儿童哮喘吸入性糖皮质激素疗效评价与GLCCI1、FCER2基因多态性的研究

朱双桂 陈强 万慕湲 李岚 朱晓华 李建 熊友健 杜云

【摘要】 目的：探讨儿童哮喘吸入性糖皮质激素疗效及其与GLCCI1、FCER2基因多态性的关系。方法：选取2017年5月-2018年5月在本院呼吸科诊断为支气管哮喘患儿60例为治疗组，并选取同期在本院进行体检的正常健康儿童30名为对照组。治疗组治疗前采用华夏时代的快速基因分析方法检测入选患儿吸入性糖皮质激素（ICS）相关的基因类型（-1106）GLCCI1和（2206）FCER2，检测对照组及治疗组患儿治疗前、治疗24周后血清SIgE水平和血清IL-6、IL-8、IL-10的水平变化，同时对治疗组患儿治疗前后的肺功能FEV1%进行检测。结果：治疗组60例哮喘患儿（-1106）GLCCI1表现基因型有GG基因型（野生纯合子）、GA基因型（杂合子）、AA基因型（突变型纯合子）。治疗组60例哮喘患儿（2206）FCER2基因型有AA基因型（野生纯合子）、AG基因型（杂合子）、GG基因型（突变型纯合子）。治疗组治疗前血清SIgE、IL-6、IL-8水平均高于对照组，IL-10水平低于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。治疗前，治疗组（-1106）GLCCI1和（2206）FCER2各基因表现型之间的SIgE、IL-6、IL-8、IL-10、FEV1%pred比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。治疗后，治疗组（-1106）GLCCI1和（2206）FCER2表现基因型为AA基因型SIgE、IL-6、IL-8水平较治疗前均下降，IL-10、FEV1%pred较治疗前均上升，差异均有统计学意义（P<0.05）。治疗后，治疗组（-1106）GLCCI1表现型为AA基因型且（2206）FCER2表现型也为AA基因型哮喘患儿的血清SIgE、IL-6、IL-8水平较治疗前均明显下降，且明显低于其他类型患儿（P<0.05）。治疗后，治疗组（-1106）GLCCI1表现型为AA基因型且（2206）FCER2表現型也为AA基因型哮喘患儿的IL-10、FEV1%pred均较治疗前升高，且均明显高于其他类型患儿（P<0.05）。结论：儿童哮喘吸入性糖皮质激素疗效与GLCCI1、FCER2基因多态性密切相关，其中（-1106）GLCCI1表现型为AA基因型和（2206）FCER2表现型为AA基因型哮喘儿童吸入性糖皮质激素疗效更佳。

【关键词】 儿童 哮喘 吸入性糖皮质激素 GLCCI1 FCER2 基因多态性

Efficacy Evaluation of Inhaled Glucocorticoids in Children with Asthma and Study on GLCCI1 and FCER2 Gene Polymorphism/ZHU Shuanggui， CHEN Qiang， WAN Muyuan， LI Lan， ZHU Xiaohua， LI Jian， XIONG Youjian， DU Yun. //Medical Innovation of China， 2021， 18（14）： -123

[Abstract] Objective： To investigate the efficacy of inhaled glucocorticoids in children with asthma and its relationship with GLCCI1 and FCER2 gene polymorphisms. Method： A total of 60 children with bronchial asthma diagnosed in the respiratory department of our hospital from May 2017 to May 2018 were selected as the treatment group， 30 healthy children who underwent physical examination in the same period were selected as the control group. In the treatment group， the gene types associated with inhalation glucocorticoids （ICS） （-1106） GLCCI1 and （2206） FCER2 were detected by rapid gene analysis in the Chinese era before treatment. Serum SIgE levels and serum IL-6， IL-8 and IL-10 levels of children in the control group and the treatment group were detected before and after treatment for 24 weeks. Meanwhile， FEV1%pred of lung function in the treatment group before and after treatment was detected. Result： GG genotype （wild homozygous）， GA genotype （heterozygous） and AA genotype （mutant homozygous） were found in 60 asthmatic children （-1106） in the treatment group. The genotypes of FCER2 in the treatment group （2206） were AA genotype （wild homozygous）， AG genotype （heterozygous） and GG genotype （mutant homozygous）. Before treatment， serum SIgE， IL-6 and IL-8 levels in the treatment group were all higher than those in the control group， and IL-10 level was lower than that in the control group， the differences were statistically significant （P<0.05）. Before treatment， there were no statistically significant differences in SIgE， IL-6， IL-8， IL-10

