氧化苦参碱对慢性乙型肝炎患者血清炎症细胞因子水平及肝纤维化指标的影响

耿丽洁，孙玉，张少华

1河北省老年病医院，石家庄 050011；2保定市人民医院

慢性乙型肝炎（CHB）是由乙型肝炎病毒（HBV）持续感染导致的慢性肝脏炎症性疾病，在全球呈广泛分布态势，而我国属高地方性流行地区。随着病毒对肝组织的破坏，CHB可逐渐进展至肝纤维化、肝硬化，最终导致肝功能失代偿，引发低蛋白血症、腹水等并发症，导致不良预后的发生［1-2］。目前，采用抗病毒药物抑制HBV活性是CHB治疗的基本措施。恩替卡韦可通过作用于病毒DNA聚合酶发挥抗病毒作用，但因HBV基因组存在高变异性，长期应用易引起病毒基因耐药性突变和病毒活性的反弹，从而导致炎症反应增强和肝纤维进程加速［3-4］。研究发现，苦参碱类生物碱可通过改变细胞内环境发挥抗病毒作用，可降低病毒对恩替卡韦耐药性，提高临床治疗效果［5］。但是，对于氧化苦参碱联合恩替卡韦对炎症细胞因子及肝纤维化影响的研究较少。2018年1月—2019年12月，我们观察了CHB治疗中苦参碱联合恩替卡韦对炎症细胞因子水平及肝纤维化指标的影响。现报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 经河北省老年病医院医学伦理委员会批准，选择我院收治的CHB患者。纳入标准：①符合《慢性乙型肝炎防治指南》［7］中CHB的诊断标准；②既往无抗病毒治疗史；③签署知情同意书。排除标准：①合并其他病毒性肝炎、酒精性或药物性肝损伤、自身免疫性肝病；②合并肝硬化或肝脏肿瘤；③合并艾滋病、肺结核等传染性疾病；④患有精神病史；⑤合并妊娠或哺乳期妇女；⑥伴有症状的心脏病及未能控制的癫痫；⑦对研究中所用药物过敏。共收集CHB患者160例，采用随机数字表法将其分为对照组、观察组各80例。观察组中男46例、女34例，年龄（44.8±5.2）岁，病程（7.8±2.4）年，肝功能丙氨酸氨基转移酶（ALT）为（136.1±24.3）U/L、天 门 冬 氨 酸 氨 基 转 移 酶（AST）为（86.5±12.3）U/L、总胆红素（TBil）为（22.4±6.3）μmol/L；对照组中男45例、女35例，年龄（45.1±5.4）岁，病程（7.9±2.5）年，肝功能ALT（130.7±25.3）U/L、AST（87.5±10.4）U/L、TBil（23.0±5.9）μmol/L。两组性别、年龄、病程及肝功能具有可比性。

1.2 治疗方法 两组均禁烟酒，禁止服用存在肝脏毒性的药物，行常规保肝治疗，给予高蛋白及维生素食物。对照组口服恩替卡韦分散片0.5 mg（山东鲁抗医药股份有限公司，国药准字H20130061），1次/天；观察组在对照组基础上同时给予氧化苦参碱注射液150 mg（广州白云山明兴制药有限公司，国药准字H10950071）加入10%葡萄糖溶液250 mL，静脉滴注，1次/天，连续治疗3个月。

1.3 指标检测方法

1.3.1 血清炎症细胞因子 分别于治疗前及治疗3个月后采集空腹静脉血，分离血清备用；采用ELISA法检测血清白细胞介素2（IL-2）、IL-6、IL-10水平，试剂盒购自上海劲马生物科技有限公司；检测仪器为ELX808IU型酶标仪，检测波长450 nm，检测过程严格按照仪器使用说明书进行。

1.3.2 血清肝纤维化指标 分别于治疗前及治疗3个月后采集空腹静脉血，分离血清备用；采用放射免疫法检测Ⅲ型前胶原（PCⅢ）、Ⅳ型胶原（Ⅳ-C），层粘连蛋白（LN）和透明质酸酶（HA），检测仪器为安徽中科中佳公司GC-1500型γ放射免疫计数仪，检测过程严格按照仪器使用说明书进行。

1.4 统计学方法 采用SPSS19.0统计软件。计量资料以±s表示，组间比较行t检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组血清炎症细胞因子水平比较 治疗前，两组血清IL-2、IL-6、IL-10水平差异无统计学意义；治疗3个月后，两组血清IL-2、IL-10水平高于治疗前而IL-6水平低于治疗前（P均＜0.05），且观察组血清IL-2、IL-10水平高于对照组而IL-6水平低于对照组（P均＜0.05）。见表1。

