自体CIK细胞联合CLAG-M方案在挽救治疗复发难治性急性髓系白血病患者中的应用分析

谢凤玲

单县中心医院血液内科，山东单县274300

急性白血病主要是指人们机体内的造血干细胞出现功能异常，继而使其细胞无法成熟，甚至发育停滞的恶性克隆性血液系统疾病，主要表现为出血、感染、髓外组织器官浸润等，其病发机制与物理辐射、化学药剂、遗传等因素有关，而复发难治性急性髓系白血病（RR-AML）是常发于成年人群的白血病[1-2]。急性髓系白血病（AML）发病机制复杂，通常是多种作用下的结果，对于化疗耐药性强，所以，该病具有复发性、难治性特点。该病主要因髓系造血干细胞与祖细胞恶性病变，主要特点为：骨髓、原始随性细胞、外周血内幼稚髓性细胞异常增生。发病机制为摆阔细胞膜能量以来外排泵，凋亡耐受FLT3等。临床针对该病症主要以CLAG-M化疗干预，可有效改善患者病情，但该病症需患者接受长期治疗，但化疗刺激较大，随治疗时间的延长，患者耐受性下降，易出现感染等多种并发症，大大增加了患者的病死率[3-4]。近年来随着对RRAML研究的深入，有数据证实，给予患者自体细胞因子诱导杀伤细胞（CIK）干预，可有效提高患者化疗耐受性，与CLAG-M方案联合治疗，可有效降低患者骨髓抑制期的感染率[5-6]。但针对自体CIK细胞联合CLAG-M化疗方案治疗RR-AML患者的效果分析，临床鲜有报道。因此，该文以该院2016年8月—2019年8月收治的56例患者为例，对该方法的治疗效果进行探究分析，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取该院收治的RR-AML患者56例，数字表法随机分为两组，各28例。该次实验方案已经医院伦理委员会审核批准。对照组男13例，女15例；最小年龄33岁，最大75岁，平均（53.26±3.62）岁。观察组男14例，女14例；最小年龄34岁，最大76岁，平均（53.62±3.42）岁。两组一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

纳入标准：经诊断均符合《复发难治性急性髓系白血病中国诊疗指南(2017年版）》[7]中的诊断标准；均经临床细胞遗传学、骨髓细胞学与分子学诊断确诊；自愿参与并签署知情同意书；依从性较优，临床资料完善。

排除标准：入院前接受其他化疗药物治疗者；患有严重肝肾功能不全者；属于过敏体质，或有药物使用禁忌证者；对化疗无法耐受者；有严重感染、免疫系统疾病者；有精神疾病、意识障碍、语言不通者；妊娠或哺乳妇女；对该次研究较抗拒、中途退出、随访未回应或临床资料丢失者。

1.2 方法

对照组为CLAG-M方案治疗，第1～5天，静脉注射克拉屈滨（国药准字H20052240，规格：10 mL），5 mg/d；同时静脉注射阿糖胞苷（注册证号H20160403；规格：0.1 g×1瓶/盒），1～2 g/（m2·d）。治疗开始皮下注射粒细胞集落刺激因子（国药准字S20063065），300 μg/（m2·d），直至患者外周血白细胞计数＞20×109/L停止；于第1～5天给予静脉注射地西他滨（国药准字H20140736，规格：50 mg×1瓶）15 mg/（m2·d）；静脉滴注米托蒽醌（国药准字H10960190，规格：10 mL:10 mg）6 mg/（m2·d）。同时全程注意患者水化、碱化、止吐与脏器功能保护等对症处理，并及时给予抗感染治疗。

