术前血清TIMP-1、TIMP-2水平与肝切除术后肝功能延迟恢复的相关性研究*

陆 路，黎东明，吴晓勇，王学国，王太成，赵红岩，李 鹏

海南医学院第二附属医院肝胆胰腺外科，海南海口 570100

肝癌患者多合并慢性疾病，特别是肝切除术后患者易发生肝功能延迟恢复，增加围术期病死率及术后复发风险，不利于预后[1-2]。基质金属蛋白酶-1组织抑制因子(TIMP-1)、基质金属蛋白酶-2组织抑制因子(TIMP-2)已被证实可影响细胞外基质降解，使细胞外基质在组织内过度沉积[3-4]。而细胞外基质的过度沉积是肝纤维化发生、发展的主要因素之一[5]。本研究主要观察肝癌患者术前血清TIMP-1、TIMP-2水平与肝切除术后肝功能延迟恢复的关系，现报道如下。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2018年1月至2019年12月在本院接受肝切除术治疗的61例肝癌患者，全部患者及家属对此次研究知情，并签署同意书。(1)纳入标准：①组织病理检查结果确诊为原发性肝癌；②意识清醒，可以很好地配合研究的展开；③预计生存时间>3个月。(2)排除标准：①合并心、肾衰竭；②合并其他恶性肿瘤；③合并严重传染性疾病或感染性疾病；④合并免疫系统疾病。61例肝癌患者中男32例，女29例；年龄55～64岁，平均(59.32±2.03)岁；肿瘤最大径2.1～7.2 cm，平均(5.38±0.42)cm。本研究经本院伦理委员会批准实施。

1.2方法

1.2.1手术方法 全部患者均接受肝切除术治疗：全身麻醉后选择合适切口，根据病变部位、肿瘤大小，充分游离肝周围的韧带，钝性切开肝实质，缝合肝断面后放置引流，缝合伤口。

1.2.2肝功能延迟恢复评估及分组方法 参照文献[6]，将术后第1～5天内出现凝血酶原时间>20 s或血清胆红素>50 μmol/L的患者纳入延迟恢复组，其余患者纳入正常恢复组。收集两组患者的一般资料。

1.2.3术前实验室指标检测 (1)γ-谷氨酰转移酶、碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶、α-L-岩藻糖苷酶、甲胎蛋白：分别于两组患者接受肝切除术当天早晨抽取空腹状态下5 mL外周肘静脉血，经全自动生化仪(武汉盛世达医疗设备有限公司，BS-450型)检测；(2)中性粒细胞绝对值(NE)、淋巴细胞绝对值(LY)：分别于两组患者接受肝切除术当天早晨抽取空腹状态下4 mL外周肘静脉血，经全自动血细胞分析仪(南京贝登医疗股份有限公司，BC-5000型)检测；(3)TIMP-1、TIMP-2：分别于两组患者接受肝切除术当天早晨抽取空腹状态下5 mL外周肘静脉血，经智能型高效离心机[贝克曼库尔特商贸(中国)有限公司，Avanti JXN-30/26型]，以3 000 r/min的速度离心5 min后取血清，经酶联免疫吸附试验(ELISA)检测，试剂盒由合肥莱尔生物科技有限公司提供。

2 结 果

2.1肝功能延迟恢复发生情况 全部61例肝癌患者行肝切除术后，肝功能延迟恢复的患者有7例，延迟恢复率为11.48%(7/61)。

2.2延迟恢复组与正常恢复组一般资料、实验室指标水平比较 延迟恢复组术前NE及血清TIMP-1、TIMP-2水平高于正常恢复组，LY低于正常恢复组，差异均有统计学意义(P<0.05)。两组一般资料及其他实验室指标水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 一般资料、实验室指标在两组间比较

2.3肝癌患者术前血清TIMP-1水平与TIMP-2的相关性分析 双变量Pearson相关分析结果显示，肝癌患者术前血清TIMP-1水平与TIMP-2水平呈正相关(r=0.308，P=0.016)。见图1。

图1 肝癌患者术前血清TIMP-1水平与TIMP-2水平相关性的散点图

2.4影响肝癌患者肝切除术后肝功能延迟恢复的二元Logistic回归分析结果 将肝癌患者术前NE、LY及血清TIMP-1、TIMP-2水平分别作为自变量，术后肝功能恢复情况作为因变量(1=延迟恢复，0=正常恢复)进行分析，结果提示术前NE、LY及血清TIMP-1、TIMP-2水平是肝癌患者肝切除术后肝功能延迟恢复的影响因素(P<0.05)。见表2。

表2 影响肝癌患者肝切除术后肝功能延迟恢复的二元Logistic回归分析结果

2.5血清TIMP-1、TIMP-2检测预测肝癌患者肝切除术后肝功能延迟恢复的效能 ROC曲线(图2)分析结果显示，术前血清TIMP-1、TIMP-2水平单独及联合检测预测肝癌患者肝切除术后肝功能延迟恢复的AUC均>0.80，预测价值较理想，且以联合预测效果最佳。各指标对应的最佳阈值、特异度、灵敏度及约登指数见表3。

