不同植物提取物替代抗生素对黄羽肉鸡生长性能、抗氧化功能及胫部着色的影响

2021-06-26吴大伟潘金露朱昊鹏卢永胜

饲料工业 2021年11期

■吴大伟潘金露朱昊鹏陈健卢永胜

（和盛食品集团有限公司，江苏泰州225504）

近年来，由于抗生素残留和细菌耐药性问题日益严重，为保障动物源性食品安全和公共卫生安全，各国纷纷颁布了相关法律法规以控制细菌耐药性。我国农业农村部第194号公告规定，自2020年1月1日起，退出除中药外的所有促生长类药物饲料添加剂的使用。作为抗生素重要替代物之一的植物提取物饲料添加剂，在动物饲料生产和畜禽养殖中备受关注。植物提取物饲料添加剂是指从植物中提取（非化工合成），活性成分明确、含量稳定并且可以测定，对动物和人类没有任何毒副作用，并已通过动物试验证明可以提高动物生产性能的饲料添加剂[1]。植物提取物中常见的活性物质有单宁酸、绿原酸、黄酮类、植物精油、生物碱、黄芩苷、皂苷和多糖等，这些活性物质在动物机体内具有调节采食、抗氧化、刺激内源消化酶分泌及抗菌等多种生理功能[2-5]。黄羽肉鸡是我国特有的地方品种肉鸡，因其皮薄、肌间脂肪适量、肉味鲜美、风味独特等特点而深受广大消费者青睐。据统计，2019年我国黄羽肉鸡出栏量已超45亿只，比2018年同期增长约15%，约占我国肉鸡总上市量的一半。目前有关植物提取物在猪、白羽肉鸡上的应用研究较多[6-8]，但在黄羽肉鸡上的报道较少。因此，本试验以黄羽肉鸡为研究对象，研究不同植物提取物替代阿维拉霉素对肉鸡生长性能、抗氧化功能及胫部着色的影响，以期为筛选黄羽肉鸡日粮中合理的抗生素替代品提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验所用阿维拉霉素（10%含量）由礼蓝(上海)动物保健有限公司提供；水解单宁酸（含水解单宁酸50%）由意大利某公司提供；博落回提取物（含血根碱0.15%）由湖南某公司提供；山花黄芩提取物（含绿原酸2.4 mg/g，黄芩苷24 mg/g）由北京某公司提供；止痢草提取物（含香芹酚≥2.75%，百里香酚≥0.075%）由广东某公司提供。

1.2 试验动物与日粮

试验在和盛食品集团有限公司研发农场进行，试验鸡苗由和盛集团泰州分公司朱宣种鸡场提供。试验选取健康1日龄黄羽肉鸡（矮脚黄）公雏鸡2 400只，随机分为6组，每组4个重复，每个重复100只鸡。6组分别为空白对照组、抗生素组即阿维拉霉素添加组和4组植物提取物添加组。试验设计及处理见表1。饲养时间为79 d，其中1～15日龄饲喂开口料；16～35日龄饲喂小鸡料；36～60日龄饲喂大鸡料；61～79日龄饲喂上市料。基础日粮组成及营养水平见表2。

表1 试验设计及处理（mg/kg）

表2 基础日粮组成及营养水平（风干基础）

1.3 饲养管理

肉鸡在密闭鸡舍内地面平养，自由采食和饮水，24 h光照，第1周室温控制在32～34℃，然后每周降低2～3℃，饲养管理和免疫程序参照和盛集团养户管理部作业指导书进行。

1.4 检测指标及方法

1.4.1 生长性能

在试验第35 d和79 d，进行全群空腹称重（供水禁食12 h）。记录试验期间采食量，计算1～35日龄、36～79日龄、1～79日龄阶段的平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）、料重比（FCR）及死淘率。

