乙肝血清标志物、HBV-DNA对诊断乙型肝炎病毒的临床研究

赵 娜，黄 刚

（1.赣州市中心血站临床服务科，江西 赣州 341000；2.赣州市肿瘤医院检验科，江西 赣州 341000）

当HBV进入肝脏时，其表达就会增加，依赖逆转录酶和聚合酶复制，两者结合形成HBV颗粒，通过出芽方式被细胞膜排除，侵入到其他肝细胞中[1]。由于HBV半衰期较长，与肝细胞的半衰期大体上相同，肝细胞再生和分裂时，很可能侵入子代细胞，目前，未见有效的药物可完全清除HBV-DNA模板，因此，HBV很难治愈[2]。由此，本文通过检测血清标志物、HBV-DNA、ALT指标变化，探讨乙肝血清标志物、HBV-DNA、ALT在诊断乙型肝炎中的应用价值。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选择2017年12月—2019年1月赣州市肿瘤医院收治的172 例已确诊的乙肝患者，其中男性108 例，女64 例，年龄19～77 岁，平均年龄为(53.02±3.65)岁，平均BMI为(27.23±2.17)kg/m2，平均体脂率为(32.66±5.74)%。

1.2 纳入标准和排除标准 纳入标准：172 例患者符合文献标准[3]，且未发现其他器官感染，也未有免疫系统疾病，患者未服用过其他特效药；排除标准：排除肝以外脏器功能不全患者，同时患其他器官恶性肿瘤的排除，若感染其他重症、严重心律失常一律排除，排除吸烟、外伤、手术和肺结核患者。

1.3 仪器和试剂 荧光定量PCR仪（ABI 7500），化学发光仪（安图生物），全自动生化分析仪（西门子ADVIA2400），HBV-DNA检测试剂（达安基因），ALT检测试剂（西门子试剂）、HBsAg和HBeAg定量检测试剂（安图生物试剂）。

1.4 检测方法 血清样本来自172 例患者，患者空腹抽静脉血，离心采用化学发光法测定血清标志物，操作按照说明书进行，包含：HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAg、HBcAb。同时运用荧光定量PCR仪检测HBV-DNA定量，采用IFCC双试剂酶法检测ALT。血清标志物判定标准：计算标本（S）值与阴性标准（N）值进行比对，HBsAg、HBsAb、HBeAg阳性表达S/N值应＞2.1，HBeAb、HBcAg、HBcAb阳性表达S/N应＜0.5。HBV-DNA判定标准：HBV-DNA阴性时HBV-DNA应＜5.0×102copies/mL，ALT结果阳性时应＞40 U/L。

1.5 统计学处理 应用Epidata 3.10和SPSS 20.0软件，对172 例患者HBV-DNA、血清标志物检测结果进行分析，计数资料以百分率（%）表示，采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清标志物检测结果 血清标志物模式4（HBsAg、HBeAb、HBcAb）检测出71 例占比41.3%，其次为模式1（HBsAg、HBeAg、HBcAb）有64 例占比37.2%，模式9（HBsAb、HBeAb）仅1 例占比0.6%，172 例患者血清标志物以HBsAg、HBsAb、HBcAb、HBeAb为主。（表1）

表1 血清标志物检测结果

2.2 不同血清模式HBV-DNA检测结果 RT-PCR检测HBV-DNA发现，血清标志物模式6～12中未出现HBV-DNA阳性患者15 例，模式1中HBV-DNA阳性患者48 例占比75.0%，模式4中HBV-DNA阳性患者47 例占比66.2%，模式2中HBV-DNA阳性患者1 例占比50.0%，模式5仅1 例，模式1、2中HBV-DNA含量较模式3、4、5有明显增多。（表2）

表2 不同血清模式HBV-DNA检测结果

2.3 不同血清模式ALT检测结果 双试剂酶法检测发现血清模式9未见ALT阳性例数，模式1和模式4中ALT阳性患者占比较高，模式2、11、12阳性患者占比较低。模式1中ALT含量与其他模式比对均有所增加。（表3）

表3 不同血清模式ALT检测结果

3 讨论

我们通过观察血清标志物、H B V-D N A检测结果发现，血清标志物模式4（HBsAg、HBeAb、HBcAb）检测出71 例占比41.3%，模式1（HBsAg、HBeAg、HBcAb）有64 例，172 例患者血清标志物以HBsAg、HBeAg、HBcAb、HBeAb为主。血清标志物模式6～12中未出现HBV-DNA阳性患者，模式1中HBV-DNA阳性患者48 例，模式4中HBV-DNA阳性患者47 例，模式2中HBVDNA阳性患者1 例，模式1、2中HBV-DNA含量较模式3、4、5有明显增多。有文献[4]报道，部分HBeAb阳性患者，HBV没有完全消除，HBeAg的消失和HBeAb的出现，并不能作为判断病毒水平的完全减少和感染性的消失的依据。有研究[5-6]证实，HBeAg/HBeAb转换后可检测到HBV-DNA阳性表达，HBV病毒感染者HBV-DNA仍呈阳性的主要原因是由于前C区基因突变结果所致。有文献[7]报道，HBV感染患者的HBeAg/HBeAb转换后，HBsAg在HBV感染的初期阶段也被消除，但HBVDNA仍持续存在患者体内，并呈阳性表达且载量较低，这与本文研究相符。

我们通过对不同血清模式、不同HBV-DNA载量ALT进行检测发现，模式1中ALT阳性患者30例，模式4中ALT阳性患者24 例，模式1中ALT含量与其他模式比对均有所增加。HBV-DNA载量在105～107copies/mL中ALT含量高于80 U/L有18 例，载量＞107copies/mL中ALT含量高于80 U/L有19例。有研究[8]证实，随着HBV-DNA载量水平的升高，血清ALT水平也呈上升趋势，尤其是HBsAg、HBeAg、HBcAb携带患者，肝功能障碍表现越为明显。有研究[9]证实，血清HBV-DNA载量水平与ALT水平成正比，ALT水平越高，HBV-DNA载量水平越高，病毒高水平复制病毒样本就越多。有研究[10-12]证实，HBV-DNA可反映HBV病毒复制情况和水平变化，而ALT水平与肝细胞损伤程度呈正比，血清标志物检测可反映出HBV感染阶段和对预后影响。综上所述，HBV-DNA载量、血清标志物、ALT三种检测指标有密切联系，分别反映疾病的不同类型，检测血清标志物、HBV-DNA载量和ALT水平，在HBV感染医治中具有重要意义。