上皮性卵巢癌中FAT4、YAP1表达及临床意义

刘彪

山东省单县中心医院妇产科，山东单县274300

上皮性卵巢癌的发病率和病死率均明显的上升，流行病学研究表明[1]，上皮性卵巢癌的发病率可达（495～694）/1万人左右。临床上上皮性卵巢癌的发生，能够导致患者5年生存率和无瘤生存时间的缩短，导致患者短期内生存预后的恶化[2]。生物学实验研究显示，上皮性卵巢癌的增殖、凋亡过程与生物因子改变有关，生物因子通过调节肿瘤相关信号通路，促进卵巢癌的病情进展和阻断。果蝇ft同源基因（FAT4）是重要的肿瘤瘤的发展，提高癌细胞的mRNA转录水平，进而持续性促进上皮性恶性肿瘤的扩增和转录过程，促使肿瘤细胞增殖，提高癌细胞的异变和远端转移的风险[3-4]。该文选取2018年2月—2020年2月该院保存的卵巢癌组织标本92例，探讨了FAT4、YAP1的表达与上皮性卵巢癌发展的临床相关性及内部机制，为临床上皮性卵巢癌治疗提供参考和提示，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

以该院检验科室保存的卵巢癌组织标本为研究对象，总样本数为92例，将其纳入观察组，年龄26～65岁，平均年龄（50.15±9.81）岁。纳入标准：①均经病理学确诊；②术前未行放化疗等抗肿瘤治疗；③医院伦理会同意，且与家属签订知情同意书。排除标准：①合并有其他恶性肿瘤者；②临床资料不完整。同时选取卵巢良性肿瘤标本90例作为对照组，年龄28～68岁，平均年龄（50.10±10.24）岁。两组瘤患者年龄比较差异无统计学意义（t=-1.312，P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

将样本进行石蜡固定，脱水切片，然后脱蜡并在20℃环境下的H2O2中孵育10 min，用缓冲液（磷酸盐）冲洗3次。每日用封闭液（8%蛋白粉）进行封闭2 h，然后进行抗原拮抗（兔来源浓度1:1 000～1 500）；拮抗后用用缓冲液（磷酸盐）冲洗3次，并在4℃冰箱静待12 h；取出样品，并进行二次抗原拮抗（鼠来源1:400～500），然后在20℃环境下孵育20～30 min，用缓冲液（磷酸盐）冲洗3次；然后，进行标记物标记（辣根酶或碱性磷酸酶），室温孵育在20℃环境下孵育10 min，用缓冲液（磷酸盐）冲洗3次，最后加入着色剂，并进行二次复染，脱水和封片。

1.3 处理结果判断标准

FAT4、YAP1阳性表达主要定位于胞质，呈黄色颗粒状物质，每张切片取出>10个视野（随机且无重复），每个目镜下统计>100个肿瘤细胞，①着色效果评分：阳性细胞比例＜10%为0分，10%～25%为1分，＞25%～75%为2分，＞75%为3分；②染色强度评分：无色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分。两项评分之和，≤3分为阴性表达，≥3分为阳性表达。

1.4 观察指标

观察两组的FAT4、YAP1阳性率、年龄、肿瘤直径、FIGO分期、病理分级、病理类型和淋巴结转移，以及FAT4与YAP1相关性。

1.5 统计方法

利用SPSS 21.0统计学软件进行数据分析，计数资料以[n(%)]表示，组间比较采用χ2检验。采用Spearman相关系数进行相关分析。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组FAT4、YAP1表达比较

观察组的FAT4和YAP1蛋白阳性率高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。卵巢癌与卵巢良性肿瘤的免疫组化见图1。

图1 卵巢癌与卵巢良性肿瘤的免疫组化组Figure 1 Immunohistochemistry of ovarian cancer and benign ovarian tumors

表1 两组FAT4、YAP1表达比较[n(%)]Table 1 Comparison of FAT4 and YAP1 expression between the two groups[n(%)]

2.2 FAT4阳性率与卵巢癌临床资料关系

病理分级为低分化的患者中，FAT4蛋白阳性率与高分化+中分化组患者对比差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 FAT4阳性率与卵巢癌临床资料关系[n(%)]Table 2 Relationship between the positive rate of FAT4 and the clinical data of ovarian cancer[n(%)]

2.3 YAP1阳性率与卵巢癌临床资料关系

低分化、浆液类型的患者中，YAP1蛋白阳性率与高分化+中分化、黏液类型的患者对比差异有统计学意义(P<0.05)，见表3。

表3 YAP1阳性率与卵巢癌临床资料关系[n(%)]Table 3 Relationship between the positive rate of YAP1 and the clinical data of ovarian cancer[n(%)]

2.4 FAT4与YAP1表达率的相关性分析

将卵巢癌患者FAT4与YAP1表达进行相关分析，结果显示：FAT4与YAP1表达呈正相关（rs=0.479，P<0.05），见表4。

表4 FAT4和YAP1表达率的相关性分析Table 4 Correlation analysis of expression rate of FAT4 and YAP1