1.4.2 抗氧化指标

在试验第35 d时，每重复中随机选2只体重相近的肉鸡进行采样，采样前空腹12 h。肉鸡称重后从颈动脉处放血，用干净离心管收集血液，待析出血清后，4℃条件下离心10 min（4 000 r/min），取血清分装，并置于-20℃下保存。待肉鸡死亡后立即解剖分离肝脏，在同一侧相同部位取部分肝脏，于-20℃下保存。准确称取约0.3 g肝脏，加入9倍体积（V/W）的生理盐水后在冰浴中匀浆至无明显块状物，将匀浆液在4℃条件下离心15 min（4 000 r/min），取上清液分装，-20℃下保存。

测定肉鸡血清和肝脏总超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、过氧化氢酶（CAT）活性及丙二醛（MDA）含量，测定使用试剂盒购于南京建成生物工程研究所。

1.4.3 肉鸡胫部黄度值的测定

试验第79 d每重复随机选取5只（每组20只）体重相近的公鸡，用罗氏比色扇对肉鸡胫部黄度进行比色评分，每组测定均由同一操作人员进行，每只鸡均测定右侧胫部同一部位。

1.5 统计与分析

试验数据经Excel 2019初步整理后，采用SPSS 22.0软件中单因素方差分析（one-way ANOVA）进行统计分析，Duncan’s法进行多重比较，结果以“平均值±标准误（Mean±SEM）”表示，设定P＜0.05为差异显著水平。

2 结果与分析

2.1 不同植物提取物对黄羽肉鸡生长性能的影响（见表3）

表3 不同植物提取物替代抗生素对黄羽肉鸡生长性能的影响

由表3可见，MCE、SMF、OEO组肉鸡35日龄体重显著低于NC、ANT及TA组（P＜0.05），同时OEO组35日龄体重亦显著低于SMF组（P＜0.05），NC、ANT及TA组间35日龄体重无显著差异（P＞0.05），各组间79日龄体重差异均不显著（P＞0.05）；1～35日龄，MCE、SMF、OEO组肉鸡ADG、ADFI均显著低于NC、ANT组及TA组（P＜0.05），且OEO组肉鸡ADG、ADFI亦显著低于SMF组（P＜0.05），与NC组相比，ANT、TA、MCE、SMF及OEO组肉鸡FCR分别降低3.79%、1.90%、3.32%、3.79%及2.84%（P＜0.05）；36～79日龄，各组间ADG、ADFI及死淘率差异均不显著（P＞0.05），ANT和OEO组FCR较NC组分别降低2.00%（P＞0.05）和3.67%（P＜0.05）；1～79日龄，OEO组ADFI较NC组显著降低（P＜0.05），与NC组相比，ANT、TA、MCE、SMF及OEO组肉鸡FCR分别降低2.91%（P＜0.05）、1.10%（P＞0.05）、0.73%（P＞0.05）、1.10%（P＞0.05）、2.91%（P＜0.05）。

2.2 不同植物提取物对黄羽肉鸡血清和肝脏抗氧化功能的影响(见表4)

表4 不同植物提取物对35日龄黄羽肉鸡血清和肝脏抗氧化功能的影响

从表4数据可以看出，各组间肉鸡血清SOD、GSH-Px活性及MDA含量差异均不显著（P＞0.05），TA组肉鸡血清CAT活性较NC、ANT及OEO组显著提高（P＜0.05）；不同植物提取物对肉鸡肝脏SOD、GSHPx、CAT活性及MDA含量均无明显影响（P＞0.05）。

2.3 不同植物提取物对黄羽肉鸡胫部着色的影响（见图1）

图1 不同植物提取物对黄羽肉鸡胫部着色的影响

图1可见，与NC组相比，ANT、TA、MCE及SMF对黄羽肉鸡胫部着色均无显著影响（P＞0.05），OEO组肉鸡胫部黄度值明显低于NC组（P＜0.05），但与其他各组差异不显著（P＞0.05）。

