妊娠期糖尿病孕妇外周血T细胞亚群及线粒体损伤指数的临床意义

寿亚琴，吴朝勇，王爱萍

妊娠期糖尿病（GDM）指在妊娠后首次发现或发病的糖尿病，是一种常见的妊娠并发症，对母儿均可造成不良影响[1]。有学者在GDM孕妇的外周组织中观察到氧化应激、线粒体功能障碍和内质网应激等异常[2-3]；也有学者认为免疫功能及炎性反应与GDM的发生与发展有密切关系[4-5]。本文通过分析GDM孕妇外周血中T细胞亚群的水平及线粒体损伤指数，探讨GDM孕妇外周血中上述指标的变化特点及其临床意义，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集2020年1—10月浙江省绍兴市人民医院住院分娩的孕妇，其中观察组为GDM孕妇42例，GDM诊断标准符合《妇产科学》第八版。排除：（1）孕前糖尿病，所有孕妇孕期均饮食控制，未使用胰岛素；（2）孕前有免疫系统疾病及家族史；（3）同时有其他妊娠期合并症及并发症者。随机抽取同期孕周、年龄与观察组相匹配的葡萄糖耐量正常、无产科合并症及并发症的健康孕妇45例为对照组。观察组平均年龄（26.4±3.3）岁，平均孕周（37.8±2.4）周；平均孕次（2.1±0.9）次。对照组平均年龄（26.4±3.6）岁，平均孕周（38.2±3.2）周；平均孕次（2.2±1.1）次。两组一般资料差异无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 方法 入院时常规对每位孕妇进行T细胞亚群相关指标进行检查，空腹抽取孕妇静脉血2 ml，注入含肝素的无菌管中送检。采用流式细胞仪（安捷伦Novocyte）检测外周血T细胞亚群（包括CD3+、CD4+、CD8+、Mito Dye），根据Mito Dye（线粒体染色）数值匹配内置算法得出辅助性T细胞（Th）及抑制性T细胞（Ts）线粒体损伤指数。

1.3 统计方法 采用SPSS 22.0统计软件进行分析，计量资料以均数±标准差表示，采用t检验；计数资料采用2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组T细胞亚群比较 两组CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+差异均有统计学意义（均P＜0.05），见表1。

表1 两组T细胞亚群比较

2.2 两组Th及Ts线粒体损伤指数阳性率比较 观察组Th及Ts线粒体损伤指数阳性率均高于对照组（均P＜0.05），见表2。

表2 两组Th及Ts线粒体损伤指数阳性率比较 例（%）

3 讨论

B淋巴细胞和T淋巴细胞是人体中主要的两大淋巴细胞群体，在免疫系统中发挥着不同的功能。B淋巴细胞主要参与体液免疫应答，T淋巴细胞主要参与细胞免疫应答；T淋巴细胞亚群在维持免疫稳态方面有着重要的作用[6-7]，其中CD4+和CD8+T淋巴细胞是免疫调节的中心环节，常见的T淋巴细胞包括以CD4+T细胞为主的辅助性T细胞（Th细胞），以CD8+T细胞为主的抑制性T细胞（Ts细胞）以及控制体内自身免疫反应性的调节性T细胞（Treg细胞）[8]。

本研究结果显示GDM孕妇外周血中CD3+、CD4+及CD4+/CD8+比值均低于对照组（均P＜0.05），与邓丽等[9]的研究结果一致；这说明GDM孕妇存在免疫功能紊乱，CD4+T细胞可以通过自分泌或旁分泌细胞因子参与代谢性炎症的启动和维持。有学者研究发现在2型糖尿病患者中外周血促炎性T细胞亚群比例增加，可能是脂毒性条件下各种免疫细胞、可溶性因子、信号通路及肠道微生物均诱导CD4+T细胞向促炎性亚群分化[10]。基于目前大多数研究，GDM和2型糖尿病具有类似的临床特征，即均存在胰岛素分泌缺陷或胰岛素抵抗，以及GDM部分可转化成2型糖尿病，GDM可能也存在类似的免疫功能紊乱导致的炎症启动过程。

Th及Ts线粒体损伤指数是对T细胞进行线粒体染色之后通过流式细胞仪对染色强度分析结合内置算法得出的结果，阳性结果代表存在异常的氧化应激。本研究结果显示GDM孕妇Th及Ts细胞线粒体损伤阳性率明显高于正常孕妇。线粒体是真核细胞的重要细胞器，是机体能量代谢的中心，是产生活性氧（ROS）的重要器官，同时又对ROS氧化损伤异常敏感[11]。GDM孕妇T细胞亚群的线粒体损伤结果异常表明体内可能存在异常的氧化应激。有研究表明在体内高血糖状态下，有2种途径可以诱导氧化应激：（1）高血糖诱导自身氧化，这是体内ROS增多的主要原因；（2）诱导体内抗氧化酶糖基化，这一过程导致体内抗氧化酶活性降低或消失[12]。这2种途径均与糖尿病患者的高血糖状态紧密相关。

综上所述，监测T细胞亚群线粒体损伤指数、CD4+及CD8+为研究GDM的发病机制提供了一个新的视角，同时，抑制体内异常氧化应激，维持免疫功能平衡也为GDM的治疗提供了一个新的思路。