扶正化瘀胶囊对乙肝肝硬化患者肝纤维化、肠黏膜屏障功能及免疫功能的影响

张健荣，顾尔莉，王忠成

(江苏省南通市第三人民医院肝病科，江苏南通 226006)

乙肝肝硬化是指患者由于长期的乙肝病毒感染、病情逐渐加重以及肝脏反复损伤与修复而发展成肝纤维化。据相关文献报道[1]，肝硬化进一步损害与机体过量产生一氧化氮以及细菌异位到机体肠系膜淋巴结密切相关，从而使肠系膜血管系统的收缩性受到严重影响，并导致肠道黏膜屏障功能受损。肠黏膜屏障损害是乙肝肝硬化发展过程中的关键环节，将促进病情发展，引起病情恶化，使机体免疫功能降低，对预后造成不利影响，从而给患者带来极大的痛苦。目前，临床对乙肝肝硬化主要采取保肝、利尿以及抗纤维化等常规西药对症治疗，但疗效欠佳[2]。近年来，中西医结合治疗肝硬化得到了诸多医师和患者的认可。本研究观察了86例乙肝肝硬化患者采用扶正化瘀胶囊联合恩替卡韦抗病毒治疗，连续治疗6个月后观察治疗对患者肝纤维化、肠黏膜屏障功能及免疫功能的影响。

1 资料和方法

1.1 纳入标准和排除标准 纳入标准：(1)诊断标准均符合《病毒性肝炎防治方案》[3]，肝功能Chlid-Pugh分级为A或B级，且通过CT、超声等检查证实为肝硬化；(2)年龄20～85岁；(3)乙肝表面抗原(HBsAg)均呈阳性；(4)所有研究对象均知情，自愿参与本试验并签订知情同意书，积极配合治疗。排除标准：(1)有严重精神疾病或无法沟通者；(2)严重心、肝、肾功能不全者；(3)妊娠期或哺乳期患者；(4)患有其他病毒感染者；(5)急慢性肠炎或胃溃疡患者。

1.2 研究对象 选取2018年1月-2019年1月在江苏省南通市第三人民医院就诊的86例乙肝肝硬化患者，采用随机数字表法随机分为对照组和观察组，每组43例。

1.3 治疗方案 两组患者入院后均采取基础治疗，如保肝以及维持水、电解质、酸碱平衡等。对照组患者给予恩替卡韦片(国药准字H20110172，规格0.5 mg×7粒，福建广升堂药业有限公司)，口服0.5 mg，qd。观察组患者在对照组治疗基础上联合扶正化瘀胶囊(国药准字Z20020073，规格0.3 g×60粒，上海黄海制药有限责任公司)，口服，5粒/次，tid。两组患者均连续治疗6个月，每周由两名护士采用门诊、电话等方式进行随访，以监督患者的治疗依从性。

1.4 观察指标

1.4.1 肝纤维化指标 采用放射免疫法，检测两组患者治疗前和治疗后6个月的血清透明质酸(hyaluronic acid,HA)、血清黏连蛋白(laminin,LN)、Ⅲ型前胶原(procollagen type Ⅲ,PC-Ⅲ)以及Ⅳ型胶原(type Ⅳ collagen,Ⅳ-C)。试剂盒均统一采购自上海信帆生物科技有限公司，严格按照试剂说明书进行检测。

1.4.2 肠黏膜屏障功能指标 治疗前后采用肠黏膜屏障功能试剂盒(北京中生金域诊断技术股份有限公司)检测二胺氧化酶(diamine oxidase,DAO)、血浆D-乳酸以及内毒素，严格按照试剂盒说明书进行检测。

1.4.3 免疫功能指标 采用EPICS XL型流式细胞分析仪和SYSTEM Ⅱ软件(美国贝克曼库尔特有限公司)检测两组患者治疗前后的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、IgA和IgG等免疫指标。

1.4.4 HBV-DNA水平及转阴率 比较两组患者治疗前后的HBV-DNA拷贝数及转阴率。空腹时抽取肘静脉血10 ml，离心分离血清，使用荧光定量PCR检测系统检测HBV-DNA拷贝数。若HBV-DNA 拷贝数<1.0×103/ml则为转阴，计算转阴率。转阴率=(转阴患者数/患者总人数)×100%。

2 结 果

2.1 一般资料的比较 两组患者在性别、年龄等一般资料上无显著差异，具有可比性，见表1。

表1 两组患者一般资料的比较Table 1 Comparison of the general data of the patients in the two groups

2.2 肝纤维化指标的比较 两组患者治疗前后肝纤维化指标的比较见表2。由表2可见，两组患者在治疗前的4项肝纤维化指标HA、LN、PC-Ⅲ以及Ⅳ-C无显著性差异(P>0.05)；治疗后上述4项肝纤维化指标均显著降低(P<0.05)，且观察组均低于对照组(P<0.01)。

表2 两组患者治疗前后肝纤维化指标的比较Table 2 Comparison of the liver fibrosis indexes of the two groups before and after treatment

2.3 肠黏膜屏障功能指标的比较 两组患者的DAO、D-乳酸和内毒素3项肠黏膜屏障功能指标在治疗前无显著性差异(P>0.05)；治疗6个月后，两组患者上述3项肠黏膜屏障功能指标较治疗前均有所下降(P<0.05)，且观察组患者的下降幅度比对照组更大(P<0.01)，见表3。

表3 两组患者治疗前后肠黏膜屏障功能指标的比较Table 3 Comparison of the intestinal mucosal barrier function indexes of the two groups before and after treatment