3 讨论

3.1 植物提取物对黄羽肉鸡生长性能的影响

单宁酸是一种植物源水溶性多酚化合物，由于能够结合蛋白质并抑制消化酶活性，降低动物机体对养分的消化和吸收，通常被认为是一种抗营养因子。但日粮中单宁的来源、含量以及结构均会影响其营养和抗营养特性[9]。根据结构与活性可将单宁酸分为2种类型，即水解单宁酸和缩合单宁酸。缩合单宁酸是单胃动物部分植物性饲料原料中存在的抗营养因子，而水解单宁酸可作为饲料添加剂应用到畜禽日粮中，其水解产物没食子酸和葡萄糖对单胃动物的生长性能和肠道健康具有改善作用[10]。Liu等[11]研究证实，日粮添加1 000 mg/kg栗木单宁，对肉鸡全期生长性能无影响。这与Jamroz等[12]的研究结果一致，其在日粮中添加250 mg/kg或500 mg/kg栗木单宁对肉鸡增重和饲料转化率均无明显影响。本试验结果证实，日粮添加TA对黄羽肉鸡全期生长性能无影响，与以往研究结果一致。另外，本试验中肉鸡前期添加TA可显著改善FCR，这与Tonda等[13]的研究结果相似，其在接种球虫疫苗的肉鸡日粮中添加500 mg/kg（以有效成分计100 mg/kg）单宁提取物显著改善1～21日龄FCR。试验鸡群在第3 d全群免疫球虫疫苗，肉鸡生长前期胃肠道发育尚不健全，接种球虫疫苗不可避免地会对肠道造成损伤，因此水解单宁酸对肉鸡生长前期FCR的改善作用可能归因于其不仅减轻球虫疫苗接种造成的肠道损伤，还能帮助机体建立潜在免疫力并增强抗病力[13-14]。亦有研究表明，日粮添加水解单宁酸可通过降低肉鸡肠蠕动和食糜通过小肠的速率来提高饲料转化率[15]。

SMF是将山银花和黄芩提取物按照一定比例组合而成，主要活性成分为绿原酸和黄芩苷。MCE是从博落回果荚中提取的生物碱制剂，其主要生物活性成分为异喹啉类生物碱，包括血根碱、白屈菜红碱。SMF和MCE同属中药类植物提取物，是我国农业农村部批准使用的绿色饲料添加剂，二者均具有抑菌、抗炎、抗氧化、增强免疫力等功能[16-17]。梁英等[18]研究表明，在日粮中添加不同水平的黄芩黄酮对肉鸡体重、日增重、饲料转化率均无明显影响。吕慧源[19]等报道，添加500 mg/kg SMF对肉鸡各阶段ADG、ADFI及FCR均无显著影响，与本试验结果一致。最近的研究报道，日粮添加150 mg/kg MCE对1～15日龄白羽肉鸡采食量和增重无明显影响，但显著降低了FCR[20]。本试验中日粮添加SMF和MCE均显著降低肉鸡前期FCR，对后期亦有改善作用，与Liu等[17]的研究结果一致。进一步的试验证实，MCE通过提高盲肠有益菌数量和短链脂肪酸浓度、促进肠道发育、提升肠道屏障功能等途径，改善黄羽肉鸡饲料转化率[21]。另外，本试验前期添加SMF和MCE对肉鸡采食量均有明显抑制作用，进而对增重造成了负面影响，且在肉鸡生长后期并未得到补偿。综合以往研究和本试验结果表明，日粮添加SMF和MCE对黄羽肉鸡生长无促进作用，但饲料转化率得到一定改善。

