孕妇B族链球菌感染情况及不同分娩方式对妊娠结局的影响

王佩佩，童郁，林建萍

B族链球菌（GBS）为革兰阳性球菌，属于一种条件致病菌，常定植于女性的生殖道及直肠。研究结果表明，妊娠晚期生殖道GBS感染的发病率较高，对孕妇和新生儿的结局影响较大[1]。GBS传播途径主要为垂直传播，与分娩方式相关[2]。PCR检测GBS有较高的敏感度和特异性，一般检测结果有4种情况：（1）阴道阳性、肛门阴性；（2）阴道阴性、肛门阳性；（3）阴道肛门均阴性；（4）阴道肛门均阳性。临床上认为阴道和肛门任何一个部位阳性，均判为GBS阳性。本研究探讨孕妇GBS感染情况及不同分娩方式对妊娠结局的影响，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集2018年8—12月在浙江省温州市人民医院进行产检的GBS感染孕妇370例，平均年龄（31±10）岁，平均孕周（36±2）周。将740例孕妇阴道和肛门样本按照不同部位感染情况分为阴道阳性、肛门阴性组（阴+肛－），阴道阴性、肛门阳性组（阴－肛+），阴道肛门均阳性组（阴+肛+）。同时将370例GBS阳性患者根据分娩方式分为顺产组和剖腹产组。纳入标准：（1）孕周为35～37周；（2）妊娠期无其他菌群及病毒感染；（3）未有染色体异常或患有代谢性缺陷病；（4）均知情同意，愿意参加此次研究。排除标准：（1）多胎妊娠；（2）孕妇存在习惯性流产史；（3）未获得随访跟踪资料。

1.2 方法

1.2.1 主要试剂及仪器 GBS核酸检测试剂盒（采购于博尔诚科技有限公司）、HR60-ⅡA2生物安全柜、涡旋混合器、Thermo Fisher高速冷冻离心机、ABI7500荧光定量PCR仪、MB-102金属浴、SW-CJ-IFD 超净工作台及HYCD-282A医用冷藏冰箱。

1.2.2 标本采集 将女性阴道内部及周围过多的分泌物拭去，使用一根医用无菌拭子于阴道1/3处沿着阴道壁轻轻旋转一周取得足量阴道分泌物，将采集完毕的拭子置入无菌管中后密闭保存送检。另取一根医用无菌拭子于肛门括约肌上2～3 cm处沿着肠壁轻轻旋转一周得到足量直肠分泌物，将采集完毕的拭子置入医用无菌管中后密闭保存送检。

1.2.3 GBS检测 将1 ml无菌0.9%氯化钠注射液加入拭子中，置于涡旋震荡器中充分混匀，取0.6 ml含有生殖道分泌物或直肠分泌物的0.9%氯化钠注射液于离心管中，13 000 r/min离心3 min，弃上清。沉淀（如不明显可再次离心）加入50 l DNA提取液充分混匀，置于99～100℃金属浴中加热裂解10 min，13 000 r/min离心3 min，DNA提取完毕。将试剂盒中的GBS反应试剂分装入反应管中后，各加入5 l处理好的DNA样品上清、空白对照品、阳性对照品，短暂离心使液体均沉于反应管底部（不可出现气泡），转入扩增区进行PCR扩增。扩增循环参数为：50℃2 min、95℃5 min、95℃5 s→60℃35 s（45个循环），反应体系40 l。

1.3 统计方法 采用SPSS 19.0统计软件进行分析，计数资料采用2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同分娩方式与妊娠结局的关系370例GBS阳性患者顺产232例，剖宫产138例。顺产组与剖宫产组胎膜早破、宫内感染及胎儿窘迫发生率差异均有统计学意义（均P＜0.05），见表1。

表1 不同分娩方式与妊娠结局的关系 例（%）

2.2 3组PCR检测结果与妊娠结局的关系 3组胎膜早破、宫内感染、胎儿窘迫发生率差异均无统计学意义（均P＞0.05），见表2。

表2 3组PCR检测结果与妊娠结局的关系 例（%）

3 讨论

GBS是一种寄生于人类下消化道及泌尿生殖道的细菌，健康人群带菌率可达15%～35%[3]。有研究表明，孕晚期孕妇感染GBS易引发生殖道细菌感染，进而形成胎膜早破和子宫内膜感染等，也可引起早产及胎儿窘迫等，GBS感染会对妊娠结局带来不良影响[4-8]。其主要致病机制可能由于孕晚期孕妇机体抵抗力相对较弱，GBS感染可导致磷脂酶A、前列腺素和细胞因子的释放，促使子宫收缩引发早产及胎膜早破等。生殖道GBS感染患者胎膜破裂后，增加宫内感染和绒毛膜羊膜炎及新生儿感染的风险。

据研究报道，在美国，孕妇发生生殖道GBS的感染率为10%～30%[9]。国内报道孕晚期妇女GBS带菌率有所不同，其中李东等[10]报道北京地区的孕妇GBS感染率为9.6%，侯雅萍等[11]报道上海地区孕妇GBS的感染率为6.3%，张怡等[12]对黑龙江地区孕妇的研究报道显示其GBS带菌率为15.84%。由于年龄、经济状况、地域差异及检测方法不同等，其导致GBS的感染率有所差异。

本研究应用PCR荧光探针技术进行检测，相比于传统细菌培养法，PCR荧光探针技术检测GBS有较高的敏感度和特异性，是妊娠晚期孕妇常规检测GBS感染的首选方法[13]。本研究结果显示3组GBS检测结果与孕妇不良妊娠结局的发生率均无明显相关性，这提示阴道单独带菌或肛门单独带菌与GBS阳性产妇不良妊娠结局发生率并无明显的关系，可能原因是女性泌尿生殖系统较特殊，其阴道与肛门邻近，无论是阴道还是肛门周围都存在大量细菌，这两个部位的GBS定植会相互作用。有研究发现，任意部位的GBS定植都是可以间断的，在某个时间仅有肛门GBS定植筛查阳性，但至分娩时可能阴道GBS定植阳性，两个部位同时筛查是检测孕妇GBS定植最有效的方法，筛查阳性阴道、直肠标本联合检测可提高GBS检出率[14-15]；同时检测肛门与阴道带菌结果可减少漏检的情况。本研究顺产组的胎膜早破、宫内感染及胎儿窘迫的发生率高于剖宫产组（均P＜0.05）。分析原因可能由于女性GBS感染后，体内蛋白水解酶含量增加导致胎膜张力减低，造成胎膜早破的情况，胎膜破裂后，由于胎膜的屏障作用消失，外界细菌可经阴道进入羊膜腔，经阴道分娩导致细菌上行感染至子宫，增加宫内感染的情况；而由于宫内发生感染之后，子宫内部微环境改变，造成胎儿缺氧，进而提高了胎儿窘迫的发生率。

综上所述，不同部位GBS感染结果与妊娠不良结局无相关性，GBS阳性患者的分娩方式与妊娠不良结局的发生有相关性，这提示临床工作中需要对GBS感染引起重视。