血清中维生素浓度与结直肠癌患病风险的病例对照研究
2021-08-12张国超
张国超，练 睿
（1.中日友好医院普外科，北京 100029；2.中日友好医院急诊科，北京 100029）
结直肠癌是世界最常见的恶性肿瘤之一，每年有超过1800 万的新发病例和86 万的死亡病例，发病率居世界第三位[1]。其发病风险受遗传、环境、饮食等多种因素影响，其中饮食模式的不同起着重要的作用。
维生素是人体所必需的微量营养素，对肿瘤的发生发展具有重要作用[2]。但文献报道不同种类的维生素对结直肠癌的影响却并不一致[3，4]。因此，本研究选择163例病理确诊为结直肠癌的初治患者及同期的126 例健康查体者，初步探讨体内各种维生素水平与结直肠癌发病风险的关系。
1 对象与方法
1.1 研究对象
前瞻性连续选取2018年1月～6月间我院普外科收治的结直肠癌的确诊患者为病例组，同期在体检中心的健康查体者作为对照组。病例组纳入标准：（1）经病理证实为结直肠腺癌的初治患者；（2）能获得治疗前空腹血液标本，并同意参加本课题研究。病例组排除标准：（1）合并其他器官恶性肿瘤；（2）合并克罗恩病、溃疡性结肠炎等炎性肠病；（3）既往曾接受过胃肠道手术。对照组纳入标准：（1）结肠镜检查无异常发现；（2）能获得治疗前空腹血液标本，并同意参加本课题研究。排除标准同病例组。
本研究经中日友好医院临床伦理委员会批准，所有入组患者均签署知情同意书。
1.2 研究方法
所有研究对象使用EDTA 抗凝真空采血管采集空腹静脉血2ml，将血标本于离心机3000r/min离心10min，采集上清液，采用电化学发光法，分析血清中脂溶性维生素A、D、E 以及水溶性维生素B1、B2、B6、B9（叶酸）、B12和维生素C 的水平。分析仪器为天津市兰标电子科技发展有限公司LK3000VI 维生素检测仪，该仪器由中国科技大学、天津医科大学共同开发研制。
1.3 统计学方法
应用SPSS 22.0 进行统计分析。对定量资料使用Kolmogorov-Smirnov 检验法进行正态性检验，服从正态分布时采用均数±标准差进行统计描述，两组间比较采用独立样本t 检验。定性资料采用频数及百分比（%）进行统计描述，组间比较采用χ2检验。单因素分析P＜0.05 的指标作为自变量，进行多因素Logistic 回归分析，以探索患病的独立危险因素。
2 结果
共有163例结直肠癌患者纳入病例组，其中女65 例（39.4%）、男98 例（60.6%）；平均年龄55.3±12.4 岁。126 例健康受试者纳入对照组，其中女42 例（33.3%）、男84 例（66.7%），平均年龄50.8±13.3 岁（表1）。
2.1 病例组和对照组的血清维生素浓度分析
2 组受试者分别进行维生素A、D、E、B1、B2、B6、B9、B12和维生素C 的血清浓度检测。表1 示，在结直肠癌病例组中维生素B2、B6、B9、B12、C、D 和维生素E 浓度均低于健康对照组，具有统计学差异（均P＜0.05）。
表1 结直肠癌发病风险影响因素单因素分析
2.2 维生素的血清浓度与结直肠癌发病风险的多因素分析
表1 的单因素分析发现，2 组部分维生素血清浓度存在差异，提示维生素B2、B6、B9、B12和维生素C、D、E 低水平血清浓度可能会升高结直肠癌的患病风险，将其进行多因素Logistic 回归分析，显示维生素B6（P＝0.027）、维生素B9（P＝0.027）、维生素B12（P＝0.000）和维生素E（P＝0.026）是结直肠癌患病的独立因素，在结直肠癌患者中维生素B6、B9、B12和维生素E 的血清浓度要显著低于健康人群（表2）。
表2 结直肠癌发病风险影响因素的多因素分析
3 讨论
