原发性帕金森病患者血浆同型半胱氨酸水平分析

李变芳，韩奕勃，曲婧，刘济源，禹红梅，王军

（中国医科大学附属第一医院 1.神经外科；2.神经内科，沈阳 110001）

同型半胱氨酸（homocysteine，Hcy）是蛋氨酸代谢有关的含硫氨基酸，即蛋氨酸脱甲基产生的中间产物，在体内不能合成。当体内蛋氨酸代谢产生障碍时，过量Hcy在血浆中积聚，可导致高同型半胱氨酸血症（hyperhomocysteinemia，HHcy）［1］。既往研究表明HHcy与神经系统缺血性疾病密切相关，如脑动脉硬化等，而近年来的研究［2-3］表明，这种与缺血性脑血管病密切相关的危险因子也与许多神经系统退行性疾病有关，如有研究［4-5］显示导致HHcy相似的遗传因素与帕金森病（Parkinson disease，PD）易感性也可能相关。因此，本研究拟分析原发性PD、缺血性脑血管病与脑膜瘤患者的血浆Hcy水平，并与正常成人进行比较，同时探讨原发性PD患者血浆Hcy水平与其血浆维生素B12和叶酸水平的关系，以及不同病程PD患者血浆中三者的水平及相关性，为深入探讨Hcy在PD发病中的作用和机制提供依据。

1 材料与方法

1.1 临床资料及分组

1.1.1 PD组：选择2017年8月至2019年12月于中国医科大学附属第一医院行脑深部电刺激术（deep brain stimulate，DBS）前的原发 性PD患 者42例，男23例，女19例，平均年龄（62.48±7.29）岁，再根据病程分为≤5年组（11例）和＞5年组（31例）。纳入标准：符合国际帕金森与运动障碍协会诊断标准及中国PD DBS疗法专家组的DBS疗法适应证［6-7］；左旋多巴类药物治疗曾有较好疗效，疗效已显著下降或出现严重的异动症，影响患者生活质量。排除标准：脑卒中、颅脑损伤、药物等引起的PD综合征；多系统萎缩、黑质纹状体变性等帕金森叠加综合征；肝肾损伤功能衰退等疾病；痴呆或患有严重的精神疾病。

1.1.2 缺血性脑血管病组：选择同期就诊的缺血性脑血管病患者58例，男33例，女25例，平均年龄（65.21±8.99）岁，其中，颈动脉狭窄40例，椎动脉狭窄10例，合并狭窄及其他类型动脉狭窄8例。所有患者符合《中国急性缺血性脑卒中诊治指南2014》标准［8］。

1.1.3 脑膜瘤组：选择同期于我院神经外科手术且病理证实的脑膜瘤患者43例，男11例，女32例，平均年龄（55.39±9.06）岁。所有患者均符合2016年WHO中枢神经系统肿瘤分类诊断标准［9］。

1.1.4 正常对照组：选取高静等［10］的1项大样本健康成人血清Hcy水平分析研究，该研究共纳入体检健康者124例，男52例，女72例，平均年龄（64.24±7.41）岁。

1.2 方法

实验室检查前禁食与禁药12 h，采集清晨外周静脉血5 mL至含EDTA的真空管中，4 000 r/min离心分离血清血浆。采用高效液相色谱-荧光法测定血浆Hcy水平。采用免疫测定法测定血清维生素B12和叶酸水平。Hcy、维生素B12、叶酸正常值参考范围分别为5～15 μmol/L、145.00～637.00 pmol/L、8.83～60.80 nmol/L。

1.3 统计学分析

采用SPSS 25.0软件行统计学分析，计数资料以率（%）或相对数构成比（%）表示，采用χ2检验比较；各组数据进行正态性检验，符合正态分布的计量资料均采用t检验比较，数据用表示；根据变量正态分布情况，采用Pearson相关分析。采取双尾检验，P＜ 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 一般资料比较

PD组、缺血性脑血管病组与正常对照组性别、年龄均无统计学差异（P＞ 0.05），具有可比性；脑膜瘤组年龄与正常对照组无显著差异，该组性别与正常对照有显著差异，这与脑膜瘤好发于女性有关，见表1。

