鼻咽癌患者PHD2、PDGF-BB 表达水平及临床意义

戴惠婷

莆田学院附属医院耳鼻咽喉科 福建莆田 351100

鼻咽癌是指发生于鼻咽腔顶部和侧壁的恶性肿瘤，近年来我国鼻咽癌的发病率一直居于较高的水平。放疗是鼻咽癌的主要治疗方法，早中期的患者仅经放疗治疗后即可治愈，但有部分患者在治疗后会出现复发甚至转移的情况，预后较差[1]。有研究发现脯氨酸羟化酶2（proline hydroxylase2，PHD2）和血小板生长因子-BB（Recombinant Human Platelet Derived Growth Factor-BB，PDGF-BB）在肿瘤细胞的增殖，扩散中起了重要作用，其异常表达影响多种癌症预后的危险因素[2]；但关于鼻咽癌患者生物分子表达的相关研究较少，基于此本研究就鼻咽癌患者PHD2、PDGF-BB 表达水平及临床意义展开探讨，旨在为临床治疗提供参考，现将研究报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾性分析2018 年11 月～2020 年3 月我院肿瘤科收治的鼻咽癌的患者共58例，其中男42例，女性16例，年龄26～63 岁，平均年龄（40.26±4.23）岁。根据鼻咽癌TNM 分期分为：T1～T2 期20例；T3～T4期 38例。根据有无淋巴结转移分为：转移36例，无转移22例。

纳入标准：（1）所有患者均符合中国临床肿瘤学会发布的《头颈部肿瘤诊治指南（2018 版）》中鼻咽癌的相关诊断标准并经病例活检确诊[3]；（2）患者临床资料完整且自愿签署知情同意嘱。

排除标准：（1）合并其他重要器官严重疾病；（2）合并其他恶性肿瘤。

1.2 方法

1.2.1 试剂

兔抗人PHD2 多克隆抗体购自美国赛默飞世尔公司；山羊抗人PDGF-BB 多克隆抗体购自Creative Biomart 公司；SP 系列免疫组化通用型工作液试剂盒、DAB 显色剂均购自北京欣兴唐生物科技有限公司。

1.2.2 检测方法

所有标本手术切除后立即用10%甲醛溶液固定，组织切片后脱蜡、水化。然后根据S-P 免疫组化染色法对PHD2、PDGF-BB 进行检测，具体操作严格按照试剂盒上的说明进行。每批切片染色均以PB S代替一抗作阴性对照，PHD2、PDGF-BB 用已知阳性表达的组织切片作阳性对照。一抗稀释比例均为1：100。

1.3 判定标准[4]

根据阳性细胞百分比、染色强度判定。0 分：无阳性细胞；1 分：阳性细胞低于10%，2 分：阳性细胞在11%～15%的范围内，3 分：阳性细胞超过50%。染色强度判定：0 分：未见染色，1 分：淡黄色，弱阳性；2 分：棕黄色，中等阳性；3 分：棕褐色，高阳性。总积分：上述2 项评分的和。低表达水平为3 分及以下，高表达水平为4 分及以上。

1.4 统计学方法

本研究数据均采用SPSS18.0 软件进行统计分析，计量资料通过平均数±标准差描述，采用t 检验；计数资料通过率或构成比描述，并采用χ2检验；相关性采用Pearson 相关分析；以P ＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 PHD2、PDGF-BB在鼻咽癌组织和癌旁组织的表达水平 见表1

表1 PHD2、PDGF-BB 在鼻咽癌组织和癌旁组织的表达水平[n(%)]

2.2 PHD2、PDGF-BB在鼻咽癌组织的表达水平与患者临床特征的关系 见表2～3

表2 PHD2 在鼻咽癌组织的表达水平与患者临床特征的关系[n(%)]

表3 PDGF-BB 在鼻咽癌组织的表达水平与患者临床特征的关系[n(%)]

2.3 PHD2、PDGF-BB在鼻咽癌组织的表达水平与患者病理特征的相关性分析

经Pearson 进行相关性分析发现，鼻咽癌患者PHD2 水平与T 分期呈负相关（r=-0.623，P ＜0.05），与淋巴结转移呈负相关（r=-0.837，P ＜0.05）；PDGF-BB 水平与患者T 分期呈正相关（r=0.582，P＜0.05），与淋巴结转移呈正相关（r=0.736，P ＜0.05）。

3 讨论

鼻咽癌患者在疾病早期可无任何症状，随着疾病的发展，可出现颈部肿块，听力下降、耳鸣、耳部疼痛，耳部感染并反复发作，头痛等症状；多数患者是在颈部出现肿块去医院检查时才怀疑鼻咽癌；目前认为，鼻咽癌的发生主要与EB病毒感染和环境等因素相关，此外，大量吸烟、食用腌制食品、空气污染等不健康的生活方式也可诱发该病的发生[5]。

近年来，对于癌症发病分子机制的研究越来越多，已有多数学者经研究证实实质性肿瘤微环境的主要特点是缺氧，缺氧的环境能使肿瘤细胞向恶性发展；脯氨酸羟化酶 2（PHD2）是促进缺氧诱导因子（hypoxiainducible factor，HIF）降解关键步骤的限速酶，其在人体的各种组织的均有表达，PHD2 以氧为辅助机制发挥作用，因此在缺氧的条件下该酶会被抑制；因此认为PHD2 介导肿瘤缺氧的微环境的形成，亦有研究发现PHD2 可能促进肿瘤细胞的增殖与转移，与肿瘤患者的预后具有一定的相关性[6，7]；在本研究中，通过检测鼻咽癌患者癌组织与癌旁组织发现PHD2 在鼻咽癌组织中表达水平低，且明显低于癌旁组织（P ＜0.05），通过进一步分析PHD2 癌组织表达水平与患者病理特征患者的关系发现TNM 分期为T3～T4 期，有淋巴转移的患者PHD2 的表达水平明显低于T1～T2 期，无转移的患者（P<0.05），经相关性分析发现其与T 分期和淋巴结转移呈负相关，与上述研究相似；血小板生长因子-BB（PDGF-BB）是血小板生长因子（PDGF）的一种二聚体结构，有相关研究发现，该因子能够刺激肿瘤血管形成，且与肿瘤TNM分期、淋巴结转移等密切相关[8]；研究结果显示TNM分期为T3～T4 期，有淋巴转移的患者PDGF-BB 表达水平明显高于T1～T2 期，无转移的患者，与T 分期。淋巴转移呈正相关，与国外诸多学者研究结果一致；临床数据显示，鼻咽癌晚期淋巴转移的患者疗效预后差，这提示PHD2、PDGF-BB 表达水平对鼻咽癌患者预后有一定的影响。

综上所述，鼻咽癌患者PHD2 在癌组织中主要为低表达、PDGF-BB 高表达，上述指标与T 分期及淋巴结转移等病理特征有相关性，可作为临床评估患者病情情况以指导治疗的参考指标。