同型半胱氨酸、胱抑素C与糖尿病周围神经病变发病的相关性分析

刘甜甜，鲁智敏，曹 迪

（郑州市第七人民医院神经内科，河南 郑州 450016）

糖尿病是通常由胰岛素功能分泌受限或生物作用受损所引起以高血糖为特征的慢性进展性疾病，2型糖尿病（T2DM）患者居多，糖尿病患者可导致多种并发症，危害患者生命健康[1]。最新一项流行病学调查显示，我国该类患者占据全国总人口的10%左右，糖尿病已经发展为世界性卫生问题。大量研究发现，在糖尿病疾病发展过程中能够导致机体产生心脑血管、神经及视网膜病变等，加重患者致残致死的概率[2]。糖尿病周围神经病变（diabetic peripheral neuropathy, DPN）是糖尿病疾病预后常出现的并发症，与家族遗传史、机体代谢障碍和神经营养受限等有关，DPN发生概率占据糖尿病患者的6成以上[3]。DPN与多数疾病相似，发病早期无明显临床表现，当患者察觉时往往出现不可逆的损伤，给临床治疗带来较大难度。

同型半胱氨酸（homocysteine, Hcy）是机体进行蛋氨酸代谢的介导物质，属于巯基氨基酸。研究[4]表明，Hcy能够对血管内皮细胞造成损伤，加快血管内斑块阻塞，是心脑血管疾病产生的危险因素。血清胱抑素C（serum cystatin C，CysC）是分子质量较低的蛋白酶物质，肾脏是清除CysC唯一途径，但是当肾小球损伤时，CysC水平升高，是糖尿病肾病的敏感指标之一[5-6]。但是，目前，关于Hcy、CysC与DPN疾病研究文献还比较少见，所以，本文将探讨Hcy、CysC与DPN发病的相关性。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2018年6月—2019年7月，在我院内分泌科治疗的T2DM患者94 例纳入研究，根据神经病变检测结果，不合并周围神经病变56 例为单纯组（男30 例，女26 例），合并周围神经病变38 例为病变组（男21 例，女17 例）。选择同一时间内55名健康体检者为正常组（男36 名，女19 名）。

1.2 纳入与排除标准

1.2.1 纳入标准：T2DM：依据中国2型糖尿病防治指南（2017年版）[7]，空腹血糖≥7.0 mmol/L或糖负荷后2 h血糖≥11.11 mmol/L，或随机血糖≥11.11 mmol/L；DPN：明确糖尿病史；参考中国2型糖尿病防治指南（2017年版）[7]诊断糖尿病后出现神经病变；以下5个项目中有2项异常者视为DPN：(1)温度觉异常；(2)足部感觉减退或消失；(3)振动觉异常；(4)裸反射消失；(5)神经传导速度减慢。

1.2.2 排除标准：近30 d口服叶酸、维生素B等能够影响指标的药物；具有酒精、吸烟依赖性患者；严重器官障碍；合并其他神经疾病；近期30 d内存在手术史。

1.3 方法

1.3.1 基础资料收集：记录所有研究对象基础资料，包括年龄、病程、体质指数（BMI）、收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、血糖（FBG）、总胆固醇（T C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、甘油三酯（TG）、脂蛋白a[Lp(a)]、糖化血红蛋白（HbA1c）等。

1.3.2 标本采集：各组研究对象空腹8 h后抽取肘部静脉血，送我院检验科检测血糖、血酯等水平。并保存部分血清常温保存120 min后，高速离心，分离血清超低温保存。采用Hcy、CysC试剂盒（湖南永和阳光科技）检测三组血清Hcy、CysC水平。

1.3.3 标本测定：Hcy、CysC均采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测，检测方法一致，以Hcy为例。加入样品，常温下静置120 min，温育加入100 μL抗体工作液，静置60 min，洗板：反复3 次，后进行甩干；二次温育，二次洗板，显色，终止显色，检测OD值，计算样品浓度。

1.4 统计学分析 采用SPSS 22.0软件对3组的一般资料、Hcy、CysC水平进行统计学分析，三组比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用t检验，采用Pearson分析Hcy、CysC的相关性，DPN的危险因素采用Logistic回归分析，P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 三组研究对象一般资料比较 三组男女比例、年龄、BMI、DBP比较差异无统计学意义（P＞0.05）；病变组病程时间、HbA1c水平高于单纯组（P＜0.05）；HDL-C水平正常组高于单纯组和病变组（P＜0.05），在其他指标中单纯组和病变组均高于正常组（P＜0.05）。（表1）

2.2 三组研究对象血清Hcy、CysC水平 单纯组Hcy、CysC水平分别为(11.65±2.63)μmol/L、(1.95±0.63)mg/L，高于正常组(8.75±2.80)μmol/L、(0.76±0.25)mg/L，且低于病变组Hcy、CysC水平(18.48±4.50)μmol/L、(2.95±1.24)mg/L，组间比较差异具有统计学意义（P＜0.05）。（表2）