观察组在对照组基础上给予自体CIK细胞治疗，于清晨空腹（时间为10 h以上）条件下，取患者静脉血50 mL，在单抗1640培养液（即抗CD3+γ干扰素+白介素-2）中培养分离的单核细胞，其细胞浓度为2×106/mL，2 d后依据1∶2扩增。且每间隔2 d扩增1次，10 d后培养相关霉菌、细菌，并检测其中的内毒素，若为阴性，则离心且以0.9%氯化钠注射液清洗，制成细胞悬液，在患者化疗的第1天静脉注射细胞悬液（1 000～2 000）×106，1次/d，2 d后回输1次，每个疗程3次回输。同时静脉注射白介素-2 600 000 U/d，5 d为1个疗程。两组患者均治疗2个月。

1.3 观察指标

（1）疗效判定[5]：依据临床血液病变的诊断与疗效标准进行评价，完全缓解（CR）满足：①患者临床症状与体征改善，可正常生活；②经血常规检查，患者血红蛋白≥100 g/L（男性患者）或≥90 g/L（女性或儿童患者），血小板≥100×109/L，中性粒细胞绝对值≥1.5×109/L，外周血白细胞中无白血病细胞；③经骨髓细胞学分析，原粒细胞Ⅰ、Ⅱ型，原始细胞，幼稚淋巴细胞或幼稚单核细胞之和≤5%；部分缓解（PR）：患者临床病症与体征部分缓解，且经骨髓细胞学分析，原粒细胞Ⅰ、Ⅱ型，原始细胞，幼稚淋巴细胞或幼稚单核细胞之和＞5%，但≤20%；未缓解（UR）：未满足上述标准，或患者病情加重。（CR+PR）例数/总例数×100.00%=总有效率（TR）。

（2）不良反应：记录患者恶心呕吐、骨髓抑制、肝功能损伤、皮肤黏膜损伤、神经毒性等不良反应的发生例数，并比较。

（3）评价患者无进展生存期（PFS），即患者接受治疗至疾病进展的时间，或因任何因素造成死亡时的时间；总生存期（OS），即患者接受治疗至死亡的时间，或观察截止时间；早期肿瘤缓解率，即患者接受治疗8周后，复查，其标准满足PR者。

1.4 统计方法

2 结果

2.1 两组患者治疗效果与早期肿瘤缓解率比较

观察组治疗总有效率与早期肿瘤缓解率均明显高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05），见表1。

表1 两组患者治疗效果、早期肿瘤缓解率比较[n（%）]Table 1 Comparison of treatment effects and early tumor remission rate between the two groups patients[n（%）]

2.2 两组患者不良反应比较

观察组总发生率低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05），见表2。

表2 两组患者不良反应比较[n（%）]Table 2 Comparison of adverse reactions between the two groups patients[n（%）]

2.3 两组患者PFS、OS比较

观察组PFS为（21.06±1.66）个月、OS为（20.35±1.52）个月，而对照组分别为（18.23±1.23）个月、（16.52±1.23）个月，观察组均长于对照组，差异有统计学意义（t=7.248、10.365，P<0.05）

3 讨论

急性髓系白血病（AML）发病机制非常复杂，是多种因素共同作用的结果，对于化疗耐药，具有复发性、难治性特点[8-9]。作为一类因骨髓造血干细胞出现异变所致的血液系统疾病起病急，具有较高的病死率。其骨髓原始细胞与外周血白细胞等比例增高，导致患者血液系统出现严重障碍，使患者出现原因不明的反复出血或贫血，并伴有感染性病灶，严重影响患者身体健康[10-11]。并且，多药耐药相关蛋白、多药耐药基因、蛋白P-糖蛋白等均为ATP结合盒膜转运蛋白超家族，于APT供能下，由细胞中将抗肿瘤药物排除，降低药物浓度，产生耐药性。

