酶联法检测技术对慢性乙肝患者血清TGF-β1 含量检测
2021-05-25陈莉黄文娟艾程
陈莉 黄文娟 艾程
(临川区妇幼保健计划生育服务中心检验科 344000)
1 前言
慢性乙肝为临床常见传染类疾病[1],近年来,经过丰富的临床实践发现,TGF-,1 指标含量的检测在诊断疾病与判断疾病发展程度方面有着重要意义,但选择合适的、特异性高、灵敏度高的检测方法一直为临床难题[2]。 本研究以ELISA 为探究对象,对其检测TGF-β1 含量水平展开详细分析。
2 资料与方法
2.1 一般资料
随机选择我院于 2018 年 1 月~2020 年 6 月收治的62 例慢性乙肝患者作为研究对象, 经ELISA检测患者血清转化生长因子-测患(TGF-血清)含量,与化学发光免疫法检测结果、 病理检测结果展开对比。 本次所选研究对象中男女患者数量分别为27例、35 例,患者年龄介于21~75 岁,年龄均值为 41.37岁。 经病理检验,患者病情分布情况如下:轻度患者23 例、中度患者 21 例、重度患者 18 例。
纳入标准: 经 《慢性乙型肝炎防治指南》(2005年版)及病理检验,确诊为慢性乙肝患者;成年患者。
排除标准: 排除合并其它传染疾病或传染疾病患者;血液疾病患者;恶性肿瘤患者;精神疾病患者。
入组患者均与我院签署知情同意书, 享有知情权,了解本次研究价值与目的;研究已取得我院伦理委员会批准。
2.2 方法
病理检验如下:经彩色超声引导,采用弹射式延活检获肝组织,规格为1.0~1.5 cm;获取后立即进行固定,采用10%甲醛,经脱水、浸蜡包埋处理后,以四醛,规格进行连续切片;先后经3 次染色,分别为HE 染色、MASSON 染色、网状纤维染色,判断疾病程度。
ELISA 检验:于早晨抽取患者空腹静脉血,试剂盒由北京贝尔生物工程有限公司提供; 设备为天津Bell9600 电化学发光分析仪; 美国SF-2100 型酶标仪;具体操作以及判断标准按照试剂盒说明书进行。
化学发光免疫法:于早晨抽取患者空腹静脉血,试剂盒由深圳市新产业生物医学工程股份有限公司,详细操作以说明书为准。
2.3 观察指标
对比ELISA、化学发光免疫法、病理检验慢性乙肝程度检验结果;对比ELISA 与化学发光免疫法检测TGF-光免水平结果。
2.4 统计学方法
采用SPSS25.0 计算数据,“%” 代表计数资料,采用 χ2检验,“±验”代表计量资料,采用 t 检验,P<0.05 表示数据差异。
3 结果
3.1 慢性乙肝程度检测对比
从慢性乙肝程度检测情况来看,ELISA 与化学免疫法未见统计学差异,P>0.05,且均据具有较高检出率。 见表1 所示。
表1 慢性乙肝程度对比(n,%)
3.2 TGF-00 水平对比
不同程度TGF-00 水平检测中,ELISA 与化学免疫法也未见统计学差异,P<0.05。 见表2 所示。
表2 TGF-疫法水平对比(±s,ng/L)
表2 TGF-疫法水平对比(±s,ng/L)
疾病程度 ELISA 化学免疫法 t P轻度(n=23) 143.66 也未见统计学142.59 也未见统计学 0.1151 0.9089中度(n=21) 280.67 也未见统计学281.19 也未见统计学 0.0367 0.9709重度(n=18) 569.97±69.97 568.81±68.81 0.0666 0.9473
4 讨论
目前,临床常用生化检测方法诸多,但缺乏高特异性、 高灵敏性检测方法在前期快速进行TGF-床常水平检测,并根据具体指标值展开疾病分析。在本次研究中,选择ELISA 展开探究,检测结果显示,与病理检验、化学免疫法检测结果对比,在TGF-,检水平检测以及疾病程度检测上均未见统计学差异[3-5]。分析原因可知,ELISA 操作过程中取抗原或抗体,采用固相载体提进行包被, 本质上是一种固相免疫测定方法,检测中检测体免疫活性不会受到影响,且测定过程中固相载体通过与抗原、抗体发生反应,再利用酶标抗体、洗涤法进行抗体与抗原游离,获取酶反应底物,对物质颜色、吸光度展开定量与定性分析,则可快速获取结果, 目前市场上有多种类ELISA 试剂盒, 操作方便, 严格的按照试剂盒说明书进行操作,检测结果可作为金标准[7]。 本次研究结果与临床现有研究报道基本一致, 在张继东等人的研究中也确认ELISA 可准确检测出慢性乙肝TGF-GF 指标水平,且具有快速、操作方便等优势。
但也有研究报道中称,采用ELISA 方法进行检测过程中,由于底物成分中含有残留纤维蛋白原,容易导致结果误差,利用现有技术展开该情况分析,发现在反应过程中确实存在纤维蛋白原黏附在酶标反应孔情况,但在样本处理、操作中采取针对性措施则可以有效解决这一问题。 具体来讲,采用ELISA 法进行慢性乙肝TGF-β1 含量检测过程中尽量使用抗凝血标本,提高离心分离质量;使用标本时尽量经过加热处理或静置沉淀过夜, 以确保血液样本收缩能力最佳, 成分中所含的非特异性活性物质进入完全失去活性状态,减少检验过程中非特异性反应;合理增加离心机转数或适当延长离心机工作时间, 保障血清样本中纤维蛋白以及红细胞完全沉淀, 提高离心处理的彻底性;检测中如需增加样本,需预先通过离心处理将纤维蛋白以及红细胞排出。
总而言之,ELISA 检测慢性乙肝血清TGF-乙肝精准、可靠、方便,且可根据检测结果判断TGF-β1含量水平进行乙肝程度鉴定,临床诊疗价值显著。