表2 三组研究对象血清Hcy、CysC水平比较（±s）

表2 三组研究对象血清Hcy、CysC水平比较（±s）

注：与正常组相比，*P＜0.05；与单纯组相比，#P＜0.05。

指标 正常组（n＝55） 单纯组（n＝56） 病变组（n＝38） F P Hcy（μmol/L） 8.75±2.80 11.65±2.63* 18.48±4.50*# 101.6 ＜0.001 CysC（mg/L） 0.76±0.25 1.95±0.63* 2.95±1.24*# 98.32 ＜0.001

2.3 Hcy、CysC与其他因素的Pearson相关分析 血清中Hcy水平在DPN疾病发展与病程、HbA1c、LP(a)和CysC水平有相关性（P＜0.05），与其余因素无关（P＞0.05）；CysC水平在DPN疾病发展与患者病程、SBP、LP(a)和Hcy有相关性（P＜0.05），与其余因素无关联（P＞0.05）。（表3，表4）

表3 Hcy与其他因素的Pearson相关分析

表4 CysC与其他因素的Pearson相关分析

2.4 DPN病变多种危险因素Logistic分析 以DPN为因变量，对T2DM患者中Hcy、CysC、HbA1c及病程进行Logistic回归分析，结果显示，Hcy、CysC、HbA1c及病程均是DPN患者病变的危险因素。（表5）

表5 DPN病变多种危险因素Logistic分析

3 讨论

DPN是糖尿病患者常见并发症，主要以自主神经改变为主要临床特征的神经疾病。根据流行病学调查显示，DNP已经严重影响患者生存周期及生活质量。通过临床实验室指标了解Hcy、CysC水平变化与DPN的相关性研究对于改善患者预后具有重要作用。

Hcy在机体代谢主要通过三种途径：(1)能够通过维生素B辅助帮助下，降解成半胱氨酸；(2)再甲基化作用，能够通过甜菜碱作用合成其他多种氨基酸，还能够在维生素B帮助下生成蛋氨酸，并在机体任一组织内进行；(3)能够在细胞内检测到其表达，并与机体代谢循环过程相关，当机体出现代谢障碍时血清中Hcy水平也会产生变化[8-9]。本文研究显示，在DPN和糖尿病患者血清中Hcy水平均高于健康人群。袁娟等[10]研究显示，DPN患者血清中Hcy水平显著增加，与DPN患者代谢异常具有直接关联，本文与之研究结果相似。

CysC能够抑制细胞被蛋白水解，大量研究表明，CysC还与机体发生炎症发生发展相关，并参与癌细胞的扩散及其他疾病生理病理过程。CysC属于小分子物质，能够在肾脏中重新吸收。近些年，根据文献[11]表明CysC和心脑血管疾病具有关联，Hcy与CysC水平在不同病理疾病中呈现正相关，本文研究结果与之相似。陈德鹏、张俐等[12-13]研究显示Hcy与CysC关系密切，并与机体氧化状态相关，与糖尿病慢性疾病的发展及不良事件的发生存在辅助作用。

本文研究显示病变组患者血清中Hcy、CysC水平高于单纯组，单纯组高于正常组，以DPN为因变量进行回归因素分析，提示Hcy、CysC可以作为DPN疾病病情的预测指标之一[14]。Zheng等[15]研究显示DPN患者神经反射事件增加，感觉神经迟缓，与血清中Hcy水平增加相关。DPN患者血清中Hcy水平升高能够增加神经系统细胞毒性作用，提高NO水平损伤内皮细胞，提高血液流速，加快神经损伤[1]。本文研究发现病程、LP(a)均与Hcy、CysC有一定的相关性，Lp(a)具备特有的渗透作用，可穿透血管内皮，诱导微血管病变。袁捷等[16]研究显示病变组患者血清中Hcy水平升高与患者病程时间等因素相关，认为Hcy可以作为DPN疾病的检测指标之一，有利于临床疾病的诊断。CysC能够减少Hcy分解，提高血清中Hcy的活性，对血管损伤具有重要作用[17-18]。有学者[19]研究表明，CysC能够与Hcy在DPN疾病中，发挥神经损伤的协同作用。黄漓莉等[20]研究显示在DPN患者血清中存在高水平的CysC表达，并与患者病程、年龄相关，采用CysC联合Hcy检测对于DPN患者诊断能够提高临床准确程度。彭少林等[21]研究显示，DPN患者血清CysC表达升高，高于单纯糖尿病患者及健康人群，但是否对微血管存在特异性伤害进而加重DPN发展还需要进一步研究。

综上所述，Hcy、CysC与DPN患者病情严重度成正相关，并与患者病程、HbA1c、LP(a)有一定的相关性，可作为诊断DPN的重要参考指标。