3 讨论

上皮性卵巢癌的病情进展率较高，短期内可合并有明显的远处转移或者盆腔腹腔转移，长期的临床随访观察研究发现，上皮性卵巢癌的3年生存率不足40%，综合性治疗措施治疗后，上皮性卵巢癌患者的无瘤生存时间不足18个月[5-6]。现阶段临床上缺乏上皮性卵巢癌可靠性分子标志物，虽然癌胚抗原或者糖链抗原125能够在上皮性卵巢癌的诊疗过程中发挥重要的参考作用，但一项囊括了204例样本量的上皮性卵巢癌分子生物学相关研究证实，依靠癌胚抗原或者糖链抗原评估卵巢癌发生风险或者临床预后灵敏度仍然较低，其对于卵巢癌的标志性作用仍然不足。而该次研究中观察组的FAT4和YAP1蛋白阳性表达率分别为73.91%和76.09%，明显高于对照组（P<0.05）,胡紫薇等[7]认卵巢癌组中FAT4的阳性表达率为（72.23±1.22）%，大于70%,YAP1蛋白阳性表达率为（76.82±0.32）%，大于75%，且YAP1蛋白阳性表达率大于FAT4的阳性表达率，与该文研究保持一致，也提示上皮性卵巢中的FAT4、YAP1可以作为临床上卵巢癌诊疗提供理论方面的参考。国内研究认为FAT4是果蝇ft基因家族成员，其能够通过对于癌细胞内转录调控因子的磷酸化修饰作用，提高核转录基因的激活程度，促进癌细胞的变形能力、浸润能力等能力的改变。FAT4使癌变细胞周围组织出现mRNA转录异常，促进癌细胞对附近正常组织的浸润，实现癌细胞的转移[8]；YAP1是yes相关蛋白，其作为HIPPO信号通路上重要的效应分子，能够通过诱导下游肿瘤相关蛋白的上调，促进癌细胞细胞周期的调控紊乱，抑制癌细胞的凋亡[9]。基础方面的研究也认为，YAP1的表达上升能够促进癌细胞内下游cycclin D1的表达，进而抑制癌细胞的分化，导致癌细胞异型性的显著改变[10]，上述分析进一步验证该文研究结果。

国内外研究资料显示[11-13]：FAT4、YAP1参与上皮性卵巢癌的发展：①FAT4的上升能够促进癌细胞基因错配修复能力的下降，导致癌基因的激活程度的上升，影响到了癌细胞的正常分化成熟过程；②YAP1阳性率的升高，可以活化HIPPO下游信号通路，增强周围正常组织的mRNA的异化程度，持续性促进卵巢上皮细胞的增殖。罗晓等研究者[14]也认为，卵巢癌病变组织中，YAP1蛋白的阳性率高于正常组织30%以上，良性病变组织20%以上。部分出现远端转移的合并有盆、腹腔癌的患者，远端病变组织中YAP1蛋白的阳性率是原发病变组织中阳性率的20%，进一步说明YAP1蛋白的阳性率与上皮性卵巢癌的增殖、凋亡和转移有关。该文的免疫组化染色分析结果显示：病变组织中FAT4、YAP1蛋白集中于间质，或者细胞膜，提示FAT4、YAP1参与细胞间或者癌细胞内信号的传递，进而影响到卵巢癌的病情进展过程。在探讨FAT4、YAP1的表达与卵巢癌临床病理特征的关系过程中，可以发现在临床病理分级较差的患者中，FAT4蛋白的表达明显上升，胡紫薇等[7]认为FAT4蛋白的表达明与病理分级存在正相关性，与该文相关研究结果一致。同时，该文研究结果也提示了FAT4的表达与卵巢癌患者临床病理特征的关系，提示FAT4蛋白阳性率参与周围组织，或者癌变组织mRNA的转录异化，促进周围细胞的癌变，或者加剧癌细胞病理分级的进展程度，相关研究认为[15-17]，FAT4参与卵巢癌组织的mRNA转录，促进细胞癌变和分级，与该文研究结果一致；而病理分级为低分化、浆液性癌患者YAP1蛋白阳性表达率明显的上升，提示了YAP1蛋白的表达与卵巢癌患者病情的关系，提示YAP1蛋白阳性率上述，加速癌细胞的分化，促使其增殖、恶化，甚至远端转移，相关研究结果显示[18-21]，YAP1在卵巢癌分化、转移过程中，呈现阳性表达，与远端转移相关，与该文研究结果一致。卵巢癌组织FAT4与YAP1表达呈正相关（rs=0.479，P<0.05）可 见，FAT4与YAP1表 达 呈 正 相 关，提 示 了FAT4、YAP1在促进卵巢癌病情进展的过程中可能发挥了一定的协同作用，相关研究结果显示[22-24]，FAT4、YAP1与卵巢癌的严重程度存在正相关性，并参与卵巢癌病情的发展，与该文相关研究结果一致。

综上所述，上皮性卵巢癌中FAT4、YAP1表达明显升高，与患者临床病理特征有一定关联，值得进一步研究。该次研究的局限性在于未能探讨FAT4、YAP1的表达与卵巢癌的生存预后的关系。