levels and FEV1%pred between （-1106） GLCCI1 and （2206） FCER2 gene phenotypes in the treatment group （P>0.05）. After treatment， the expression genotypes of （-1106） GLCCI1 and （2206） FCER2 in the treatment group were AA genotype SIgE， IL-6 and IL-8 levels decreased compared with before treatment， while IL-10 and FEV1%pred were increased compared with before treatment， the differences were statistically significant （P<0.05）. After treatment， serum levels of SIgE， IL-6 and IL-8 in asthmatic children with AA genotype （-1106）GLCCI1 and AA genotype （2206） FCER2 genotype in the treatment group were significantly lower than those before treatment， and significantly lower than those in other types of children （P<0.05）. After treatment， IL-10 and FEV1%pred in asthmatic children with AA genotype （-1106） GLCCI1 phenotype and AA genotype （2206） FCER2 phenotype were significantly higher than those before treatment， and significantly higher than those of other types （P<0.05）. Conclusion： The efficacy of inhaled glucocorticoids in children with asthma is closely related to GLCCI1 and FCER2 gene polymorphism， and the efficacy of inhaled glucocorticoids in children with asthma with GLCCI1 phenotype and FCER2 phenotype of AA genotype is better.

[Key words] Children Asthma Inhaled glucocorticoids GLCCI1 FCER2 Genetic polymorphism

First-authors address： Jiangxi Childrens Hospital， Nanchang 330006， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2021.14.029

吸入性糖皮質激素（ICS）是目前临床最有效的哮喘控制药物[1]。但是临床观察发现，哮喘患儿ICS的疗效具有较明显的个体差异[2]。哮喘患儿ICS后的治疗反应70%与遗传有关[3]。因此，寻找ICS反应性的药物遗传标记指导ICS治疗对改善哮喘疗效具有重要意义。本研究通过比较（-1106）GLCCI1、（2206）FCER2位点基因不同表型哮喘患儿应用ICS治疗后肺功能以及血清SIgE、IL-6、IL-8、IL-10水平的变化，分析（-1106）GLCCI1与（2206）FCER2基因多态性对哮喘患儿ICS治疗后反应的影响，为儿童哮喘的个体化治疗提供可靠的理论依据。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2017年5月-2018年5月在江西省儿童医院呼吸科诊断为支气管哮喘患儿60例为治疗组，并选取同期在江西省儿童医院进行体检的6～14岁、无家族及个人过敏性疾病史，且近一个月内无上呼吸道感染的正常健康儿童30例为对照组。患儿纳入标准：所有确诊患儿均符合儿童支气管哮喘诊断与防治指南（2016年版）中儿童轻度支气管哮喘诊断标准[4];年龄6～14岁;性别不限;未使用激素治疗。患儿排除标准：合并其他急慢性内科疾病;经特异性免疫治疗干预、既往有不可控哮喘发作。两组儿童及其监护人均签署了知情同意书，本研究经医院伦理委员会通过。

1.2 方法 治疗组依据儿童支气管哮喘诊断与防治指南（2016年版）中关于糖皮质激素的用药标准[4]，在哮喘急性发作缓解后，给予入选患儿丙酸氟替卡松吸入气雾剂（辅舒酮）[生产厂家：Glaxo Wellcome S.A.（西班牙），批准文号：H20130190，规格：每揿含125 μg丙酸氟替卡松×60揿]经口腔吸入治疗，初始剂量100 mg/次，2次/d，根据具体病情变化调整辅舒酮用量（100～250 mg，2次/d），当达到哮喘控制之后，维持至少3个月，可考虑降级治疗。治疗组均随访观察24周。

