骨髓细胞学、白细胞、血清铁蛋白联合检查对再生障碍性贫血的诊断价值

余祖辉

广西壮族自治区防城港市防城区人民医院检验科,广西防城港 538021

再生障碍性贫血以骨髓造血功能障碍和全血细胞减少为主要临床特点，病情严重时患者可能出现感染或者出血，从而导致死亡[1]。目前，导致人体全血细胞减少的疾病种类繁多，发病机制和病因各异，如何鉴别再生障碍性贫血对其临床治疗和诊断具有重要意义[2]。骨髓细胞学检测是再生障碍性贫血诊断的“金标准”[3]。白细胞主要分为粒细胞、单核细胞和淋巴细胞，在机体免疫和抗感染过程中发挥重要作用，白细胞异常与贫血、感染和肿瘤等疾病的发生密切相关[4]。铁蛋白是一种铁贮存蛋白，是反映机体营养状况和铁贮存情况的重要指标，在人体造血功能及免疫功能中均起到重要作用，其水平异常与贫血和肿瘤等疾病的发生密切相关[5]。目前，骨髓细胞学检测能够直接对骨髓细胞的病理学改变进行检测，而白细胞计数(WBC)和铁蛋白检测可以作为再生障碍性贫血潜在的辅助性检查手段，本研究检测再生障碍性贫血患者的WBC和血清铁蛋白水平，并对其进行骨髓细胞学检测，旨在探讨三者对再生障碍性贫血的诊断价值。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择2015年2月至2020年6月本院诊治的91例再生障碍性贫血患者作为观察组，另选择同期在本院进行治疗的91例非再生障碍性贫血患者作为对照组，并对其进行回顾性分析。观察组中，男58例，女33例；年龄23～54岁，平均(37.85±8.75)岁；体质量指数(BMI)为16.5～20.4 kg/m2，平均(18.21±1.12)kg/m2。纳入标准：(1)符合2018年美国血液学协会制定的再生障碍性贫血诊断标准[6]；(2)入院后行骨髓细胞学检测；(3)临床资料完整。排除标准：(1)入院前接受过抗贫血药物治疗；(2)存在肝肾功能障碍；(3)存在全身性感染性疾病；(4)存在肿瘤；(5)妊娠期及哺乳期。对照组中，男54例，女37例；年龄20～55岁，平均(38.41±9.53)岁；BMI为16.0～21.1 kg/m2，平均(18.11±1.41)kg/m2；缺铁性贫血36例，巨幼细胞性贫血19例，慢性病性贫血24例，溶血性贫血12例。两组的性别比例和年龄等一般资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法

1.2.1骨髓细胞学检查 对患者进行局部麻醉后，选择患者的胸骨、髂前骨或髂后骨进行穿刺，在严格无菌操作下取出少量患者骨髓并制作成骨髓涂片，涂片经瑞氏染色后进行分析。

1.2.2骨髓铁染色检测 对上述骨髓涂片进行铁染色，使用20%的酸性亚铁氰化钾进行染色，染色时间为30 min，染色结束后使用流水冲洗涂片，干燥后于倒置显微镜下观察。细胞内铁计算：观察100个红细胞，计算细胞质中存在蓝色铁粒的细胞个数所占百分比。细胞外铁评级：无蓝色铁粒则为“-”，有少量蓝色铁粒则为“+”，有较多蓝色铁粒则为“++”，有很多蓝色铁粒则为“+++”，有极多蓝色铁粒则为“++++”[7]。

1.2.3WBC及血清铁蛋白检测 患者入院后采集空腹静脉血3 mL，室温静置30 min，5 000 r/min离心15 min。收集上清液至另一洁净离心管中用于后续检测。采用迈瑞全自动血液分析仪(型号：BC-6800)检测WBC。采用全自动西门子ADVIA Centaur CP化学发光仪检测血清铁蛋白水平，实验操作严格按照试剂盒说明书进行。

2 结 果

2.1两组WBC、血清铁蛋白水平比较 观察组WBC、血清铁蛋白水平明显低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 两组WBC、血清铁蛋白水平比较

2.2两组患者骨髓细胞内外铁测定结果 观察组细胞内铁明显低于对照组，而细胞外铁明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 两组患者骨髓细胞内外铁测定结果

2.3WBC、血清铁蛋白和细胞内铁单独及联合诊断再生障碍性贫血的结果比较 选择WBC、血清铁蛋白和细胞内铁的平均值作为临界值，其中WBC<5.21×109/L为阳性，反之为阴性。血清铁蛋白<65.64 μg/L为阳性，反之为阴性。细胞内铁<28.14%为阳性，反之为阴性。WBC、血清铁蛋白和细胞内铁单独及联合诊断再生障碍性贫血的符合率分别为79.12%、85.71%、81.32%和93.41%，见表3。

