27 个郁金香栽培品种对种球腐烂病的抗性鉴定

王艳丽 贾文庆 朱小佩 穆金艳 丁 玲 庞弯弯 郭英姿

（河南科技学院园艺园林学院 新乡453003）

郁金香（Tulipa gesnerianaL.），又名洋荷花、草麝香，属百合科郁金香属多年生鳞茎草本植物，常用于花卉展览、盆栽观赏和鲜切花种植。因其品种繁多、花型优雅高贵、花色丰富等特点深受大众喜爱。随着郁金香种植面积不断扩大，病害普遍发生，危害及其严重[1-3]。由尖孢镰刀菌郁金香专化型（Fusarium oxysporumf. sp.tulipae）引起的种球腐烂病，也称基腐病，是郁金香栽培中最主要的真菌病害之一，在种球贮藏期，发病症状主要表现为种球流胶，淀粉组织分解腐烂，后期呈黄褐色干腐，散发出刺鼻酒糟味，种球难以发根，进而不能发芽；在植株生长期间，发病症状则主要表现为地上部分植株矮小，叶片紫红色至紫褐色，不开花，后期植株枯萎，土壤内种球腐烂[4]。因此，种球腐烂病的发生严重影响郁金香的观赏价值和经济效益。

郁金香种球腐烂病为土传病害，病原菌可随土壤、雨水、种球等传播，防治困难。目前生产上普遍采用农业防治和化学防治[5-6]，但是农业防治效果不佳，而化学防治易使病原菌产生抗药性同时造成环境污染，所以种植抗病品种是防治郁金香种球腐烂病最直接有效的方法。目前我国栽植的郁金香品种80%以上从荷兰进口[7]，而我们对各栽培品种在我国的种球腐烂病的感染与发生情况并不清楚，因此急需了解当前郁金香品种在我国抗种球腐烂病情况。本研究采用改良土壤感病接种法对收集到的27 个郁金香栽培品种进行种球腐烂病抗性鉴定，筛选出对种球腐烂病有较高抗性的郁金香品种，以期为郁金香种球腐烂病防治提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

植物材料：27 个郁金香栽培品种的种球（荷兰进口），分别于2017 年11 月和2018 年11 月购自北京碧溪花卉有限公司。

供试菌株：尖孢镰刀菌郁金香专化型，由河南科技学院园艺园林学院新乡市草花育种重点实验室分离纯化并提供，于马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）上保存备用。

1.2 试验方法

1.2.1 供试菌株活化 将保存的郁金香种球腐烂病菌转接到新鲜配制的PAD 平板上，25℃条件下培养5～7 d，备用。

1.2.2 接种土壤的准备 将草炭土与燕麦 （质量比5∶1）的混合基质，加水搅拌，以手握成团、落地即散为宜，分装到广口玻璃瓶中，每瓶装入3/4 的培养土，不宜过满，用封口膜封好，高压灭菌2 次，每次1 h，取出后冷却备用。

1.2.3 接种与评价方法 接种方法采用改良土壤感病接种法，此方法在唐楠[6]对郁金香抗基腐病的鉴定方法基础上进行了改良。用灭菌后的打孔器在已活化好的种球腐烂病菌培养基外围打孔，打取直径为8 mm 的菌饼，用消过毒的接种针取出菌饼，放入培养土中，每瓶放入10 个菌饼，搅拌菌饼和培养土使其混合均匀，用封口膜封好后放入25℃恒温培养箱培养，待培养土内布满菌丝后取出。挑取健康无病虫的郁金香种球，剥去外层膜质鳞片，用75%的酒精浸泡郁金香种球45 s，倒掉酒精后用无菌水冲洗4～5 次，取出种球放在滤纸上吸干多余水分。将种球放入长满菌丝的培养土中，每瓶放入1 个种球，培养土以覆盖住种球顶部为宜。每个栽培品种处理5 个种球，3 次重复。以接种PDA 培养基的培养土内放入的种球作为对照。瓶身注明郁金香品种名称，封口膜封好后放入25℃恒温培养箱继续培养，培养6 周后观察其感病情况。

1.2.4 病情调查 病情分级标准参考唐楠等[8]的郁金香基腐病的鉴定方法。采用1～5 级标准对各栽培品种处理种球进行分级：1 级——健康（种球干净且坚硬），2 级——轻度感染（病斑≤10%），3 级——中度感染（10%＜病斑≤50%），4 级——重度感染（病斑＞50%，仍有少部分组织完好），5 级——完全腐烂。按下面的公式计算病情指数：病情指数（%）＝［Σ（病级种球数×病级）／（种球数总和×发病最重级）］×100。

1.2.5 抗性分级标准 按样本的平均病情指数划分郁金香栽培品种对病菌的抗性等级： 高抗 （HR）≤20.0，中抗（MR）20.1～50.0；中感（MS）50.1～80.0，高感（HS）≥80。

2 结果与分析

抗性鉴定结果表明（附表），27 个郁金香栽培品种中，‘阿尔玛尼’‘王室女孩’和‘曼顿’的病情指数小于20，为高抗品种；‘黄普瑞斯玛’‘红色印象’‘维肯尼’‘粉色印记’‘金阿帕尔顿’‘紫衣王子’ 的病情指数在20.1～50 之间，为中抗品种；‘维多纳’‘阿帕尔顿精华’‘班雅’‘圣诞颂歌’‘夜皇后’‘重现’‘慕斯卡蒂特’‘米兰达’‘检阅’‘饰边优雅’‘白百合’‘小黑人’‘卡罗拉’的病情指数在50.1～80.0 之间，为中感品种；‘卡奈奥德里’‘泰迪熊’‘黑鹦鹉’‘塔科马山’‘纯金’的病情指数高于80.0，为高感品种。

附表 郁金香不同栽培品种对种球腐烂病的抗性鉴定结果

3 结论与讨论

本研究对27 个郁金香栽培品种的抗腐烂病能力进行了测定，结果表明，供试的品种没有对腐烂病菌免疫的品种，但是不同郁金香栽培品种对尖孢镰刀菌的抗性存在明显差异，其中，高抗品种3 个，中抗品种6 个，中感品种13 个，高感品种5 个。选育和种植抗病品种是减轻病害损失的重要措施，目前国内对于从荷兰进口的郁金香栽培品种抗病性关注较少，因此了解郁金香栽培品种对种球腐烂病的抗性，可以指导品种合理布局，达到减少种球腐烂病发生的目的，在栽培生产过程中可多推广对尖孢镰刀菌抗性强的品种。同时本研究所鉴定的高抗品种，为郁金香杂交育种提供了较好的抗病材料。