大量研究表明[12-14]，在RR-AML治疗中，嘌呤类似物时细胞毒性物质，能够通过抑制核糖核酸还原酶，于该病治疗中发挥关键作用。克拉屈滨是新一代嘌呤类似物，进入体内后，通过损伤线粒体，诱导癌细胞凋亡，对于静止期、分裂期的白血病细胞有细胞毒作用。克拉屈滨、Ara-C、MIT之间有协同作用[15-16]。CLAG-M方案是治疗RR-AML患者的常用措施，其中的克拉屈滨属于人工合成的嘌呤类似物，可经受损的线粒体诱导细胞凋亡，且具有穿透血脑屏障的能力，可显著发挥杀伤增殖期、非增殖期细胞的作用，继而抑制肿瘤细胞生存，促使其凋亡。而阿糖胞苷可直接抑制白血病细胞，与克拉屈滨联合，可通过增加细胞内的阿糖胞苷三磷酸浓度，继而发挥显著的抗肿瘤作用[9]。地西他滨是一种脱氧胞苷酸的腺苷类似物，可有效促使DNA中的甲基化过程逆转，促使失活沉默的抑癌基因恢复活性，从而达到显著的抑制肿瘤细胞的作用，但药物在去甲基的同时，会使阿糖胞苷的细胞毒作用提升。且患者经长期的化疗，其耐受性减弱，极易并发多种疾病，如感染等，故临床单纯的使用CLAG-M方案治疗的效果不佳。

自体CIK细胞是一种新研发的抗肿瘤细胞，属于自体活体细胞，具快速增长、无排异性等特点，并且，CKI细胞能同时表达CD3+与CD56+膜蛋白分子，该细胞拥有T淋巴细胞的抗瘤活性，具有强效的抗肿瘤活性与杀灭肿瘤细胞的作用；并且，该细胞拥有NK细胞非MHC限制性杀瘤特点，临床将CIK细胞称为NK细胞样T淋巴细胞。CIK细胞作为肿瘤治疗研究新方向，可经患者体内外周血抽取的方式，通过无菌实验室将该细胞诱导、培养后回输，可有效激发机体免疫活性，对正常细胞癌变、肿瘤细胞生成有显著的抑制作用[12]。同时因RR-AML患者的免疫功能较低，继而导致自体免疫细胞治疗效果下降，而自体CIK细胞的回输，可有效增强患者自体免疫细胞治疗效果，增强患者免疫功能，提升抗感染能力，改善预后[17-19]。且自体CIK细胞可识别肿瘤细胞，对正常细胞无损害，对患者骨髓造血前体损伤减少有显著作用。而光谱抗肿瘤作用，使CIK细胞对高抗原表达癌症作用显著，在髓性白血病中效果明显。与CLAG-M化疗方案结合，可相互补充，协同增效，显著改善患者病情[20-22]。

该文结果中，与对照组71.43%相比，观察组治疗总有效率92.86%较高；观察组早期肿瘤缓解率71.43%优于对照组42.86%；观察组不良反应总发生率10.71%低于对照组35.71%；观察组PFS为（21.06±1.66）个月、OS为（20.35±1.52）个月，长于对照组的（18.23±1.23）个月、（16.52±1.23）个月（P<0.05）。表明经自体CIK细胞联合CLAG-M方案治疗的效果显著，可有效改善RR-AML患者的临床病症，且安全性较高，可有效延长患者生存期。在相关学者[15]研究中，以12例RR-AML患者为例，实施CLAG方案化疗。结果12例患者经治疗1疗程后，CR为8例（72.7%）、PR为2例（18.2%），OR为90.9%，但患者均出现恶心呕吐、肝肾毒性、口腔黏膜炎等不良反应，可见CLAG方案RR-AML患者的有效率较高，但化疗所致的不良反应较重；而在郭淑利[23]研究中，以70例患者为例，分别给予CAG方案治疗、自体CIK细胞联合CAG方案治疗，结果观察组治疗总有效率94.29%高于对照组的77.14%（P<0.05），可见联合自体CIK细胞治疗，效果显著。与该文结果一致，说明该研究结论具有一定可信度。

综上所述，经自体CIK细胞联合CLAG-M方案治疗RR-AML患者的效果显著，可有效缩短患者早期肿瘤缓解时间，促使患者病情尽早改善，继而减少化疗带来的毒副作用，故联合治疗的效果显著，且安全性较高，可有效改善患者预后，值得临床大范围推广应用。