189 例新生儿ABO溶血三项试验结果的分析

朱洁好，叶伙梅

（云浮市人民医院输血科，广东 云浮 527300）

新生儿溶血病（HDN）是指母婴血型不合而引起的胎儿或新生儿免疫性溶血性疾病。我国新生儿最常发生HDN 的血型系统是ABO 血型系统[1]，而Rh 血型不合引起的HDN 则因为RH 阴性在人群分布占比低而较少发生[2]。ABO-HDN 常见于O型母亲所生下的A 型或B 型新生儿，一定数量的胎儿红细胞进入母体并刺激母体产生相应的抗体，该抗体通过胎盘进入胎儿引起特异性抗原-抗体反应，从而引发溶血病[3]。ABO-HDN 患儿的临床症状主要表现为贫血、水肿、黄疸、肝脾肿大，严重者可继发核黄疸,可导致永久性神经系统发育障碍甚至危及生命[4]。因此，HDN 的预防和早期诊断则非常重要。溶血病三项检测是诊断HDN 最常用的检测方法, 其检测内容包括直接抗人球蛋白试验（DAT）、血清游离抗体（游离试验）和红细胞释放抗体试验（释放试验）[5]。为了更好地为 HDN 的早诊断早治疗提供依据, 本文通过回顾分析2017 年1月-2018 年12 月我院189 例疑似ABO 溶血病的新生儿溶血病三项试验结果，对其进行统计分析，报告如下。

1 资料与方法

1.1 研究对象 2017 年 1 月-2018 年 12 月云浮市人民医院疑似ABO 新生儿溶血病的189 例血液标本。

1.2 主要试剂及仪器 微柱凝胶血型卡、微柱凝胶抗人球蛋白卡、ID-Diluent2 稀释液及ABO 标准红细胞均由瑞士达亚美公司生产，以上试剂均在有效期内使用。仪器为血型血清学离心机（Centrifuge 12 SⅡ）、孵育器（Incubator 37 SI）、CU600 型电热恒温水箱。北京白洋BY-120A 离心机。

1.3 方法

1.3.1 血型鉴定 采用微柱凝胶法，参照《全国临床检验操作规程》[6]进行新生儿ABO 血型鉴定。

1.3.2 溶血病三项试验 参照 《全国临床检验操作规程》[6]进行溶血病三项试验。

1.3.3 HDN 诊断标准 当新生儿溶血病三项试验中的任意两项阳性或三项均阳性时诊断为HDN阳性, 若只有释放试验单独一项阳性时也诊断为HDN 阳性[7]。

1.3.4 统计学处理 采用 SPSS 26 进行统计分析，计数资料的比较采用χ2检验。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 115例HDN 患儿溶血病三项试验联合检测结果 在189 例疑似HDN 的新生儿标本中,确诊为HDN 有 115 例，阳性率为 60.85%。在 115 例 HDN溶血病三项试验联合检测中, 三项均阳性模式为15 例（13.4%）,游离试验和释放试验阳性模式为63例(54.78%),DAT 和释放试验阳性模式为2 例(1.74%),单独释放试验阳性模式为 35 例（30.43%）。此外，在 115 例 HDN 中，DAT 阳性 17 例（14.78%），游离试验阳性78 例（67.82%），释放试验阳性115例（100%）。见表1。

2.2 不同出生日龄HDN 检出率统计结果 HDN 检出率以出生日龄≤3d 的较高，达 71.01%（98 例）；出生日龄＞3d 的检出率为 33.3%(17 例)，差异有统计学意义（χ2=25.55, P＜0.0001）,见表2。

表1 115 例HDN患儿溶血三项测定模式结果

表2 不同年龄新生儿溶血病患病率[n(%)]

2.3 不同血型新生儿溶血病发生率 189 例疑似HDN 的血型检测结果中，A 型患儿 57 例，阳性率为 77.034%，B 型患儿 58 例，阳性率为 50.43%，A型患儿的患病率明显高于B 型患儿，差异有统计学意义（χ2=13.87,P＜0.0001），见表3。