维生素通过调节DNA 甲基化、细胞的生长凋亡和机体细胞的免疫等过程对肿瘤的发生发展发挥重要作用。本病例对照研究比较了结直肠癌病例组与健康对照组常见的9 项维生素血清浓度差异，发现病例组维生素B2、B6、B9、B12和维生素C、D、E 显著低于对照组，进一步进行多因素分析提示血清低浓度水平的维生素B6、B9、B12和维生素E 可能是结直肠癌发病的危险因素。
3.1 B 族维生素水平与结直肠癌发病风险的关系及相关机制
B 族维生素（包括维生素B2、B6、B9和维生素B12）对DNA 甲基化、核苷酸合成、DNA 稳定性和DNA 修复起着重要作用[5]。
维生素B9作为一种酶辅因子存在于细胞中，是生物甲基化和核苷酸合成中的关键辅助因子，是DNA 合成、复制和修复所必需的，并在癌症预防中发挥作用。这两个过程中的每一个都被认为是导致癌症的最常见的机制之一[6]。在2010年，我国学者朱凡等[7]报道了低血清叶酸在结直肠癌发病过程中有一定作用。在2017年，对14 项队列研究和19 项病例对照研究进行的荟萃分析显示，维生素B9摄入量增加可以使结直肠癌患病风险降低25%左右[3]。本研究同样提示体内维生素B9水平越高，患结直肠癌风险越低。与之前研究结果基本一致。
维生素B6是丝氨酸羟甲基转移酶的重要辅酶，帮助合成5、10-亚甲基四氢叶酸，用于DNA合成和DNA 甲基化[6]。维生素B12还可作为蛋氨酸合酶的辅助因子，该酶将高半胱氨酸重新甲基化为蛋氨酸。蛋氨酸是用于蛋白质合成的必需氨基酸，或者可以被腺苷化为S-腺苷甲硫氨酸，后者是DNA 甲基化的甲基供体，对肿瘤的发生发展也起着重要作用。这2 种维生素的研究国内报道较少，西班牙的一项病例对照研究[8]结果发现，饮食中维生素B6的摄入量与结直肠癌风险呈负相关。另一项来自日本学者的研究[9]发现维生素B12的摄入量与结直肠癌风险呈负相关。在本研究中观察到的体内维生素B6和维生素B12的血清浓度水平越高，结直肠癌的发病风险就越低，证实了上述研究结果对我国国人也是适用的。
维生素B2作为亚甲基四氢叶酸还原酶的辅助因子，后者是增强DNA 完整性的关键酶，并通过促进DNA 甲基化所需的甲基供体的产生而参与表观遗传改变。有文献报道[10]，维生素B2在胃癌患者中水平较低，补充可以提高靶向治疗对胃癌的抗肿瘤作用。但维生素B2摄入量与结直肠癌患病风险却无明显关系[11]。本研究中，单因素分析发现维生素B2的水平在两组间存在差异，但多因素分析中这种差异并未有统计学意义，因此关于维生素B2与结直肠癌患病风险的关系尚需进一步研究探讨。
3.2 维生素E 水平与结直肠癌发病风险的关系及相关机制
维生素E 又称生育酚，主要存在于生物膜和脂蛋白中，通过抑制活性氧的产生、诱导抗氧化酶和抑制蛋白激酶C 来实现抗癌活性[12]。一项动物实验中，维生素E 可能通过调控细胞周期、肿瘤转移及炎症相关基因的表达促进肿瘤的发展[13]。与该基础研究结果不一致的是另一项荟萃分析，发现血清维生素E 的水平与结直肠癌患病风险呈负相关[14]。与本研究的结果一致。因此，维生素E 对于肿瘤的影响可能尚需进一步研究探讨，其对不同种类的肿瘤的作用可能不尽相同。
3.3 维生素水平与结直肠癌发病关系的价值
结直肠癌是我国常见的恶性肿瘤之一，并且发病率和死亡率均保持上升趋势。我国的饮食方式与西方国家存在着明显的差异，西方国家的研究结果并不能完全适用于我国，并且目前国际上对于体内维生素的标准水平也没有明确的规定，因此，我们需要用自己的数据来指导我国结直肠癌的防治，发现结直肠癌发病的危险因素，通过长时间的干预，以期达到降低结直肠癌发病率的目的。
但本研究的数据偏少，需要在后续的研究中扩大样本量，通过大数据的分析，确定各种维生素过量、正常和缺乏的界值，最终为结直肠癌发病评估提供参考标准和理论基础。