2.4 免疫功能指标的比较 两组患者在治疗前的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、IgA和IgG 5项免疫功能指标均无显著差异(P>0.05)；治疗6个月后， 两组患者的5项免疫功能指标均有显著提高(P<0.05)，且观察组患者的改善情况显著优于对照组(P<0.05，P<0.01)，见表4。

表4 两组患者治疗前后免疫功能指标的比较Table 4 Comparison of the immune function indexes of the two groups before and after treatment

2.5 HBV-DNA水平和转阴率的比较 两组患者治疗前HBV-DNA拷贝数无显著性差异(P>0.05)；治疗后，两组患者的HBV-DNA拷贝数均显著降低(P<0.05)，且观察组显著低于对照组(P<0.05)。观察组患者的转阴率为72.09%(31/43)，对照组患者的转阴率为51.16%(22/43)，观察组的转阴率显著高于对照组(P<0.05)，见表5。

表5 两组患者治疗前后HBV-DNA水平和转阴率的比较Table 5 Comparison of the HBV-DNA level and negative conversion rate of the two groups before and after treatment (n=43)

3 讨 论

导致肝硬化的原因较多，如慢性酒精中毒、营养不良、药物毒物以及肝炎病毒等[4]。乙肝病毒长期在机体肝脏内复制、繁殖，将引起肝脏免疫性损伤，从而形成乙肝肝硬化。乙肝肝硬化在发展过程中常导致肠道黏膜充血、水肿甚至糜烂，引起肠黏膜功能和上皮细胞受损； 此外，由于大量G-杆菌在肝硬化患者的肠道内繁殖生长，释放大量内毒素，还可导致肠源性内毒素血症[5]。而肠源性内毒素血症又将损害肠黏膜屏障功能，促进细菌异位，使D-乳酸和DAO水平受到炎性反应后，从而引起病情恶化。同时，肠源性内毒素血症可通过激活肝巨噬细胞并释放活性氧(ROS)而导致脂质过氧化，引起体内CD4+/CD8+、CD8+以及CD3+等T淋巴细胞紊乱并减弱B淋巴细胞的功能，从而使患者免疫功能降低[6]。因此，在患病早期有效地修复肠黏膜屏障功能、减少机体内毒素的释放并提高免疫抵抗力是治疗该疾病的重点。中医认为肝硬化是由于气阴两虚以及瘀血阻络所致，应当采取活血化瘀、益气养阴等治疗为主。扶正化瘀胶囊由丹参、发酵虫草菌粉、松花粉、桃仁、绞股蓝5味药组成。方中丹参和桃仁具有活血化瘀的作用，发酵虫草菌粉具有调节免疫功能的作用，松花粉具有促进肝细胞活性的作用，绞股蓝具有清热解毒的作用。诸药相合，从而发挥抗肝纤维化的作用[7]。既往扶正化瘀胶囊对心肌梗死大鼠的影响的研究结果显示，扶正化瘀胶囊能有效改善心脏功能，降低心肌梗死后心肌纤维化程度，其作用机制可能与扶正化瘀胶囊调控TGF-β1/Smads信号通路有关[8]。

本研究结果显示，经6个月治疗后两组患者的HA、LN、PC-Ⅲ以及Ⅳ-C 4项肝纤维化指标均显著降低，且观察组患者的肝纤维化指标均低于对照组患者，表明扶正化瘀胶囊联合恩替卡韦治疗较单独使用恩替卡韦治疗能更有效地缓解肝纤维化。这与扶正化瘀胶囊中的发酵虫草菌粉通过调节T淋巴细胞免疫功能保护肝细胞，使脂质过氧化受到抑制有关，从而达到抗肝纤维化的目的[9]。本研究结果还显示，两组患者治疗后的DAO、D-乳酸以及内毒素3项肠黏膜屏障功能指标较治疗前均有所下降，且观察组患者的3项肠黏膜屏障功能指标均低于对照组患者，表明扶正化瘀胶囊联合恩替卡韦可改善肠黏膜屏障功能，这可能与扶正化瘀胶囊中丹参含有多种有效的活性成分有关，如丹参酮具有抗菌、抗炎及抗氧化的作用，通过抑制血小板聚集和扩张肠道血管，改善肠道黏膜微循环，对肠黏膜屏障功能起到保护作用[10]。两组患者治疗后的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、IgA以及IgG 5项免疫功能指标均有所提高，且观察组患者5项免疫功能指标的改善情况均优于对照组，这与陶淑萍[11]观察扶正化瘀胶囊辅助西医对乙肝肝硬化患者肠黏膜屏障功能、免疫功能及肝功能状态的影响结果相似。因此，本研究结果进一步证实了扶正化瘀胶囊联合恩替卡韦可有效调节机体免疫功能，这可能与扶正化瘀胶囊中的丹参有关，丹参可有效调节微循环流态，还可使成纤维细胞受到抑制，从而激活胶原酶，促进人体正常发育并维持体内激素平衡；还可能与发酵虫草菌粉双向调节免疫功能密切相关，从而提高机体免疫力[12]。研究结果还显示，治疗后观察组患者的血清HBV-DNA水平显著低于对照组，转阴率较对照组更高，表明乙肝肝硬化患者使用扶正化瘀胶囊联合恩替卡韦治疗可降低HBV-DNA水平，提高转阴率。

综上所述，乙肝肝硬化患者使用扶正化瘀胶囊联合抗病毒药物可有效缓解肝纤维化、改善肠黏膜屏障功能并调节免疫功能。