1.3 观察指标及判定标准 （1）治疗组治疗前均抽取外周静脉血2 mL，以EDTA抗凝的无菌真空采血管采集，于-20 ℃低温保存[使用分析保存液（耀金保）保存]，采用华夏时代的快速基因分析方法检测吸入性糖皮质激素（ICS）相关的基因类型

[（-1106）GLCCI1和（2206）FCER2]。（2）分别抽取对照组及治疗组患儿治疗前、治疗24周后的外周静脉血2 mL，室温放置30 min，然后1 000 r/min、3 cm半径离心20 min，将上清液置于-80 ℃保存，用于检测SIgE检测。分别抽取对照组及治疗组患儿治疗前、治疗24周后的外周静脉血3 mL，室温放置30 min，然后1 000 r/min、3 cm半径离心20 min，

将上清液置于-80 ℃保存，用于检测IL-6、IL-8、IL-10。SIgE检测采用免疫印迹法，血清IL-6、IL-8、IL-10检测应用双抗体夹心ELISA方法检测，检测相关试剂盒均购自上海江莱生物科技有限公司，严格参照说明书指导进行检测操作。（3）对照组健康体检儿童未统一进行肺功能的检测。治疗组哮喘患儿治疗前及治疗24周后均进行肺功能第1秒用力呼气容积占预计值的百分比（FEV1%pred）测定，肺功能测定采用德国耶格MasterScreen PFT System肺功能仪进行。

1.4 統计学处理 采用SPSS 24.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用（x±s）表示，组内比较采用配对t检验，组间比较采用独立t检验，多组数据比较采用方差分析并采用SNK-q检验进行进一步的两两比较;计数资料以率（%）表示，比较采用字2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组的基线资料比较 两组的性别、平均年龄比较，差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性，见表1。

2.2 治疗组ICS相关的基因类型分析 治疗组60例哮喘患儿（-1106）GLCCI1表现基因型有GG基因型（野生纯合子）、GA基因型（杂合子）、AA基因型（突变型纯合子）。治疗组60例哮喘患儿（2206）FCER2基因型有AA基因型（野生纯合子）、AG基因型（杂合子）、GG基因型（突变型纯合子）。具体例数和占比见表2。

2.3 两组血清SIgE、IL-6、IL-8、IL-10水平比较 治疗组治疗前血清SIgE、IL-6、IL-8水平均高于对照组，IL-10水平低于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05），见表3。

2.4 治疗组治疗前后不同（-1106）GLCCI1表现基因型患儿各指标比较 治疗前，治疗组（-1106）GLCCI1各基因表现型之间的SIgE、IL-6、IL-8、IL-10、FEV1%pred比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。治疗后，治疗组表现基因型为AA基因型SIgE、IL-6、IL-8水平较治疗前均下降，IL-10、FEV1%pred均较治疗前均上升，差异均有统计学意义（P<0.05）。见表4。

2.5 治疗组治疗前后不同（2206）FCER2表现基因型患儿各指标比较 治疗前，治疗组（2206）FCER2各基因表现型之间的SIgE、IL-6、IL-8、IL-10水平、FEV1%pred比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。治疗后，治疗组表现基因型为AA基因型SIgE、IL-6、IL-8水平较治疗前均下降，IL-10、FEV1%pred均较治疗前均上升，差异均有统计学意义（P<0.05）。见表5。

2.6 治疗组不同（-1106）GLCCI1+（2206）FCER2表现基因型患儿各指标比较 治疗后，治疗组（-1106）GLCCI1表现型为AA基因型且（2206）FCER2表现型也为AA基因型哮喘患儿的血清SIgE、IL-6、IL-8水平较治疗前均明显下降，且明显低于其他类型患儿（P<0.05）。治疗后，治疗组（-1106）GLCCI1表现型为AA基因型且（2206）FCER2表现型也为AA基因型哮喘患儿的IL-10、FEV1%pred均较治疗前升高，且均明显高于其他类型患儿（P<0.05）。见表6。