表3 WBC、血清铁蛋白和细胞内铁单独及联合诊断再生障碍性贫血结果比较(n)

2.4WBC、血清铁蛋白和细胞内铁单独及联合诊断再生障碍性贫血的特异度、灵敏度、阴性预测值、阳性预测值和约登指数比较 WBC、血清铁蛋白和细胞内铁联合诊断再生障碍性贫血的特异度、灵敏度、阴性预测值、阳性预测值和约登指数均高于WBC、血清铁蛋白和细胞内铁单独检测，见表4。

表4 WBC、血清铁蛋白和细胞内铁单独及联合诊断再生障碍性贫血的特异度、灵敏度、阴性预测值、阳性预测值和约登指数比较

2.5WBC、血清铁蛋白和细胞内铁单独及联合诊断再生障碍性贫血的诊断价值分析 WBC、血清铁蛋白和细胞内铁单独及联合诊断再生障碍性贫血的ROC曲线的AUC值分别为0.785、0.820、0.902和0.977(P<0.05)，渐进95%CI分别为0.729～0.832、0.771～0.874、0.845～0.962、0.754～0.869、0.921～0.998。见图1。

图1 WBC、血清铁蛋白和细胞内铁单独及联合检测诊断再生障碍性贫血的价值分析

3 讨 论

造血干细胞功能障碍、免疫功能异常及造血微环境紊乱是再生障碍性贫血的主要发病机制，有研究结果显示，遗传因素也与再生障碍性贫血的发病密切相关[8]。而再生障碍性贫血的治疗方式包括粒细胞输注、免疫抑制治疗及促造血治疗等，这些治疗方式对早期再生障碍性贫血患者具有较好的临床治疗效果，而对于重型再生障碍性贫血患者的治疗效果不佳[9]。因此，探究与再生障碍性贫血发病密切相关的生理生化指标，并将其应用于再生障碍性贫血的诊断和治疗中具有重要意义。

再生障碍性贫血以全血细胞减少为主要临床特征，其中造血干细胞异常是造成全血细胞减少的重要因素[10]。本研究发现，再生障碍性贫血患者的WBC明显下降，表明WBC减少可能与再生障碍性贫血的发病相关，究其原因可能是由于再生障碍性贫血患者体内的造血干细胞和WBC大量凋亡所致。已有研究报道显示，再生障碍性贫血患者体内的中性粒细胞及骨髓间充质细胞的细胞周期停滞在G1期，且细胞凋亡水平增加，有部分患者出现造血功能异常[11]。进一步在细胞模型中的实验结果显示，骨髓组细胞的分化能力存在缺陷且端粒长度下降，进而导致再生障碍性贫血的发生[12]。铁蛋白是体内铁元素的重要贮存方式，在贫血患者中均能够检测到铁蛋白水平的下降。本研究也检测到再生障碍性贫血患者的血清铁蛋白水平明显下降，与已有研究报道结果一致[13]。分析其原因可能是由于铁元素是体内氧气运输的重要载体，铁蛋白水平下降会导致血液系统功能紊乱，进而导致贫血症状的出现。细胞外铁主要存在于机体的骨髓小粒中，而细胞内铁主要分布于红细胞、晚幼红细胞及早幼红细胞中，两者水平异常与贫血的发生密切相关[8]。本研究进一步发现，再生障碍性贫血患者的细胞内铁减少，而细胞外铁增多，目前对再生障碍性贫血细胞内外铁变化的分子机制仍然缺乏了解，需要后续深入探究。

本研究发现，WBC、血清铁蛋白和细胞内铁联合诊断再生障碍性贫血的符合率、特异度、灵敏度、约登指数及AUC值均明显高于3项单独检测，表明三者联合检测在再生障碍性贫血的临床诊断中应用价值更高。分析其原因可能是由于单纯检测WBC值很难将再生障碍性贫血与感染性疾病和过敏性疾病区分开[14]，而单纯检测血清铁蛋白和细胞内铁则很难将其与其他类型贫血疾病区分开[15]，导致单独检测会出现较大程度的误检率，而将三者联合检测能够有效提高诊断的特异度和灵敏度，使得联合检测对再生障碍性贫血的诊断价值更高。

综上所述，再生障碍性贫血患者WBC、血清铁蛋白水平、细胞内铁下降，而细胞外铁升高，WBC、血清铁蛋白和细胞内铁联合检测对再生障碍性贫血的诊断价值明显高于各项指标单独检测。