广东茂名地区 112 例异常血红蛋白病例分析

陈美霞，陈红玲，杨越红，杨艳芳，罗胜和

（茂名市人民医院，广东 茂名 525000）

0 引言

异常血红蛋白是珠蛋白链结构异常的血红蛋白病，在我国已发现多种类型的异常血红蛋白，其中南方地区以HbCS、HbE、HbNew York、HbQ-Thailand等为多见。秦良谊[1]研究表明，我国异常血红蛋白病的平均发生率为0.337%，且南方地区(0.367%) 高于北方地区(0.290%)，呈高度分布不均一性和遗传多态性。随着生活水平的提高，广大群众对优生优育方面要求更高，国家在出生缺陷防控上越来越重视，重型地中海贫血严重威胁人类的健康，给重症地贫家庭带来巨大的经济负担。异常血红蛋白合并地贫时，不同基因型的组合可出现不同的表型变化，需结合是否合并地贫来进行异常血红蛋白病的遗传咨询。茂名地区为地中海贫血的高发区，异常血红蛋白发生率为0.79%，明显高于南方地区的发生率，而某些异常血红蛋白复合地中海贫血会导致中重度贫血[2]。因此对育龄夫妇血红蛋白疾病的筛查和遗传咨询具有重要意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2017年1月1日至2019年12月31日本院送检的，在我院产前诊断中心进行外周血全自动毛细管电泳的14516例成人为研究对象，对检测出的异常血红蛋白病例112例进行回顾性血液学指标分析及地中海贫血基因诊断，并对并对未知异常血红蛋白进行基因测序。

1.2 方法

1.2.1 血细胞参数分析

采用XE50000全自动血液分析仪进行红细胞参数分析，红细胞参数包括血红蛋白（Hb）、平均红细胞容积（MCV）、平均红细胞血红蛋白量（MCH）。

1.2.2 血红蛋白分析

采用法国Sebia公司 Capillarys 2 全自动毛细管电泳仪及其配套的试剂进行血红蛋白电泳分析，电泳图谱分成 15个区分区(Z1-Z15区)，鉴别Hb条带类型，并分析各条带所占相对比例含量。

1.2.3 地中海贫血基因分析

筛选出异常血红蛋白病例，进行地中海贫血基因检测，采用gap-PCR技术检测α-地贫的3种常见缺失（——SEA、-α3.7 及 -α4.2），采用反向斑点杂交技术（RDB）检测α- 地贫的 3种常见点突变（αCSα、αWSα 和 αQSα）和 β- 地贫的17种常见点突变。诊断试剂由亚能生物技术（深圳）有限公司提供。

1.2.4 α、β珠蛋白基因测序

挑出一些常规地中海贫血基因检测无法诊断的病例送深圳亚能生物技术有限公司进行α、β珠蛋白基因测序。

1.3 统计分析

采用 Excel 2019 及 SPSS 19.0 进行统计学分析。

2 结果

2.1 茂名地区异常血红蛋白发生率

14516 例外周血电泳结果中，检出含异常血红蛋白条带者 127 例，异常血红蛋白的阳性率为0.79%（112/14516）。其中 HbCS 25例，CS型HbH病6例，HbE27例，HbE复合β0-地中海贫血3例，Hb New York 26例，Hb New York复合IVS-Ⅱ-806双重杂合突变1例，Hb Q-Thailand 9例，Hb J-Bangkok4 例，Hb G-Honolulu4 例，Gγ+(Aγδβ)05 例，Hb G-Coushatta 1例；SEA-HPFH 1例。

2.2 CS型HbH病血液学特征

将31例Hb CS病例进行地中海贫血基因检测及血液学分析，地中海贫血基因结果均显示ααCS突变，包括 Hb CS 杂合子、HbCS复合α+-地贫及 Hb CS 复合α0-地贫（HbH-CS）。Hb CS杂合子和HbCS复合α+-地贫血液学表型接近临界，HbH-CS表现为中度贫血。地贫基因结果及血液学特征见表1。

