不同方法检测特殊医学用途婴儿配方食品中硒含量

郭美娟，张 斌，张春林，李俊娣，张兰天，史国华

（河北省食品检验研究院，河北省食品安全重点实验室，河北 石家庄 050200）

硒是人体必需的微量元素之一，它是多种蛋白质和酶的必要组成部分，具有抗氧化、抗炎和调节甲状腺激素等功能[1]。研究表明，硒对新生儿，尤其是早产儿的健康和发育有至关重要的作用[2]。婴儿食用含硒量低的乳粉可能会引起硒缺乏，对婴儿健康造成影响，近年来，婴幼儿配方乳粉中有强化硒的倾向[3-4]，因此准确测定婴幼儿配方乳粉、特殊医学用途婴儿配方食品中硒的含量非常重要。GB 25596—2010《食品安全国家标准 特殊医学用途婴儿配方食品通则》[5]中规定，特殊医学用途婴儿配方食品中硒的限量为0.48～1.90 µg/100 kJ。

特殊医学用途婴儿配方食品与婴幼儿配方食品的基质区别较大[6-8]。GB 5009.93—2017《食品安全国家标准 食品中硒的测定》[9]可用于食品包括婴幼儿配方乳粉中硒的检测，并没有针对特殊医学用途婴儿配方食品的检测方法，因此在特殊医学用途婴儿配方食品中的适用性有待研究。国内外关于硒检测方法的研究很多，目前文献已报道的检测方法有原子吸收光谱法[10]、原子荧光光谱法[11]、荧光法[12]、电感耦合等离子体-质谱法[13-14]及电感耦合等离子体-发射光谱法[15]等。其中，原子荧光光谱法和电感耦合等离子体-质谱法为检测乳粉中硒最常用的测定方法。本研究联合7 家实验室分别采用以上2 种常见方法对不同种类和配方特殊医学用途婴儿配方食品中的硒含量进行测定，研究硒检验方法的适用性，以推动特殊医学用途婴儿配方食品检测方法的完善[16]。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

选用市售婴儿配方乳粉参考样品和不同品牌、不同配方的特殊医学用途婴儿配方食品，分别为乳蛋白部分水解配方乳粉3 种、早产/低出生体质量配方乳粉2 种、无乳糖配方乳粉1 种。特殊医学用途婴儿配方食品的样品编号及具体配方信息如表1所示。共7 个实验室，每个实验室6 个样品，共42 个样品。

表1 样品信息Table 1 Information about samples tested in this study

1.2 方法

样品前处理及硒含量测定分别采用GB 5009.93—2017第一法（氢化物原子荧光光谱法）和GB 5009.93—2017第三法（电感耦合等离子体-质谱法）。

1.3 数据处理

使用Microsoft Office Excel 2007软件和SPSS软件进行数据处理。

2 结果与分析

2.1 婴儿配方乳粉参考样品硒含量测定结果

采用婴儿配方乳粉参考样品作为参考，参考值由具有ISO 17043资质的实验室基于EN14122、EN14152、EN14164和EN15652的内部检测方法，依据能力验证统计方法计算得出。

由表2可知，7 家实验室采用GB 5009.93—2017第一法测得的硒含量普遍偏低，采用GB 5009.93—2017第三法测得的硒含量均与参考值相近，2 组数据的标准偏差比相同。

表2 婴儿配方乳粉参考样品硒含量测定结果Table 2 Results of determination of selenium content in reference samples of infant formula

Z值=（测试结果－中位值）/测试结果的标准四分位数间距，|Z|≤2为满意结果，2＜|Z|＜3为可疑或有问题结果，|Z|≥3为不满意结果。Z值用来衡量测试结果在一组数据中相对于中位值的偏离程度，|Z|越大，表明该结果的偏离程度越高[17]。

由表3可知，除实验室2采用GB 5009.93—2017第一法测得的Z值为－2.0以外，其余|Z|＜2，证明检测结果满意。通过婴儿配方乳粉参考样品的检测结果，验证了2 种检测方法在婴儿配方乳粉中的适用性，同时验证了参与的7 家实验室的检验能力能够满足本研究的要求。

表3 婴儿配方乳粉参考样品Z值测定结果Table 3 Z values for selenium content in infant formula

2.2 采用GB 5009.93—2017第一法检测特殊医学用途婴儿配方食品中硒含量测定结果

根据GB/T 27404—2008《实验室质量控制规范 食品理化检验》[18]中对精密度的要求，被测组分含量为1 mg/kg时，实验室内变异系数为11%。由表4可知，实验室间变异系数为8.5%～14.2%，说明实验室间结果存在一定差异性。

