重瓣长寿花的组培快繁技术研究

丁雪珍

（潍坊职业学院农林科技学院，山东 潍坊 262737）

长寿花（Narcissus jonquilla L.）又名寿星花、伽蓝花，为景天科伽蓝菜属多肉植物。多年生肉质草本。株高10-30厘米。圆锥状聚伞花序，花序长7-10厘米。每株有花序5-7个，花瓣4片，花朵色彩丰富。近年来长寿花凭借植株小巧、株型紧凑、花色艳丽、花量大、花期长、易养植、耐干旱等特点脱颖而出，成为人见人爱的室内观花小盆栽。

长寿花通常采用播种、扦插和分株等繁殖，但由于市场销量大的重瓣系列多为进口品种，扦插繁殖退化严重，播种繁殖变异较大，远远满足不了市场的需要。为保持重瓣长寿花品种的优良特性，同时提高其繁殖速率，为生产提供大量优质种苗，本试验对重瓣长寿花进行组织培养，以找到一种适合重瓣长寿花的快速繁殖方法。

1.试验材料与方法

1.1 试验材料

试验用长寿花品种为紫缤，取自潍坊职业学院农林科技学院智能温室。2017年11月从盆栽植株上选取幼嫩叶片和茎段作为外植体。

1.2 培养基的配制

以MS为基本培养基，添加2%-3%的白砂糖和0.65%的琼脂粉。根据各阶段试验设计添加不同浓度的6-BA和NAA，pH值均为6.2-6.4。按照固体培养基常规制作方法进行配制、分装、高压灭菌，灭菌完成后取出冷却备用。

1.3 外植体的选择与处理

从盆栽植株上，选取健壮无病虫害的最上端第一片展开叶片和幼嫩茎段（2～3cm）作为外植体。

将茎段剪去叶片，留下大约5mm长的叶柄；叶片不用修剪。把处理好的茎段和叶片冲洗干净，再放到5%的洗洁精溶液中浸洗约5min，最后用流水冲洗干净，放到带盖的广口瓶中备用。

1.4 外植体的表面灭菌与接种

超净工作台按照常规进行消毒后，将洗净的外植体放到超净工作台上，先用75%酒精消毒30-60s，再用有效氯浓度1%的次氯酸钠溶液灭菌 10～20 min。最后，用无菌水冲洗3遍后，分别接种于不同的诱导培养基上。

1.5 外植体的初代培养

将外植体接种于诱导培养基上，诱导分化试验所用激素浓度和配比如下：6-BA选择0.2mg/L，0.5mg/L两个浓度梯度，NAA选择0.1mg/L，0.2mg/L两个浓度梯度，以不添加任何激素的空白MS培养基为对照，共5个处理，每个处理接种20瓶。接种后放到温度25℃左右、光照时间12 h/d、光照强度1000～2000 lx的培养条件下，每天观察记录分化情况，30天统计分化率。

1.6 增殖培养

以初代培养分化出的新生小苗（或愈伤组织）为转接材料，把它们接种到不同配方的MS培养基上，6-BA（mg/L）设0.1，0.5，1.0三个浓度梯度，NAA（mg/L）设0.1，0.2两个浓度梯度。30天统计增殖情况。

1.7 生根培养

将幼苗剪切成1.5～2.0cm长的嫩茎，转接至1/2MS培养基上，添加IBA浓度（mg/L）为0.1，0. 25，0.5 三个梯度。每天观察记录生根情况，15天统计生根率，从而筛选出最适生根培养基配方。

2.结果与分析

2.1 外植体初代培养情况

外植体在不同配方的初代培养基的分化情况见表1、表2。

表1 不同培养基配方对长寿花叶片诱导分化的影响

表2 不同培养基配方对长寿花茎段诱导分化的影响

1 0．2 0．1 55 18．2 2 0．2 0．2 65 38．5 3 0．5 0．1 80 62．5 4 0．5 0．2 95 84．2 5 0 0 0 0

由表1可知，不同浓度的激素配比，既影响到叶片的愈伤组织发生率，也影响到芽的分化率。6-BA0.5mg/L与NAA0.2mg/L组合下，长寿花叶片分化率高，为最佳组合。

由表2可以看出，6-BA0.5mg/L与NAA0.1mg/L的激素组合，长寿花茎段不仅分化率高，而且分化芽数量多，芽体大小适中，为茎段培养最佳初代培养基。

2.2 不同浓度激素对增殖培养的影响

将初代培养得到的小芽转入不同激素浓度的增殖培养基中，观察继代增殖情况，30天的统计结果见表3。

表3 不同浓度激素对长寿花增殖培养的影响

由表3可知， 6-BA与NAA组合对长寿花的增殖有明显的促进作用，但长寿花对激素比较敏感，高浓度的6-BA虽能促进增殖，但苗体细弱不利于后期的生根与移栽。所以，增殖培养适宜的激素组合为6-BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L或6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L。

2.3 不同浓度IBA对生根培养的影响

长寿花组培苗在生根培养基上，大约5天左右就开始生根，同时苗体也开始长高，不同浓度IBA处理对生根的影响见表4。

表4 不同浓度IBA对长寿花生根培养的影响

IBA（mg/L） 0．1 0．25 0．5根原基形成时间（天） 7 5 8生根率（%） 92 100 100根系生长情况 较细 健壮基部有愈伤组织，生长较慢

由表4可以看出，处理2（1/2MS +NAA0.25mg/L）不仅生根速度快，而且生根率高、根系生长健壮，是最佳生根培养基。

3.结语

试验结果表明，以重瓣长寿花的叶片和茎段作为外植体进行组培快繁，操作容易、速度快，便于推广。

叶片诱导（图1）、茎段诱导（图2）、增殖培养（图3）情况如下图所示。

图1

图2

图3