禽肉蛋中氟喹诺酮类兽药残留分析

杨水仙

（眉山市农业农村局 620020）

氟喹诺酮类属于含氟第三代喹诺酮类化学合成抗生素，作用机制为抑制细菌的DNA旋转酶，阻碍DNA的正常复制、转录、转运与重组，从而阻断细菌的繁殖，起到抗菌作用。常用的沙星类药物由于对多种革兰氏阴性菌均具有良好的抗菌效果，且价格低廉，用药方便，在畜禽及水产养殖中被广泛应用于预防和治疗感染性疾病，是常用的三大兽药之一。但是氟喹诺酮类药物残留严重，本文主要通过批量监测不同区域、不同养殖规模点位的禽肉蛋中氟喹诺酮类兽药残留情况、为禽肉蛋中氟喹诺酮类兽药残留研究提供数据支撑。

1 材料与方法

1.1 样品来源和采集

抽检眉山市辖区范围内规模养殖场、养殖大户禽肉蛋样品共360批次，其中无公害禽肉蛋为必抽点。全部样品均实行现场抽样、封样，抽样按照《动物及动物产品兽药残留监控抽样程序》（NY/T 1897-2010）执行。

1.2 仪器

液相三重四极杆质谱（Ultimate 3000 RSLC TSQ Quantum Ultra, Thermo Fisher scientific）、冷冻离心机（ eppendoff 5804R）、电子天平（美国奥豪斯, SE602F,d=0.01mg ），多功能混匀器（ESSENSCIEN, Vortex Mixer V7 ）、超高速匀浆机（IKA，T18 digital UliRa）、氮空吹扫浓缩仪（北京斯珀特科技有限公司，SPT-24）、旋转蒸发仪（IKA，RV10BS25）、冷却水循环系统（北京长流科技仪器有限公司，LX600）。

1.3 耗材、试剂及标准品

固相萃取中性交换柱（HLB、200mg/6mL，30支/盒，Agilent）、屈臣氏去离子水，甲醇、乙腈、正己烷、甲酸、乙酸均为色谱纯，氢氧化钠、磷酸二氢钾为分析纯。 标准品为氧氟沙星、培氟沙星、诺氟沙星、洛美沙星、恩诺沙星、环丙沙星、沙拉沙星、达氟沙星混合储备液，内标为恩诺沙星 D5 ，均为农业农村部，浓度为 100mg/L。

1.4 检测方法及样品前处理

实验前处理均按照《动物源性食品中14种喹诺酮药物残留检测方法 液相色谱—质谱/质谱法》（GB21312-2007）进行提取、净化。基质混标配制梯度浓度为0ug/L、1ug/L、2ug/L、4ug/L、8ug/L、16ug/L、32ug/L、64ug/L。

1.5 检测条件

色谱柱： Agela Bonshell C18 2.7um，2.1*100mm，cat.no:s c921002-0

流动相： A 相 0.1%甲酸、4mmol/l 甲酸铵水溶液 ，B 相0.1%甲酸、4mmol/l 甲酸铵甲醇（金标）溶液 流速： 0.3mL/min

柱温：40℃ 进样体积： 5μL

梯度洗脱程序见下表 1:

时间（min） A(%) B(%)0～0.5 90 10 7.5～9.5 0 100 9.6～12 90 10

离子源及扫描方式：电喷雾离子源（ ESI+ ） , 多反应离子监测（ MRM ）

离子源温度： 300℃；喷雾电压： 3500V；碰撞器压力mTorr： 1.5；辅助器流速mL/min：10；辅助器流速mL/min：30

1.6 样品检测参数及参考标准：

检测参数 检测方法 残留限量（ μg/kg） 检出限（ μg/kg）洛美沙星禽肉、蛋中不得检出 0.5培氟沙星 禽肉、蛋中不得检出 1.0氧氟沙星 禽肉、蛋中不得检出 0.5诺氟沙星 禽肉、蛋中不得检出 1.0恩诺沙星 禽蛋中不得检出、禽肉中总量≤100 0.5环丙沙星 禽蛋中不得检出、禽肉中总量≤100 1.2沙拉沙星 禽蛋中不得检出、禽肉中总量≤10 1.0达氟沙星 禽蛋中不得检出、禽肉中总量≤100 0.5 GB/T 21312-2007

2 结果与分析

2.1 总体情况

抽检眉山市辖区范围内的360批次样品（118批次鸡肉、230批次鸡蛋，12批次鸭蛋，见图 1）共计来自88个监测点，其中龙头企业12个，专合社28个，家庭农场15个，散户33个，包括5个无公害养殖场，见图 2。其中，鸡蛋类数量最多，占63.89%；散户和专合监测点位数偏多，分别占比37.5%和31.8%。共计有兽药残留检出4批次，均为恩诺沙星检出。其中鸡肉中检出2批次，未超标，见图3；鸡蛋中检出2批次，均为不合格样品，见图4，样品合格率为 99.44%。

2.2 超标批次蛋鸡兽药衰减变化趋势

对检出不合格的蛋鸡养殖场养殖户进行监控，要求不合格批次的蛋鸡40d不能使用兽药，单独进行正常饲养，每隔20d抽取所监控蛋鸡产的鸡蛋进行检测，超标1组首次抽检日期为4月21日，恩诺沙星检测值为33.53 ug/kg ，二次抽检样品日期为5月11日，恩诺沙星检测值为3.15ug/kg；三次抽检日期为5月30日恩诺沙星检测值为0ug/kg。超标2组首次抽检日期为8月7日，恩诺沙星检测值15.32ug/kg ，二次抽检日期为8月27日，恩诺沙星检测值为4.09ug/kg，三次抽检日期为9月16日，恩诺沙星检测值0ug/kg。超标1组20天恩诺沙星衰减率90.60%，超标2组20天恩诺沙星衰减率73.30%.两组恩诺沙星残留衰减率略有差异。见图5。

3 讨论

3.1 眉山市禽肉蛋中兽药残留检出情况与四川省除眉山以外省级例行畜禽兽药残留整体情况比较。

从2020年四川省农业农村厅省级例行监测情况通报来看，全省除眉山以外其他地区累计抽检禽肉590批次，合格率98.8%，禽肉样品中检出不合格参数主要为允许使用的恩诺沙星(1次)和停止使用药物氧氟沙星（6次），眉山市各类任务抽检的118批次鸡肉样品中，检出恩诺沙星2次，均未超标。全省除眉山以外省级抽检禽蛋980批次，合格率98.9%，禽蛋样品中检出不合格参数均为恩诺沙星（以恩诺沙星和环丙沙星之和计），眉山抽检的242批次禽蛋样品中，检出恩诺沙星2次，均超标，合格率99.17%。其次，从全省畜产品兽药残留监测情况及平时工作中畜产品监测情况来看，猪牛羊肉中基本没有常规兽药残留检出的情况，禽肉蛋氟喹诺酮类残留问题更突出。

3.2 两组超标实验组恩诺沙星兽药衰减情况比较

两组超标实验组恩诺沙星兽药衰减率略有差异，可能跟蛋鸡个体差异、季节性预防用药量、水质、饲料配方、饲养方式、环境温度等因素有关。整体来看30天以上休药期较为安全。