图2 血清TIMP-1、TIMP-2水平单独或联合检测预测肝癌患者肝切除术后肝功能延迟恢复的ROC曲线

表3 血清TIMP-1、TIMP-2水平单独或联合检测预测肝癌患者肝切除术后肝功能延迟恢复的效能分析

3 讨 论

研究指出，80%～90%肝癌患者合并不同程度的肝硬化，肝硬化可降低患者肝组织的再生能力，进而增加肝切除术后肝功能延迟恢复的风险[7]。还有研究指出，肝切除术后肝功能延迟恢复的患者具有较高的肿瘤复发风险，且术后生存时间显著缩短，增加术后病死风险，不利于预后[8-9]。为提高患者生存率，临床应早期评估肝癌患者肝切除术后肝功能延迟恢复的风险，并给出针对性的建议，指导治疗方案的拟定。

张军等[10]研究指出，肝癌患者肝切除术后肝功能延迟恢复发生率为10%～13%，严重影响患者预后。本研究纳入61例肝癌患者，经肝切除术后发生肝功能延迟恢复的患者有7例，发生率为11.48%，与上述研究结果相近。这表明肝癌患者经肝切除术后存在肝功能延迟恢复的风险，故分析肝癌患者肝切除术后肝功能延迟恢复的影响因素及可能的风险预测因子，对改善预后意义重大。肝癌的发生、发展与全身或局部炎性反应密切相关，炎性反应的发生可使大量新血管生成，损坏脱氧核糖核酸(DNA)，进而促进肝脏癌变程度进一步发展[11]。NE、LY是常见炎性反应标志物，二者对肝癌肝切除术后肝功能恢复的影响也被本研究证实，简单分析原因：中性粒细胞可引发炎性反应及疼痛，影响肝组织的凝血功能[12]。淋巴细胞作为体积最小的白细胞，是发挥免疫应答功能的重要细胞，可主导淋巴系统内的大部分免疫功能，通过影响免疫功能，继而影响肝功能的恢复[13]。但需注意的是，NE、LY具有不稳定性，进而影响研究的可靠性及准确性，故单独使用二者来评估术后肝功能延迟恢复的发生风险局限性大。

有研究指出，细胞外基质的合成及降解与肝功能密切相关，而在细胞外基质降解过程中起关键作用的是基质金属蛋白酶(MMPs)[14]。作为锌离子依赖酶，MMPs能够明显降低胶原的稳定性，进而为其他蛋白酶的降解创造条件[15]。TIMP-1、TIMP-2已被诸多研究证实是一组能够明显降低MMPs活性的多肽，不仅能够与MMPs非共价结合，降低MMPs活性，还可结合酶原，不利于MMPs活化以及细胞外基质降解，继而影响肝功能[16-17]。本研究对比延迟恢复组与正常恢复组患者的血清TIMP-1、TIMP-2水平并进行Logistic回归分析，结果显示，术前血清TIMP-1、TIMP-2水平是肝癌患者肝切除术后发生肝功能延迟恢复的影响因素，初步提示术前血清TIMP-1、TIMP-2水平与肝癌患者肝切除术后肝功能延迟恢复有关。究其原因：正常情况下，基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMPs)与MMPs共同维护机体稳态[18]。当体内细胞外基质大量生成时，MMPs可通过降解细胞外基质，避免肝组织内细胞外基质过度沉积，降低肝纤维化的发生风险，继而促进肝功能的恢复[19]。但当体内血清TIMP-1、TIMP-2过表达时，可显著降低MMPs活性，进而影响细胞外基质的降解过程，加重器官、组织的受损程度，继而不利于器官功能的恢复[20]。此外，有报道显示，TIMP-1、TIMP-2还可促进成纤维细胞、内皮细胞等多种细胞增殖，进而为心肌纤维化的发生、发展创造有利条件，不利于预后[21]。

为了进一步明确术前血清TIMP-1、TIMP-2水平与肝癌患者肝切除术后肝功能延迟恢复的关系，本研究绘制ROC曲线发现，术前血清TIMP-1、TIMP-2单独及联合检测预测肝癌患者肝切除术后肝功能延迟恢复的AUC均>0.80，预测价值较理想，且以联合预测效果最佳。上述结果均证实，术前血清TIMP-1、TIMP-2水平与肝癌患者肝切除术后肝功能延迟恢复有关，可作为肝功能延迟恢复风险的预测指标。此外，本研究还对这两个血清指标的水平进行变量间的相关性分析，结果显示，肝癌患者术前血清TIMP-1水平与TIMP-2呈正相关，提示肝癌患者术前血清TIMP-1与TIMP-2可相互影响、相互作用，共同参与了肝癌患者肝切除术后肝功能的延迟恢复，但具体机制尚未明确，且相关研究较少，仍需要在未来进一步开展大样本、长时间的研究加以验证分析。

综上所述，肝癌患者肝切除术后仍有肝功能延迟恢复的风险，可能与患者肝切除术前血清TIMP-1、TIMP-2水平异常有关，临床可考虑通过术前检测患者血清TIMP-1、TIMP-2水平来预测患者术后肝功能延迟恢复的发生风险，以指导早期干预，改善患者预后。