2.2 PD组、缺血性脑血管病组和脑膜瘤组血浆Hcy水平比较

PD组与缺血性脑血管病组血浆Hcy水平均显著高于脑膜瘤组及正常对照组，差异有统计学意义（P＜ 0.05）。PD组与缺血性脑血管病组HHcy阳性率均显著高于正常对照组及脑膜瘤组，差异有统计学意义（P＜ 0.05），而脑膜瘤组HHcy阳性率与对照组无统计学差异（P＞ 0.05），与组间血浆Hcy水平比较情况相似。进一步比较发现，PD组HHcy阳性率显著高于缺血性脑血管病组，差异有统计学意义（P＜0.01），见表1。

表1 4组临床资料比较Tab.1 Comparison of clinical data between case group and control group

2.3 PD组血浆Hcy与维生素B12、叶酸水平的相关性

Pearson相关分析显示，PD组血浆维生素B12和叶酸水平与Hcy水平均呈显著负相关（r=-0.390，P＜ 0.01；r=-0.450，P＜ 0.01）。

2.4 PD组血浆Hcy、叶酸水平与病程的关系

PD组中，病程＞5年组血浆Hcy水平显著高于病程≤5年组，差异有统计学意义（P＜ 0.01），病程＞5年组血浆叶酸水平明显低于病程≤5年组，差异有统计学意义（P＜ 0.01），见表2。表明PD患者血浆Hcy水平可能与病程有关，病程越长，Hcy水平越高。而病程＞5年组与≤5年组血浆维生素B12水平无统计学差异（P＞ 0.05）。提示PD患者HHcy可能与其血浆低叶酸水平有关。

表2 不同病程PD患者血浆Hcy、维生素B12、叶酸水平（）Tab.2 Plasma Hcy，vitamin B12，and folic acid levels in patients with PD at different stages（）

表2 不同病程PD患者血浆Hcy、维生素B12、叶酸水平（）Tab.2 Plasma Hcy，vitamin B12，and folic acid levels in patients with PD at different stages（）

2.5 不同PD病程组血浆Hcy与叶酸水平的相关性

Pearson 相关分析显示，PD病程≤5年组血浆Hcy与叶酸水平无明显相关性（r=-0.557，P＞ 0.05），PD病程＞5年组血浆Hcy与叶酸水平则呈显著负相关（r=-0.472，P＜ 0.01）。

3 讨论

HHcy最早被发现与动脉粥样硬化性心血管疾病密切相关，继而发现其是缺血性脑血管病危险因素之一，可能的相关机制是通过导致血管内皮细胞损伤，诱导炎症反应，促发低密度脂蛋白过氧化等，加剧了脑血管局部动脉粥样硬化栓塞形成，致使脑血管发生缺血性改变［11］。本研究发现，缺血性脑血管病组血浆Hcy水平明显高于正常对照组，这与众多研究结果相同。有研究［3］表明，Hcy除了在缺血性脑血管病中发挥重要作用，可能还与PD发展有关。PD是一种导致60岁以上老年人行动障碍的常见病，黑质多巴胺能神经元进行性减少是其主要病理改变［12］。本研究发现PD组与缺血性脑血管病组患者的血浆Hcy水平及HHcy阳性率均明显高于正常对照组与脑膜瘤组，且PD组血浆Hcy水平与HHcy阳性率均明显高于缺血性脑血管病组。本研究还发现，脑膜瘤病组患者血浆Hcy水平及HHcy阳性率与正常对照组无统计学差异，相当于PD组的阴性对照，这与既往研究［4-5］脑膜瘤与PD存在导致HHcy的相似遗传因素的结论不符，这可能与导致HHcy相关的遗传基因存在单核苷酸基因多态性等机制有关。目前HHcy在原发性PD发病中的作用及机制尚未清楚，可能与其导致缺血性脑血管病发生的机制存在一定相似性。相关研究提示HHcy促进PD发展的可能机制为：（1）加快动脉粥样硬化形成［13］；（2）促发氧化应激反应，损伤黑质多巴胺能神经元［14］；（3）诱导神经元凋亡［15］；（4）促进有突起的酪氨酸羟化酶阳性神经元细胞凋亡，抑制神经传导功能［16］。