表3 不同血型新生儿溶血病发生情况[n(%)]

3 讨论

ABO-HDN 是由于母婴ABO 血型不合而发生免疫作用引起的，母体IgG 抗-A 或IgG 抗-B 通过胎盘进入胎儿循环，抗原抗体反应导致红细胞破坏溶血从而导致HDN 的发生[8]。胎儿红细胞溶血后可引起一系列病理变化，包括贫血、水肿、胆汁瘀积、含铁血黄素沉积、出血灶等。溶血病三项试验是HDN 确诊的检测手段，包括DAT、游离试验和释放试验[6]。DAT 试验是检测新生儿红细胞上是否被不完全抗体致敏。游离试验可检测新生儿血清中是否存在能与尚未致敏红细胞结合的不完全抗体，游离抗体的滴度与母体IgG 抗体进入胎儿体内的量有关，对判断观察病情的发展有辅助作用。释放试验通过热放散法把引起红细胞致敏的表面抗体释放到盐水中,再用释放液与标准红细胞试剂反应，是HDN 的确诊试验。在本次回顾性分析中，在 115 例 HDN 阳性患儿中，DAT 阳性检出率（14.78%）较低，表明DAT 阴性不能提示患儿没有溶血病发生；游离试验阳性检出率（67.82%）仅次于释放试验（100%），表明游离试验对于HDN 确诊和疾病严重程度的判断有辅助作用[9]。因此，溶血病三项试验对HDN 的确诊和提示疾病严重程度有重要作用； 同时由于游离抗体相对高的检出率提示对妊娠早期夫妇血型检测和可疑孕妇进行抗体效价检测可以预防HDN 的发生。

新生儿溶血病的一个特征性症状是进行性黄疸增高，在出生后2～5d 出现，易被误诊为生理性黄疸，从而导致HDN 的延误诊断与治疗。本研究发现新生儿的日龄越小，HDN 的检出率越高，≤3d的新生儿检出率达到71.01%，该结果提示婴儿出生3d 内送检可以提高检出率，这与赵建萍等[10]报告一致。因此，对于疑似发生HDN 的新生儿，应尽早采集血标本进行溶血病三项检测。HDN 主要是由O 型母亲的IgG 免疫球蛋白引起的，IgG 免疫球蛋白可以针对新生儿红细胞上携带的A 或B 抗原引起不同程度的HDN。ABO 新生儿溶血病的发生及严重程度，与新生儿细胞A/B 抗原结合位点的表达量、血型物质、胎盘的屏障作用及IgG 亚类的不同有明显相关性[11,12]；同时，母亲体内IgG 抗-A或IgG 抗-B 滴度与HDN 的发生发展关系密切[13]。本研究发现A 型患儿的发病率77.034%明显高于B 型患儿的发病率50.43%, 这与吴淑华及Matteocci A 等[14,15]的报告一致。O-A 母婴模式 HDN 发生率较O-B 母婴模式高可能与血型抗原结合位点有关，因为在血型系统抗原结构上，A 型红细胞抗原结合位点0.81～1.17×106比B 型红细胞抗原结合位点 0.61～0.83×106数量多[16]。因此，需要尽早进行母婴血型检测,并根据母亲与新生儿的血型做出相应的防治措施，从而避免HDN 的发生。

综上所述，溶血病三项试验对HDN 的诊断和治疗有重要意义，在O-A 或O-B 母婴模式中要重视溶血病三项检查；日龄在3d 内的新生儿阳性检出率最高，对于疑似HDN 的患儿应尽早进行溶血病三项检测；O-A 母婴模式较O-B 母婴模式HDN发生率高，因此，应及早进行母婴血型检测，若O型母亲与新生儿血型不相容时,应及早进行溶血病三项检查并做出相应防治措施,避免延误诊疗。