3 讨论

支气管哮喘是儿童常见呼吸系统疾病，近年来儿童哮喘的发病呈现逐年上升趋势，已成为严重影响儿童健康和消耗众多医疗卫生资源病症。儿童哮喘可明显影响患儿肺功能，影响其日常生活乃至正常人际交流，可对其心理健康造成影响，且其治疗可加重家庭以及社会经济负担[5-7]。哮喘的治疗包括避免接触过敏原、药物治疗和过敏原特异性治疗，支气管舒张剂、糖皮质激素、白三烯调节剂均是其治疗药物，但这些药物总体哮喘控制水平不一[8-10]。目前儿童哮喘的治疗首选药物干预，而治疗药物中，糖皮质激素是首选长期控制药物[11-12]。糖皮质激素可有效降低气道反应性，缓解患者的临床症状，减少疾病恶化的发生，改善肺功能状况并提高患者生存质量[13-14]。本研究中，哮喘患儿中（-1106）GLCCI1表现型为AA基因型、（2206）FCER2表现型为AA基因型者，其血清SIgE、IL-6、IL-8水平均升高，IL-10水平较降低，而糖皮质激素治疗亦可有效改善哮喘患儿的肺功能和控制其炎症反应。然而本研究各哮喘患儿糖皮质激素治疗的效果不一。多个研究亦表明，哮喘的糖皮质激素治疗效果有很大的个体差异性[15-17]。因此，明确哮喘糖皮质激素的治疗的可能影响因素，指导临床进行有效干预，对改善哮喘糖皮质激素干预效果具有重要意义。

有研究认为，哮喘的治疗效果差异与基因变异有关，认为哮喘是由遗传因素和环境因素相互作用、共同影响形成的多基因遗传倾向性疾病[18-20]。GLCCI1与FCER2均为与哮喘密切相关基因[21-22]。因此，遗传因素对药物效应的个体间差异的影响较大，而确定具体的遗传状况对哮喘治疗效果的影响可指导临床选取更佳的治疗方法进行干预以改善疗效。本研究分析哮喘儿童的GLCCI1与FCER2基因多态性，并分析其对哮喘患儿ICS治疗后反应差异的影响，研究结果显示，哮喘患儿（-1106）GLCCI1表现基因型有GG基因型（野生纯合子）、GA基因型（杂合子）、AA基因型（突变型纯合子）。治疗组60例哮喘患儿（2206）FCER2基因型有AA基因型（野生纯合子）、AG基因型（杂合子）、GG基因型（突变型纯合子）。治疗前，治疗组（-1106）GLCCI1各基因表现型之间的SIgE、IL-6、IL-8、IL-10水平、FEV1%pred比较，差异均无统计学意义（P>0.05），哮喘治疗前GLCCI1与FCER2基因多态性对其病情影响差异不大。哮喘患儿（-1106）GLCCI1表现基因型为AA基因型对ICS治疗应答较好，哮喘患儿（2206）FCER2基因型表现为AA基因型SIgE水平不高，哮喘发作较GG基因型容易控制（P<0.05），而（-1106）GLCCI1表现型为AA基因型且（2206）FCER2表现型也为AA基因型哮喘患儿经ICS治疗后患儿的肺功能改善明显高于其他类型患儿，且血清SIgE、IL-6、IL-8水平较治疗前下降明显，IL-10较治疗前升高。（-1106）GLCCI1表现型为AA基因型和（2206）FCER2表现型为AA基因型时其糖皮质激素治疗效果最佳，而其他基因型哮喘患儿需考虑更改治疗方案，联合增加其他治疗药物或选取更有效治疗药物进行治疗，以提高疗效，改善生存质量和预后。

综上所述，儿童哮喘吸入性糖皮质激素疗效不一，不同GLCCI1、FCER2基因多态性哮喘患儿糖皮质激素差异较大，其中（-1106）GLCCI1表现型为AA基因型和（2206）FCER2表现型为AA基因型哮喘儿童可获得最佳疗效。治疗前GLCCI1、FCER2等基因多态性分析有助于指导临床为哮喘儿童制定更佳的治疗方案，提高治疗效果。

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（收稿日期：2020-08-11） （本文编辑：姬思雨）