2.3 HbE复合β0地中海贫血的血液学特征

将30 例HbE病例进行地中海贫血基因检测及血液学分析，地中海贫血基因结果均显示βE 突变，包括 Hb E 杂合子及 HbE复合β0-地中海贫血。HbE杂合子表现为轻度小细胞低色素贫血，HbE复合β0-地中海贫血表现为重度贫血。地贫基因结果及血液学特征见表1。

2.4 Hb New York的血液学特征

将27例Z11异常区带病例进行地中海贫血基因检测及血液学分析，地中海贫血基因结果均显示未见异常，送深圳亚能生物有限公司进行α、β珠蛋白基因测序，测序结果显示26例 Hb New York（GTG → GAG at codon113）in beta 杂合突变，1例Hb New York复合IVS-Ⅱ-806双重杂合突变，IVS-Ⅱ-806(G→C) in beta突变类型在人类异常血红蛋白地中海贫血库上未见报道，基因测序结果见图一、图二。Hb New York血液学表型正常，Hb New York复合IVS-Ⅱ-806双重杂合突变血液学表型表现为中度贫血。地贫基因结果及血液学特征见表1。

2.5 Hb Q-Thailand 与 -α4.2 缺失的关联性及血液学特征

将9例同时出现Z7和Z1异常区带的病例进行地中海贫血基因检测及血液学分析，地中海贫血基因结果显示7例 -α4.2/αα，2 例 -α4.2/-α4.2。送深圳亚能生物有限公司进行α、β珠蛋白基因测序，测序结果异常血红蛋白均为Hb Q-Thailand。地贫基因结果及血液学特征见表1。

2.6 Hb J-Bangkok的血液学特征

将4例Z12异常血红蛋白病例进行地中海贫血基因检测及血液学分析，地中海贫血基因结果均显示未见异常，送深圳亚能生物有限公司进行α、β珠蛋白基因测序，测序结果均显示为Hb J-Bangkok （GGC→GAC at codon56）in beta 杂合突变。地贫基因结果及血液学特征见表1。

2.7 Hb G-Honolulu的血液学特征

将4例同时出现Z6和Z1异常区带的病例进行地中海贫血基因检测及血液学分析，地中海贫血基因结果均显示未见异常，送深圳亚能生物有限公司进行α、β珠蛋白基因测序，测序结果均显示为Hb G-Honolulu （GAG→CAG at codon30）in alpha2 杂合突变。地贫基因结果及血液学特征见表1。

2.8 Hb G-Coushatta 的血液学特征

将1例Z6异常血红蛋白病例进行地中海贫血基因检测及血液学分析，地中海贫血基因结果均显示未见异常，送深圳亚能生物有限公司进行α、β珠蛋白基因测序，测序结果均显示为Hb G-Coushatta（GAA→GCA at codon22）in beta 杂合突变。地贫基因结果及血液学特征见表1。

2.9 HbF异常增高（ HbF＞15%）的血液学特征

将19例HbF异常增高的病例进行地中海贫血基因检测及血液学分析，地中海贫血基因结果显示未见异常。送深圳亚能生物有限公司进行α、β珠蛋白基因测序，测序结果5例为Gγ+(Aγδβ)0，1 例为 SEA-HPFH，13 例未见异常。1 例 Z1 异常血红蛋白和1例Z8异常血红蛋白未做α、β珠蛋白基因测序。地贫基因结果及血液学特征见表1。

表1 异常血红蛋白的分子特征及血液学表型(±s)

表1 异常血红蛋白的分子特征及血液学表型(±s)