表1 两组血清炎症细胞因子水平比较（±s）

表1 两组血清炎症细胞因子水平比较（±s）

注：与同组治疗前比较，a P＜0.05；与对照组同时点比较，b P＜0.05。

组别观察组治疗前治疗后对照组治疗前治疗后n 80 80 IL-2（ng/L）27.6±5.4 39.6±6.9ab 27.7±5.7 30.4±4.8a IL-6（pg/mL）138.0±21.5 103.3±18.2ab 139.8±21.3 125.6±17.1a IL-10（ng/L）97.2± 9.1 145.4± 8.3ab 97.1±10.2 114.8± 9.3a

2.2 两组血清肝纤维化指标水平比较 治疗前，两组血清PCⅢ、Ⅳ-C、LN、HA水平差异无统计学意义；治疗3个月后，两组血清PCⅢ、Ⅳ-C、LN、HA水平均较治疗前下降，且观察组各指标均低于对照组（P均＜0.05）。见表2。

表2 两组血清肝纤维化指标水平比较（±s）

表2 两组血清肝纤维化指标水平比较（±s）

注：与同组治疗前比较，a P＜0.05；与对照组同时点比较，b P＜0.05。

组别观察组治疗前治疗后对照组治疗前治疗后n 80 80 PCⅢ（μg/L）56.4±7.8 35.6±6.4ab 55.9±8.1 44.8±7.1aⅣ-C（μg/L）58.2±8.9 37.8±5.2ab 56.9±8.3 47.2±6.4a LN（ng/L）48.7±5.4 21.9±4.9ab 50.2±5.6 33.6±4.2 HA（ng/L）161.9±16.4 51.7±11.6 158.5±17.4 91.2±15.8

3 讨论

CHB是由HBV感染导致的肝脏感染性疾病，HBV持续复制会引起机体免疫应答损伤，导致免疫功能抑制；同时能够引起肝细胞结构损害，不仅导致肝功异常，也能诱发肝间质组织增生，引发肝纤维化、肝硬化［6-8］。抗病毒治疗是CHB治疗的基本措施，病毒复制状态得到有效控制后，能够有效缓解肝脏的炎症反应，减轻肝纤维化的进程［9-11］。HBV感染及引起肝脏损害是一个极为复杂的过程，一般认为HBV复制会引起p38促分裂原活化蛋白激酶的磷酸化活化，从而调节转录激活因子2、核转录因子κB等基因表达，同时促进下游炎症细胞因子表达；炎症细胞因子能通过直接的炎症损害引起组织损伤，还可趋化及活化粗纤维细胞因子引起组织的进一步损害，导致肝脏间质的增生及纤维化，最终导致肝功能的失代偿。

氧化苦参碱属苦参碱类生物碱，是从苦参、广豆根或苦豆子中提取的有效成分。近年来研究显示，氧化苦参碱可通过破坏肝细胞中热休克蛋白70 mRNA稳定性，发挥抗HBV效果［12］。此外，氧化苦参碱尚具有拮抗炎症反应及纤维化的作用，能够减轻病毒感染导致的炎症介质释放及继发的组织纤维化。恩替卡韦作为一种鸟嘌呤核苷类似物，能够在体内被降解为具有活性的三磷酸盐，竞争性结合天然脱氧核糖底物，终止DNA链延长，发挥抗病毒作用；但是，其并不能有效诱导抑制肝星状细胞活化，纠正CHB免疫系统紊乱，因而不能够彻底清除HBV［13］。

本研究结果显示，观察组采用氧化苦参碱联合恩替卡韦治疗后，其血清肝纤维化指标PCⅢ、Ⅳ-C、LN、HA水平明显下降，且血清IL-2及IL-10水平升高而IL-6水平下降。这表明氧化苦参碱辅助下恩替卡韦能更有效地减少有害炎症细胞因子的释放，减轻炎症反应，从而抑制CHB患者的肝纤维化进程［14-15］。IL-6是具有强烈致炎作用的细胞因子，能够通过趋化炎症细胞因子、直接损伤细胞等途径发挥对组织的损伤作用。氧化苦参碱能够通过调控TLR4/NF-κB通路活性以及抑制炎症因子活性调控细胞凋亡基因水平，从而减少炎症介质的释放，最终发挥抗炎及拮抗肝纤维化的作用［16-18］。此外，在病毒感染状态下，机体及肝脏的免疫功能受到抑制，淋巴细胞分化异常，IL-2及IL-10水平下降；然而，本研究中观察组在应用氧化苦参碱后血清IL-2、IL-10水平升高更为明显。这说明氧化苦参碱尚具有免疫调节功能，与既往的研究一致［19］。这是因为苦参碱能够调节Th0细胞的分化进而调节Th1/Th2细胞的免疫平衡，同时也能够调节其他淋巴细胞亚群的活性，发挥抗炎及抗病毒作用。

综上所述，氧化苦参碱联合恩替卡韦治疗CHB，能够有效调控炎症介质的释放，降低肝纤维化指标水平，以抑制肝硬化进程，从而改善患者预后。由于本研究纳入样本量较少，且观察时间相对较短，对于氧化苦参碱在CHB患者中的具体作用需进一步研究证实。