止痢草又名牛至、土香薷、小叶薄荷，含有30多种抗菌物质，是一种潜在的天然抗生素和药物生长促进剂。香芹酚和百里香酚为止痢草提取物的主要活性成分，具有多种生物特性，如抗氧化性、抗菌性、抗炎、促消化、调节免疫等[22]。较早的一项研究表明[23]，日粮添加200 mg/kg香芹酚明显降低了1～28日龄肉鸡的ADFI、ADG及FCR；而添加200 mg/kg百里香酚则对生产性能无影响。与对照组相比，日粮分别添加125、250、500 mg/kg的OEO均不同程度降低了白羽肉鸡1～21日龄ADFI和ADG，但差异不显著[24]。日粮分别添加50、100 mg/kg和200 mg/kg植物提取物（牛至和茴香复合物）均不同程度的抑制了白羽肉鸡全期的ADFI，其中100 mg/kg和200 mg/kg组FCR显著降低[25]。本试验中黄羽肉鸡日粮添加OEO对促生长无益，但显著降低全期ADFI和FCR，这与以往报道相似，说明OEO对肉鸡采食量确实存在一定的抑制作用，但同时也改善了饲料转化率。OEO对采食量的抑制作用可能是由于植物提取物中某些刺激性成分影响了饲料的适口性，进而导致采食量的降低[26]。另一方面，植物提取物通过刺激肠道消化酶的分泌、增加肠道绒毛吸收面积来提高营养物质的消化和吸收，进而改善饲料转化率[27-28]。有关植物提取物对肉鸡生长性能影响的研究结果并不完全一致，这可能归因于不同植物提取物的组分、有效成分浓度以及生物活性的差异。另外，肉鸡对植物提取物的响应还受到其他因素的影响，例如肉鸡品种、日龄、卫生及环境等因素。

3.2 植物提取物对黄羽肉鸡抗氧化功能的影响

植物提取物中含有的多酚类化合物具有抗氧化作用，是因为其酚基官能团具有氧化还原特性，可以作为还原剂、供氢体来淬灭单氧自由基[29]。在动物体内，植物提取物通过提高抗氧化酶的活力，增加抗氧化物质的含量，减少过氧化物的产生来提高动物机体的抗氧化能力[1]。水解单宁酸分子中的邻位酚羟基是一种优良的供氢体，可直接通过调控类似核因子E2相关因子2(Nrf2)等氧化还原敏感元件的信号通路来上调体内抗氧化酶活性及表达量，进而降低机体氧化损伤[15]。最新的一项研究表明，日粮添加TA对肝脏中CAT活性无明显影响，但显著提高了血清中CAT活性[10]，与本试验结果一致。Liu等[11]研究证实，日粮添加1 000 mg/kg单宁酸（单宁含量75%以上）显著提高肉鸡血清、胸肌及腿肌中SOD、GSH-Px活性，但对MDA含量无影响。其另一项试验表明，添加2 000 mg/kg单宁酸可明显提高热应激状态下肉鸡回肠黏膜SOD活性，并降低了MDA含量[30]。本试验中TA对肉鸡血清和肝脏SOD、GSH-Px活性及MAD含量无影响，与以往研究结果不完全一致，其差异性可能是本试验中TA的添加水平较低所致。另外，本试验中日粮添加MCE、SMF及OEO对肉鸡血清和肝脏抗氧化酶活性和MDA含量均无显著影响。研究表明，日粮添加125 mg/kg和250 mg/kg山银花和黄芩苷提取物对肉鸡血清SOD、CAT、GSH-Px酶活及MDA含量均无明显影响，而500 mg/kg添加组显著提高了42日龄肉鸡血清CAT和GSH-Px酶活并降低了MDA含量[19]。提示，植物提取物对肉鸡抗氧化状态研究结果的差异性，不仅与提取物种类、有效成分含量相关，还与动物类别、添加量及其使用时间密切相关。

3.3 植物提取物对黄羽肉鸡胫部着色的影响

受传统消费习惯的影响，黄羽肉鸡胫部和皮肤的色度成为衡量黄羽肉鸡商品质量的重要指标，直接影响其市场价格和需求。肉鸡自身不能合成起主要着色作用的叶黄素类物质，必须从体外摄取，因此，实际生产中会在饲料中添加天然叶黄素来提高肉鸡皮肤、胫部、喙等部位的色泽。在本试验中，与对照组相比，肉鸡后期日粮添加150 mg/kg OEO明显降低了胫部黄度值。有关饲料中添加植物提取物对黄羽肉鸡胫部着色效果的报道较少，本试验中OEO组肉鸡胫部黄度的降低可能是由于OEO抑制了肉鸡的采食量，肉鸡所摄入的叶黄素绝对量较少所致。提示，在黄羽肉鸡日粮中应用植物提取物作为抗生素替代物时，还应关注肉鸡采食量及叶黄素的绝对摄入量。