薰衣草的离体快繁技术研究

丁雪珍

（潍坊职业学院，山东 潍坊 262737）

薰衣草（Lavandula angustifolia Mill.）为唇形科、薰衣草属小灌木或多年生草本，多种花色，最常见是蓝紫色，花期一般为6—8月[1]。薰衣草主要作为香料植物栽培，同时也是布置花坛、营造花海、设计景观的常用植物，被广泛应用于医药、化妆品、制皂、食品、保健品等行业[2]。

薰衣草多采用播种和扦插等方法繁殖。因薰衣草以花为主要产品，种子形成量少，发芽率低，且种子繁殖品种易退化。扦插育苗时老枝扦插不易生根，嫩枝扦插易腐烂。国内外研究者利用组培进行薰衣草的快速繁殖，取得一些研究成果[3-5]，本试验对薰衣草的离体快繁技术进行研究，以找到一种适合工厂化快速繁殖的方法。

1 选用试验材料与条件

1.1 外植体材料

试验用薰衣草取自山东宋香园生态世界。2019年11月至2020年11月选取幼嫩茎段作为接种材料。

1.2 仪器用具

试验在潍坊市植物组培快繁工程研究中心进行。主要设备与用具：电子天平、超净工作台，压力蒸汽灭菌器，培养基定量灌装机、接种器械消毒器，电磁炉等。

1.3 培养基的配制

以MS为基本培养基，添加2%～3%的白砂糖和0.65%的琼脂粉。根据各阶段培养需要设计不同浓度和配比的细胞分裂素和生长素，调节培养基pH为6.2。

1.4 培养条件

培养温度23～25℃，光周期为12h光照、12h黑暗，光强为1500～2000lx。

2 试验方法[6]

2.1 外植体的选择与处理

从室外长势良好的植株上，选取健壮无病虫害的当年生幼嫩枝条（2～3cm）作为外植体。

将枝条上的叶片剪去，先用流水冲洗掉表面的浮尘，再放到5%的洗洁精溶液中浸洗约5min，最后用流水冲洗干净，放到带盖的广口瓶中备用。

2.2 外植体的表面灭菌与接种

将洗净的外植体放到消毒好的广口瓶里，倒入75%酒精浸泡30～60s，倒出酒精迅速倒入有效氯2%的次氯酸钠溶液，振摇灭菌10～15min。灭菌时间到，将薰衣草茎段取出放到无菌水中冲洗1min，重复3次，最后吸干茎段表面水分备用。

2.3 外植体的诱导培养

将外植体切口被消毒剂杀死的组织剪掉，按照无菌操作要求接种到预先准备好的诱导培养基上（MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.1mg/L），接种后放到组培苗培育室，设定好培养条件，每天观察记录分化情况，30d统计污染率和成活率。

2.4 增殖培养

把初代培养分化出的新生小苗，接种到以下5种配方的增殖培养基上：

（1）MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.1mg/L；

（2）MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L；

（3）MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.2mg/L；

（4）MS+CPPU 0.5mg/L+NAA 0.1mg/L；

（5）MS+CPPU 1.0mg/L+NAA 0.2mg/L。

共5个处理，每个处理接种20瓶，30d统计增殖情况。

2.5 生根培养

将增殖得到的小苗，剪切成1.5～2.0cm长的嫩茎，转接至1/2MS培养基上，添加生长素种类与浓度见表4，每个处理接种200株，观察统计生根情况，选出最适宜的生根培养基。

3 结果与分析

3.1 外植体初代培养情况

（1）不同季节采集茎段的接种成活率情况（见表1）。

表1 薰衣草茎段不同季节接种的成活率

注：污染指细菌或真菌侵染，死亡指外植体未被微生物侵染但变色死亡。

由表1可见，接种时间对薰衣草外植体接种成活率影响很大，春季接种成活率明显高于秋季，所以尽量在春季进行外植体的处理与接种。

（2）采用不同方式灭菌对茎段接种成活率影响（见表2）。

表2 不同方式灭菌薰衣草茎段接种的成活率

对薰衣草外植体采用四种灭菌方式进行处理，从表2可以看出，75%酒精处理30～60s，2%次氯酸钠灭菌15min效果较好，成活率可达到50%左右。

3.2 不同培养基配方对增殖培养的影响

将茎段诱导出的小芽，转入不同的增殖培养基中，观察生长增殖情况，30d后得到的统计结果见表3。

表3 不同培养基配方上薰衣草丛生芽增殖情况

由表3可知，不同浓度和种类的植物激素组合对薰衣草增殖的影响较大，高浓度的CPPU虽能促进芽体增殖，但芽体细弱，对下一阶段的生根培养不利。因此，增殖培养适宜的激素组合为6-BA 2.0mg/L+NAA 0.2mg/L或CPPU 0.5mg/L+NAA 0.1mg/L。

3.3 不同生长素对生根培养的影响

薰衣草组培苗在生根培养基上，大约10d开始形成根原基，见表4。

表4 不同生长素对薰衣草生根的影响

由表4可知，1/2MS+IBA 0.5mg/L的培养基配方，薰衣草组培苗生根速度快，生根率96%，是薰衣草离体快繁的最佳生根培养基。

4 结语

研究结果表明，用薰衣草的茎段进行组培快繁，适宜春季接种。表面灭菌采用75%酒精处理30～60s，2%次氯酸钠灭菌15min效果好。试验筛选出了增殖和生根培养最适培养基配方，为薰衣草产业化繁殖提供参考，见图1～图3。

图1 茎段诱导

图2 丛生芽增殖

图3 小苗生根