高荧光淋巴细胞百分比对传染性单核细胞增多症的诊断价值

刘 娟， 冀旭峰， 刘玲玲， 杨 春， 王伯玉

（吉林大学白求恩第一医院检验科，吉林 长春 130021）

传染性单核细胞增多症是儿童常见病毒感染性疾病，常见于EB病毒、巨细胞病毒感染，传统诊断主要依据典型临床表现（不规则发热、咽峡炎、淋巴结肿大、皮疹、水肿）[1]和相关实验室指标检测结果[异型淋巴细胞百分比≥10%，EB病毒或巨细胞病毒抗原抗体检测为阳性]。异型淋巴细胞百分比增高诊断传染性单核细胞增多症特异性高[2]，但需要采集患儿静脉血进行涂片染色和镜下白细胞分类，耗时长（4 h），且需要阅片经验丰富的操作人员，临床应用受限。EB病毒和巨细胞病毒核酸定量检测诊断传染性单核细胞增多症特异性也较高，但成本高、耗时长，不适合在基层医院和普通二级甲等医院开展。高荧光淋巴细胞百分比（high fluorescence intensity lymphocyte percentage，HFLY%）可采用全自动血液分析仪进行检测[3]，是可快速筛查传染性单核细胞增多症的实验室指标。本研究旨在分析HELY%对传染性单核细胞增多症的诊断价值，同时探讨其与异型淋巴细胞百分比、EB病毒和巨细胞病毒负荷水平的相关性，为传染性单核细胞增多症的诊断提供有价值的实验室依据。

1 材料和方法

1.1 研究对象

选取2019年6—8月吉林大学白求恩第一医院儿科住院部传染性单核细胞增多症患儿50例（疾病组），其中男30例、女20例，年龄1～13岁。传染性单核细胞增多症诊断标准：（1）发热、咽炎、淋巴结肿大、肝脾肿大、皮疹中至少3项阳性；（2）淋巴细胞比例增高、异型淋巴细胞百分比≥10%、EB病毒抗体定量检测阳性、EB病毒或巨细胞病毒核酸定量检测阳性中至少1项符合。以同期吉林大学第一医院小儿发育咨询门诊50名儿童为对照组，其中男25名、女25名，年龄1～13岁，所有对照儿童无发烧、高热等临床症状，体检无异常。

1.2 方法

采集住院患儿首次住院、门诊患儿首次就诊时肘静脉血2管（3 mL），乙二胺四乙酸抗凝，1管用于HFLY%测定和异型淋巴细胞百分比检测，另1管用于EB病毒和巨细胞病毒核酸定量检测。

1.3 主要仪器与试剂

XN-9000全自动血液分析仪（日本Sysmex公司）及配套试剂、Multiskan MK3酶标仪（美国ThermoFisher Scientific公司）、LightCycler480Ⅱ实时荧光定量PCR仪（瑞士罗氏公司）及配套试剂、ALLegraX-12高速离心机（美国贝克曼库尔特公司）。

1.4 统计学方法

采用SPSS 19.0软件进行统计分析。呈正态分布的计量资料以±s表示，组间比较采用t检验。采用受试者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲线评价HFLY%诊断传染性单核细胞增多症的效能。采用Pearson相关分析评价HELY%与异型淋巴细胞百分比的相关性。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 疾病组与对照组HFLY%测定结果比较

疾病组HFLY%为（3.95±2.72）%，显著高于对照组[（0.31±0.26）%]（P＜0.05）。

2.2 疾病组与对照组异型淋巴细胞百分比测定结果

对照组异型淋巴细胞百分比均＜4%。疾病组异型淋巴细胞百分比均＞8%，其中5%～10%有4例，10%～20%有33例，20%～30%有10例，＞30%有3例。

2.3 疾病组与对照组EB病毒和巨细胞病毒核酸定量检测结果

对照组EB病毒和巨细胞病毒核酸检测均为阴性。疾病组中，EB病毒核酸阳性37例，巨细胞病毒核酸阳性3例。

2.4 HFLY%诊断传染性单核细胞增多症的性能

ROC曲线分析结果显示，HFLY%诊断传染性单核细胞增多症的曲线下面积为0.992，以0.85为临界值，敏感性为94.7%、特异性为95.89%。见图1。

图 1 HFLY%诊断传染性单核增多症的ROC曲线

2.5 HFLY%和异型淋巴细胞百分比的相关性

Pearson相关分析结果显示，HFLY%与异型淋巴细胞百分比呈正相关（r=0.581，P＜0.05）。

3 讨论

目前，临床诊断传染性单核细胞增多症主要通过临床症状和外周血异型淋巴细胞百分比、EB病毒和巨细胞病毒核酸载量确诊。异型淋巴细胞百分比是诊断传染性单核细胞增多症的常用指标，但此项检查全过程为人工操作，耗时长，1个病例检查时间要3～4 h，不适合用于临床儿科病毒感染性疾病初筛；而HFLY%可采用全自动血液分析仪检测，几分钟之内可获得结果，很好地弥补了这一不足。对HFLY%明显升高的患儿，进一步检测其外周血异型淋巴细胞百分比，再结合临床症状和EB病毒或巨细胞病毒核酸定量检测结果，即可做出诊断。

HFLY%是近年来新开发的分析参数，主要反映活化的淋巴细胞数量的变化，通过监测由病毒感染引起的活化淋巴细胞数量的变化，对EB病毒、巨细胞病毒引起的传染性单核细胞增多症进行早期筛查。本研究中，疾病组HFLY%水平显著高于对照组（P＜0.05），提示传染性单核细胞增多症患儿体内可能存在病毒刺激，导致淋巴细胞异常活化，高敏感的HFLY%明显升高；而对照儿童因不存在外部病毒的刺激，未出现明显的细胞免疫病理变化，故HFLY%数值无异常改变。

本研究ROC曲线分析结果显示，HFLY%对传染性单核细胞增多症有良好的诊断效能，曲线下面积为0.992，以0.85为临界值，敏感性为94.7%，特异性为95.89%。

本研究发现，HFLY%与外周血异型淋巴细胞百分比呈正相关（r=0.281，P＜0.05），疾病组50例患儿中有45例HFLY%明显升高，46例异型淋巴细胞百分比＞10%。有研究结果显示，HFLY%升高与异型淋巴细胞可能密切相关[4]，二者相结合可更准确、高效地诊断传染性单核细胞增多症。但部分传染性单核细胞增多症患儿HFLY%并未明显升高[5]，在这种情况下，则需结合EB病毒或巨细胞病毒核酸定量检测和临床症状等来明确诊断。

综上所述，HFLY%对传染性单核细胞增多症有较好的初筛价值。