异常 Hb 突变类型 例数 异常Hb电泳分区 地贫基因 Hb （g/L） MCV（fL） MCH（pg）Hb CS杂合子 20 Z2 ααCS/αα 124.5±19.1 82.3±3.5 27.4±1.2 HbCS 复合 α+- 地贫 5 Z2 -α3.7/αα 或-α4.2/αα 108.5±18.1 78.8±3.8 25.4±1.3 Hb CS复合 α0- 地贫 6 Z2、Z12、Z15 ααCS/——SEA 71.0±9.5 73.4±7.2 19.1±1.2 Hb E 杂合子 27 Z4 ββE/βN 115.8±23.9 74.4±6.5 24.4±2.8 Hb E复合 β0- 地贫 3 Z4、Z7 βCD17/ββE 45.5±14.1 61.8±2.4 17.0±0.9 Hb New York 26 Z11 未见异常 118.9±19.7 82.5±8.1 27.1±3.5 Hb New York复合IVS-Ⅱ-806 1 Z11 未见异常 68 61.2 17.6 Hb Q-Thailand 9 Z7 -α4.2/αα 或-α4.2/-α4.2 115.0±17.9 71.0±6.8 23.1±3.8 Hb J-Bangkok 4 Z12 未见异常 129.3±24.0 90.7±0.5 30.1±1.0 Hb G-Honolulu 4 Z1、Z6 未见异常 121.3±21.0 91.6±0.8 30.8±1.2 Hb G-Coushatta 1 Z6 未见异常 115 85 29.8 Gγ+(Aγδβ)0 5 Z7 未见异常 121.7±8.1 72.1±4.6 23.2±2.6 SEA-HPFH 1 Z7 未见异常 58 70 22未知异常 1 1 Z1 Z8——SEA/αα αWSα/αα 52 129 51.1 86.2 14.8 27.2

图1 Hb New York （GTG→GAG at codon113）in beta 杂合突变

图2 IVS-Ⅱ-806(G→C) in beta 杂合突变

3 讨论

本研究对茂名地区14516例研究对象调查显示，异常血红蛋白病的发生率为0.79%，高于广东省和全国的平均发生率[1]。异常血红蛋白病是由于珠蛋白基因缺陷导致血红蛋白分子结构发生改变的一组遗传性血红蛋白病，多数研究[2-7]表明，我国人群中，部分异常血红蛋白病仅有轻微的小细胞低色素性贫血，大多数没有明显的临床表现，但一些异常血红蛋白病的纯合子或者杂合子复合地中海贫血时会加重地中海贫血的临床表型，表现为中间型或重型地中海贫血，目前异常血红蛋白病缺少有效治疗手段，该类患者对家庭和社会造成一定负担。

本研究14516例研究对象中，检出 HbCS 31例，血常规及地贫基因检测发现6例为HbCS复合α0-地贫(HbH-CS)患者，临床表现为中-重度贫血，其中2例表现为重度贫血，需依赖长期输血治疗，其余4例表现为中度度贫血；检出HbE30例，血常规及地贫基因检测发现3例HbE复合β0-地中海贫血，血红蛋白分析提示血红蛋白成分以HbE和HbF为主，临床表现为重度贫血，需长期输血治疗。长期输血给家庭和社会带来了沉重的经济负担。血红蛋白毛细管电泳能有效筛出HbCS和HbE携带者，当夫妻双方中一方为HbCS或者HbE携带者时，另一方要特别注意地中海贫血基因检测，预防CS型HbH或者重型β地中海贫血患儿的出生。因此，血细胞参数分析和血红蛋白毛细管电泳联合筛查在预防出生缺陷中起到重要作用，应在育龄夫妇的婚检产检中大力推广。

Hb Q-Thailand是由于HbA1：C.223G＞C位点的突变导致的，且常与4.2缺失型α地贫连锁存在[8]。本研究检出Hb Q-Thailand 9例，基因型均为 -α4.2/αα 或 -α4.2/-α4.2，临床表现为轻微小细胞低色素贫血，当夫妇双方携带这类异常血红蛋白时，胎儿不需进一步产前诊断。

本研究检出27例Hb New York，临床表型正常，其中1例Hb New York复合IVS-Ⅱ-806双重杂合突变，IVS-Ⅱ-806(G→C) in beta突变类型在人类异常血红蛋白地中海贫血库上未见报道。临床表现为中度贫血（Hb68g/dl，MCV61.2fl，MCH 17.6pg）, 为研究其临床表型与该突变是否关联，日后将为该患者进行回访，有条件将进行家系分析。此发现丰富了中国人群 β- 珠蛋白基因突变谱。

本研究检出一例SEA-HPFH，临床表现为重度贫血，与杜丽等[9]报道不相符，本案例患者临床诊断为肾病综合征，重度贫血原因可能与肾病综合征有关；Z1区变异体案例临床表现为重度贫血，地贫基因结果为——SEA/αα，未做稀有地贫检测，该区变异体可能是δ地贫，贫血原因可能为δ地贫复合α0- 地贫所致。