呼吸道病原体抗体检测在呼吸道感染中的应用效果

2021-07-06韦玮

系统医学 2021年8期

韦玮

济宁市第一人民医院检验科，山东济宁 272100

呼吸道感染是由致病微生物侵入呼吸道并进行繁殖所致的疾病，可分为上呼吸道与下呼吸道感染，其中上呼吸道感染主要为喉部及以上部位的感染，例如急慢性鼻炎、喉炎与咽炎；下呼吸道感染为喉部以下部位的感染，包括急慢性气管炎、急慢性肺炎、支气管炎[1]。有研究[2]发现，上呼吸道感染以病毒为常见病因，少数由细菌所致；下呼吸道感染则由细菌、病毒、衣原体、支原体、军团菌等微生物所致。由于呼吸道感染可以诱发诸多疾病，加之临床症状各有不同，相同病原体能够导致多种疾病，而一种疾病也可能由诸多病原体所致[3]。所以，及时明确呼吸道感染患者的病原体类型，对于进一步诊疗工作具有至关重要的作用。该研究选择2018年8月—2020年2月该院1 800例呼吸道感染患者作为研究对象，利用间接荧光免疫法对其不同呼吸道8种病原体IgM抗体进行早期检测，旨在为呼吸道感染防治工作提供可靠的依据，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择该院收治1 800例呼吸道感染患者作为研究对象，其中男性985例，女性815例；年龄1~84岁，平均（45.6±12.8）岁。纳入标准：所有患者均符合《实用内科学》15版中的诊断标准，经诊断包括支气管肺炎、支气管哮喘、急性上呼吸道感染等疾病；该次研究已向患者进行充分的告知；该次研究经医院伦理委员会审核并批准。排除标准：自身免疫性疾病；其他系统急慢性感染；恶性肿瘤；白血病。

1.2 方法

所有患者均采集静脉血1~2 mL，以低速离心机离心5 min，血清分离后，以间接免疫荧光法对8种呼吸道病原体IgM抗体进行检测，包括：甲型流感病毒（IFA）、乙型流感病毒（IFB）、肺炎支原体（Mp）、呼吸道合胞病毒（RSV）、嗜肺军团菌（LP）、腺病毒（ADV）、肺炎衣原体（CP）和副流感病毒（PIVS）。具体操作严格按照说明书执行。为了保证试验结果的科学性与有效性，每组试验均设立阳性与阴性对照。通过荧光显微镜观察结果。仪器与试剂：医用台式低速离心机（型号TD-6）；三用恒温水箱（型号S-HH-W21）；转移脱色摇床（型号：XK-8）；微量移液器（型号：KHB）；正置荧光显微镜（型号BX51TR-32FB3-F01）；免疫荧光分析检测试剂盒购自上海贝西生物科技有限公司，由美国海德诊断有限公司生产，国械注进20193402864。

1.3 观察指标

①观察患者呼吸道8种病原体IgM抗体阳性结果分布情况。②观察该组呼吸道8种病原体IgM抗体多重感染阳性分布情况。③对比不同年龄段患者呼吸道8种病原体IgM抗体检测的阳性率。

1.4 统计方法

采用SPSS 20.0统计学软件处理数据资料，计数资料以频数及百分比（%）表示，组间差异比较以χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 该组患者呼吸道8种病原体IgM抗体阳性结果分布情况

该组1 800例呼吸道感染患者共有655例IgM抗体为阳性，阳性率为36.39%，其中Mp IgM抗体阳性检出率最高，其他依次为RSV、ADV、CP、IFA、IFB、PIVS、LP。见表1。

表1 该组患者呼吸道8种病原体IgM抗体阳性结果分布情况

2.2 该组呼吸道8种病原体IgM抗体多重感染阳性分布情况

该组呼吸道8种病原体IgM抗体单一感染阳性率61.83%、二重感染25.19%、三重感染11.45%、四重感染1.53%。见表2。

表2 该组呼吸道8种病原体IgM抗体多重感染阳性分布情况

2.3 不同年龄段患者呼吸道8种病原体IgM抗体检测的阳性率对比

该组年龄<18岁患者Mp IgM抗体检测的阳性率高于年龄18~59岁、≥60岁（P＜0.05）。其他年龄组RSV、ADV、CP、IFA、IFB、PIVS、LP IgM抗体检测的阳性率对比差异无统计学意义（P＞0.05）。见表3。