表4 GB 5009.93—2017第一法硒含量测定结果Table 4 Results of determination of selenium content in real samples by hydride generation atomic fluorescence spectrometry

ZB值是指实验室间测定结果的Z值，用来衡量实验室间测试结果的系统误差。由表5可知，除实验室3的早产/低出生体质量配方样品D检测结果ZB值为3.6、实验室7的乳蛋白部分水解配方样品A和B的检测结果ZB值为－2.1和－2.2外，其他检测结果|ZB|≤2，精密度符合检测要求。

表5 GB 5009.93—2017第一法硒含量测定结果ZB值Table 5 ZB value for selenium content in real samples determined by hydride generation atomic fluorescence spectrometry

2.3 采用GB 5009.93—2017第三法检测特殊医学用途婴儿配方食品中硒含量测定结果

根据GB/T 27404—2008规定，实验室内变异系数应小于11%。由表6可知，只有无乳糖配方样品C和乳蛋白部分水解配方样品F的变异系数低于11%，其他样品测定结果的实验室间变异系数均大于11%，说明各实验室间检测结果存在差异。

表6 GB 5009.93—2017第三法硒含量测定结果Table 6 Results of determination of selenium content in real samples by inductively coupled plasma mass spectrometry

由表7可知，除实验室3的早产/低出生体质量配方样品D和实验室7的乳蛋白部分水解配方样品E的测定结果|ZB|大于2，其余所有7 个实验室检测结果的|ZB|≤2，说明检测结果精密度符合实验要求。

表7 GB 5009.93—2017第三法硒含量测定结果ZB值Table 7 ZB value for selenium content in real samples determined by inductively coupled plasma mass spectrometry

2.4 加标回收率实验结果

分别对乳蛋白部分水解配方样品A、早产/低出生体质量配方样品B和无乳糖配方样品C进行加标回收率实验，标准物质添加量与样品含量基本一致，验证2 种方法的测定准确度。

GB/T 27404—2008规定，被测组分含量在1～100 mg/kg时，实验室加标回收率应为90%～110%。由表8可知，采用GB 5009.93—2017第一法的硒加标回收率测定结果，乳蛋白部分水解配方样品A，有4 家实验室超出90%～110%的范围，早产/低出生体质量配方样品B有2 家实验室为85%，其余均符合要求，无乳糖配方样品C仅有实验室2加标回收率为75%，较低。采用GB 5009.93—2017第三法的硒加标回收率测定结果，乳蛋白部分水解配方样品A测定结果实验室1、2均高于110%，早产/低出生体质量配方样品B实验室1、2、6均高于110%，无乳糖配方样品C同样是实验室1、2高于110%。从实验室角度看，实验室1的检测结果加标回收率均高于100%，4 个样品的加标回收率高于110%，可能与实验室检测过程中存在系统误差有关。实验室2采用GB 5009.93—2017第一法的加标回收率均低于90%，第二法的加标回收率均高于110%，也可能是由于实验室检测过程中存在系统误差。特殊医学用途婴儿配方食品加标回收率达不到国标要求的原因主要是由于特殊医学用途婴儿配方食品基质特殊且复杂，与普通婴儿配方乳粉基质也有着很大区别，且各配方之间差异性较大。

表8 各实验室加标回收率测定结果Table 8 Spiked recoveries of selenium obtained by different laboratories

3 结 论

除了本研究中的乳蛋白部分水解配方、早产/低出生体质量配方和无乳糖配方，常见的特殊医学用途婴儿配方食品还包括无乳糖配方或低乳糖配方、乳蛋白深度水解配方、氨基酸配方、婴儿营养补充剂和氨基酸代谢障碍配方[19]。无论从配方还是基质来看，特殊医学用途婴儿配方食品是一类既特殊又复杂的食品。每类特殊医学用途婴儿配方食品均有其自身的配方特点[20-21]。本研究选取的3 种配方是特殊医学用途婴儿配方食品中较常见且较有代表性的配方。本研究结果表明，GB 5009.93—2017第一法和GB 5009.93—2017第三法均适用于婴儿配方乳粉中硒含量测定，在特殊医学用途婴儿配方食品各种配方中的适用性有待进一步研究。