患者EORTCQOL-C30评分比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）；治疗后，试验组患者EORTCQOL-C30评分明显高于对照组患者，差异具有统计学意义（P＜0.05），见表4。

表4 两组患者治疗前、治疗后EORTCQOL-C30评分的比较（分）

2.4 两组患者毒副反应的比较两组患者毒副反应大多为I～II度，治疗期间心电图、肝肾功能等检查均未见异常。试验与对照组患者常见副反应的发生率差异均未见统计学意义（P＞0.05），如表5所示。

表5 两组患者毒副反应发生率的比较（n，%）

2.5 周围型肺癌并接受手术治疗患者生存分析此处采用H检验对影响患者中位生存时间的因素进行比较，结果显示，年龄、吸烟年限（年）、吸烟量（支/周）、周围型肺癌胸水T细胞亚群定量分析结果均为周围型肺癌患者生存时间的相关因素。具体结果参见表6、表7。

表6 患者中位生存时间的相关因素分析

表7 周围型肺癌胸水T细胞亚群定量分析与生存时间的相关性分析

3 讨论

周围型肺癌具有发病率、死亡率以及病死率“三高”的特点，T细胞亚群水平可有效调节细胞外的活化信号状态，保证细胞外活化信号持久向胞内表达，借以维持肿瘤的持续增殖。研究所选取的标本为胸水，这在既往研究涉及不多，故本研究拟进行讨论，但是因为胸水本身就与患者的病程存在直接关联，故后期通过分层等方法去除混杂影响。

当机体发生炎症或癌前病变时，体内的免疫反应被激活，诱发T细胞亚群水平发生变化，包括CD3+、CD4+、CD8+等，继而调节体内较为复杂的细胞因子水平［5-7］。本研究结果显示试验组患者治疗后可见CD3+、CD4+、CD4+/CD8+明显高于对照组患者，CD8+则更低，表明促进分泌炎症因子经一些列病例过程可能导致少突胶质细胞等的死亡，T细胞亚群释放细胞因子拮抗，以便体发挥保护作用。我们目前的研究表明CD3+、CD4+、CD8+的中CD3+、CD4+、CD8+表达升高与周围型肺癌的发展密切相关，为周围型肺癌患者胸水的研究机制提供了新思路［8-9］。

综合本研究结果，我们发现周围型肺癌胸水T细胞亚群定量分析对生存时间具有较为优质的预测价值。究其原因，一方面T细胞亚群定量分析用于T细胞计数、T细胞亚群分类和T细胞活化程度的测定，是反映机体细胞免疫功能的重要指标。当不同淋巴细胞亚群的数量和功能异常时，机体可导致免疫功能紊乱。流式细胞术是检测CD抗原最快速、准确、可靠的方法。检测肿瘤患者T淋巴细胞亚单位是否出现异常变化，可以有效了解机体免疫的动态，进而指导免疫调节剂等药物的临床应用；对于肿瘤患者来说，治疗中调节其免疫功能，增强抗肿瘤能力也是非常重要的。另一方面，周围型肺癌常常表现症状较少，甚至没有症状。发生胸膜喷发时可能会出现胸痛，咳嗽和呼吸急促。周围型肺癌，也称为肺野类型，是指出现在肺段以下的支气管中直至小支气管的肺癌。其从三级支气管开始并在呼吸细支气管上方的肺癌，在腺癌中更为常见。早期周围型肺癌的症状，局限在胸、肩某一部位，常无压痛点，轻度胸痛不一定伴有胸膜侵犯，但严重胸痛常见于本病晚期，且伴有广泛胸膜转移灶。早期周围型癌症状常无咳嗽，咯血量不多，纯血少痰，表现不够典型，此时结合T细胞亚群定量分析结果，对诊断本病具有重大意义。