3 讨论

呼吸道感染属于临床常见病之一，诱发该病的病原体种类较多，而针对不同的病原体感染，临床所采取的治疗方法也有所不同[4]。然而，不同病原体感染后的临床表现十分相近，仅依靠临床表现的症状与常规经验判断无法有效区分，所以必须采用实验室检测病原体类型，以便合理选择有效的药物，避免抗生素滥用，促进疾病尽早康复[5-6]。目前，实验室主要的检测方法包括病原体分离培养、酶联免疫吸附试验、组织培养、分子生物学检测、快速胶体金、基因芯片等实验，但上述方法均有较大的局限性[7]。培养法是早期用于病原体分离的方法，其根据病原体细菌嗜性，选取合适的组织与细胞进行接种，基于感染细胞表现的蛋白标志物，以免疫学与血细胞吸附法对病原体增殖情况进行检测与鉴定[8]。虽然病毒分离培养法能够客观分离感染病毒的种类，然而该方法步骤繁琐，检测时间长、成本高，且易出现假阴性，检测结果受各类因素的影响，所以临床应用率并不高[9]。分子生物学检测具有较高的敏感度与特异度，但易被污染，对于实验室环境要求较高，不利于基层医院开展。酶联免疫吸附试验每次仅能够检测一种病素[10]。基因芯片技术是在基因探针技术的基础上发展而来的新兴技术，具有快捷、高效、高度准确性与灵敏性等优势，但该技术成本昂贵、操作复杂，无法在临床广泛推广[11]。快速胶体金检测操作简单、快捷，不需要特殊的仪器与设备，但不能准确定量，准确性与灵敏度较低，易出现假阴性，易导致部分病原体感染漏诊[12]。

近年来，随着免疫标记技术的不断完善，免疫荧光技术也在临床得到了广泛的应用[13]。免疫荧光技术是在生物化学、免疫学与显微镜技术的基础上，基于抗原抗体反应原理所建立的新型技术。在检测过程中，其将已知的抗体或抗原标记上荧光标记物，再以荧光抗体作为探针检测组织内相应抗原或细胞，使形成的抗原抗体复合物上包含荧光素，之后通过荧光显微镜对标本进行观察，明确抗体或抗原的含量、性质[14]。由于抗原抗体结合后可以在相应位置形成特殊的荧光模型，阳性与阴性标本的荧光强度存在明显差异，所以利于观察到检测结果[15]。目前，临床主要采用间接免疫荧光法检测IgM抗体，这是因为机体感染后所出现的免疫反应主要为体液免疫，而IgM抗体是抗原刺激机体后形成体液免疫应答过程中最早的抗体，血清内IgM抗体水平升高往往说明存在近期感染，这为呼吸道感染的早期诊断提供了准确的信息，利于指导临床合理用药[16]。

司序等[17]通过间接免疫荧光法对1722例呼吸道感染就诊住院患者进行了8项呼吸道病原体检测，其中阳性822例，占全部受检群体的47.7%，单项感染患者409例（49.8%），双重感染264例（32.1%），三重感染137例（16.7%），四重感染12例（1.4%）。该文研究结果显示，1 800例呼吸道感染患者共有655例IgM抗体为阳性，阳性率为36.39%，其中Mp IgM抗体阳性检出率最高，其中单一感染阳性率61.83%、二重感染25.19%、三重感染11.45%、四重感染1.53%。结果可见，8项呼吸道病原体的IgM抗体筛查试剂将病原体作为抗原包，可以有效检测出血清内的IgM抗体，并以吸附剂对血清进行处理，进一步提高了呼吸道感染病原体的检测效果。廖冰洁等[18]收集了2062例呼吸道感染患者的血清，以间接免疫荧光法对呼吸道病原体IgM抗体进行检测，结果显示<18岁，18~50岁以下，≥50岁阳性病例年龄组患者Mp IgM抗体阳性率分别为45.4%、20.9%、21.6%，其中<18岁组的阳性率高于其他组。该文研究结果与上述结果相近，该次研究中年龄<18岁患者Mp IgM抗体检测的阳性率83.64%高于年龄18~59岁73.04%、≥60岁70.97%（P＜0.05）。Mp是儿童时期肺炎与其他呼吸道感染的重要病原体，其属于病毒与细菌之间的病原微生物，能够通过呼吸道飞沫传染，小儿免疫系统尚未发育成熟，一旦抵抗力降低，极易因Mp诱发呼吸道感染[19]。由于Mp对于大环内脂类抗菌药物十分敏感，而对于氨奉糖苷类与β内酰胺类耐药，所以病原体的检测对于合理应用抗菌药物具有至关重要的意义，可以有效避免病毒感染时抗菌药物不合理应用所致的继发耐药菌株二重感染[20]。