本研究还进一步探讨了PD组血浆Hcy水平与PD病程、维生素B12、叶酸的关系。以往关于血浆Hcy水平与PD病程的研究不多，认为其与病程无关［17］。本研究发现，PD病程＞5年的PD组患者血浆Hcy水平明显高于病程≤5年组，差异有统计学意义（P＜0.01），提示血浆Hcy水平可能与PD病程有关，随着病程延长，血浆Hcy水平逐渐升高。大量研究［18］表明，维生素B12与叶酸是Hcy代谢循环重要的辅助因子，两者是决定血浆Hcy水平的主要因素，缺乏时会出现循环障碍，导致HHcy发生。推测病程＞5年PD患者组血浆Hcy水平高于病程≤5年组的原因可能与随着PD病程延长维生素缺乏程度加重有关。本研究结果显示，PD组血浆Hcy水平与维生素B12、叶酸水平均呈明显负相关（r=-0.390，P＜ 0.01；r=-0.450，P＜ 0.01），血浆Hcy水平与叶酸水平的负相关性更强。不同PD病程组血浆维生素B12、叶酸水平比较，发现病程＞5年PD组患者叶酸水平明显低于病程≤5年组，Hcy水平比较结果与之相反，与相关性分析结果一致，而血浆维生素B12水平不同病程组无显著差异，证实了上述推测，进一步提示叶酸缺乏可能是导致长病程PD患者发生HHcy的主要因素。DOS SANTOS等［19］研究证实，健康对照组血浆Hcy水平升高主要由维生素B12水平决定，而叶酸缺乏是PD患者血浆Hcy水平升高的决定因素，与本研究结果一致。结合本研究结果中病程＞5年的PD组患者血浆Hcy水平与叶酸水平负相关性较≤5年组更强（r=-0.472，P＜ 0.01 vsr=-0.557，P＞ 0.05），更证实了叶酸缺乏是导致PD患者发生HHcy的原因之一。此外，研究［20-21］显示，叶酸缺乏可致HHcy，可能增强多巴胺神经元对铁等其他神经毒性损伤的敏感性，从而导致多巴胺神经元损伤或死亡。本研究中，原发性PD长病程患者较短病程患者血浆叶酸水平低，Hcy水平高，提示随着PD病程延长，HHcy加重，可能加剧多巴胺能神经元进行性减少，从而加快疾病进程，导致PD患者多种临床症状的发展。

本研究选取的脑膜瘤组患者由于其自身发病特点，女性发病率高于男性，与正常对照组存在差异，其与PD组的疾病谱相差较大，但二者的易感性因素中存在导致HHcy的相似遗传因素。PD组均来自经神经内科评定符合DBS手术适应证的患者，大多为PD中晚期患者，其早期血浆Hcy、叶酸与维生素B12等数据无法完整获取，且未能获得影响患者血浆Hcy水平的左旋多巴类药物服用数据，样本量相对较少，可能对本研究结果有一定的影响。

综上所述，本研究发现，HHcy在不同神经系统疾病中的作用存在差异，与脑膜瘤关系较小，与PD和缺血性脑血管病则密切相关，HHcy可能是二者的危险因素。原发性PD患者血浆Hcy水平较脑膜瘤患者和正常对照人群显著升高。PD患者Hcy水平与血浆维生素B12、叶酸水平呈明显负相关。PD患者Hcy水平可能与PD病程有关，即病程越长，Hcy水平越高，这可能与叶酸进行性缺乏有关，HHcy可能是PD患者多种临床症状发展的因素之一。因此，原发性PD患者应定期检测血浆中Hcy、维生素B12和叶酸水平，保证维生素，尤其是叶酸的摄入，避免由于摄入不足引起HHcy，从而加速PD的进程。