血管性痴呆血清NO、sICAM-1、NLRP3 表达变化及与患者病情、预后关联性

艾敏，高岚

（1.河南省濮阳市人民医院检验科，河南 濮阳 457000； 2.河南省人民医院检验科，河南 郑州 450000）

脑血管性痴呆（Vascular dementia，VD）主要因脑血管因素致使脑组织损伤而引起，研究指出，在中国VD 的发病率为1.1%～3.0%，且呈现出逐渐升高趋势[1]。早期明确该病发病机制并据此进行针对性干预有利于延缓病程进展，提升患者生活质量。有关研究发现，血管内皮损伤、炎症反应于痴呆发生、发展中扮演着重要角色[2,3]。一氧化氮（NO）属血管内皮活性物质，含量与血管内皮功能状况密切相关。可溶性细胞间黏附分子-1（sICAM-1）为内皮细胞遭受刺激时释放的炎性因子，可反映炎症反应状况，且与脑损伤密切相关[4]。核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（NLRP3）属人体内重要蛋白质，含量与机体炎症反应有关[5]。但目前临床关于 VD 患者血清 NO、sICAM-1、NLRP3 含量及其与患者病情、预后关系的研究报道尚较为鲜见，本研究对其进行分析，报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取 2017 年 10 月-2019 年 10 月我院94 例VD 患者为病例组，同期94 例健康体检者为对照组。纳入标准:⑴病例组符合《神经病学》[6]中VD 有关诊断标准，存在脑血管病变证据，病情稳定，MMSE 评分≤24 分； ⑵对照组为健康体检者；⑶2 组文化程度均在中学及以上，知晓本研究，签订知情同意书。排除标准：⑴合并严重抑郁症；⑵存在明显自残或自杀倾向；⑶合并肝、肺、肾等脏器功能严重障碍； ⑷合并恶性肿瘤、 急慢性感染；⑸合并其他影响血管内皮功能、炎症因子指标表达疾病； ⑹因其他非脑血管原因导致认知功能障碍。其中病例组男 51 例，女 43 例；年龄 47～84岁，平均 62.90±7.06 岁；病程 3～12 年，平均 6.19±1.25 年；吸烟 25 例，饮酒 22 例，肥胖 13 例；合并高脂血症32 例，糖尿病20 例，冠心病21 例，高血压 44 例； 简易精神状态量表 （MMSE） 评分 6～24分，平均 13.28±4.19 分。对照组男 49 例，女 45 例；年龄 47～83 岁，平均 63.47±6.82 岁；吸烟 22 例，饮酒 20 例，肥胖 12 例。2 组一般资料（性别、年龄与吸烟、饮酒、肥胖人数比例等）均衡可比（P＞0.05）。本研究经我院伦理委员会同意。

1.2 方法 采集所有受试者5ml 清晨空腹（禁食12 h）静脉血样，3000r/min 离心 10 min 取血清，以酶联免疫吸附法测定血清NO、sICAM-1、NLRP3 含量，检测试剂盒均购于南京建成生物工程研究所，有关操作严格按试剂盒说明书进行。

1.3 观察指标 ⑴病例组、 对照组血清 NO、sICAM-1、NLRP3 含量。⑵病例组不同病情评分（MMSE）患者血清各指标含量，病情程度应用简易精神状态量表（MMSE）评价，分值范围 0～30 分，分值越高认知功能越好。⑶血清各指标与VD 患者MMSE 评分关联性。⑷出院后对病例组患者采取6个月随访，参考日常生活活动能力量表（ADL）标准评估患者预后状况，总分100 分，分值越高预后状况越好，ADL 评分 61～99 为Ⅰ级（轻度）预后功能障碍，41～60 分为Ⅱ级（中度）预后功能障碍，≤40为Ⅲ级（重度）预后功能障碍[7]；对比病例组不同预后患者一般资料与血清各指标含量。⑸观察VD 患者预后功能障碍分级Ⅲ级的有关影响因素。⑹分析血清各指标对VD 患者预后功能障碍分级Ⅲ级预测意义。

1.4 统计学分析 研究数据应用SPSS22.0 软件进行统计学分析,计量资料以均数±标准差(±s)表示，多组间比较应用单因素方差分析，两两比较采用SNK-q 检验，两组间比较应用独立样本t 检验；计数资料以例（%）表示，采用χ2检验；相关性应用Pearson 相关分析； 影响因素应用Logistic 回归分析；预测价值应用ROC 曲线分析，获得曲线下面积（AUC）、置信区间、特异度、敏感度与截断值，不同预测方案间AUC 比较应用DeLong 检验，联合诊断采取Logistic 二元回归拟合，返回预测概率logit(p)，将其作为独立检验变量；P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 2 组血清 NO、sICAM-1、NLRP3 含量 病例组血清 NO 含量低于对照组，sICAM-1、NLRP3 含量高于对照组（P＜0.05）。见表1。

表1 2 组血清 NO、sICAM-1、NLRP3 含量对比(±s)

表1 2 组血清 NO、sICAM-1、NLRP3 含量对比(±s)

组别 例数病例组对照组94 94 t P NO（μmol/L） sICAM-1（ng/L）49.58±7.26 94.23±13.48 28.274＜0.001 432.37±108.69 319.56±93.74 7.620＜0.001 NLRP3 相对表达量8.13±1.04 1.07±0.21 64.515＜0.001

2.2 病例组不同病情评分患者血清各指标水平依据病例组MMSE 评分情况，将患者分为MMSE评分＜10 分、处于 10～19 分、处于 20～24 分 3 类患者。经检验显示，随患者MMSE 评分降低其血清NO 含量逐渐降低，sICAM-1、NLRP3 含量逐渐增高（P＜0.05）。见表2。

表2 病例组不同病情评分患者血清各指标水平对比(±s)

表2 病例组不同病情评分患者血清各指标水平对比(±s)

组别 例数20～24 分10～19 分＜10 分24 41 29 F P NO（μmol/L） sICAM-1（ng/L）64.95±8.02 47.53±7.19 39.76±6.30 84.373＜0.001 350.52±102.94 428.03±106.12 506.24±114.76 13.690＜0.001 NLRP3 相对表达量5.63±0.96 8.07±1.04 10.28±1.35 11.967＜0.001

2.3 血清各指标与 VD 患者 MMSE 评分关系Pearson 相关性分析可知，VD 患者血清 NO （r=0.607、P＜0.001）含量与 MMSE 评分呈显著正相关，sICAM-1（r=-0.763、P＜0.001）、NLRP3(r=-0.611、P＜0.001)含量与MMSE 评分呈显著负相关。见图1。

图1 血清各指标与VD患者MMSE评分关系

2.4 病例组不同预后患者一般资料与血清各指标水平 经随访，无脱落病例。病例组不同预后患者年龄、性别、吸烟、饮酒、肥胖人数比例、合并症等一般资料相比，差异无统计学意义（P＞0.05），预后功能障碍分级Ⅲ级患者MMSE 评分与血清NO 含量低于预后功能障碍分级Ⅰ～Ⅱ级，sICAM-1、NLRP3 含量高于预后功能障碍分级Ⅰ～Ⅱ级 （P＜0.05）。见表3。

2.5 VD 患者预后功能障碍分级Ⅲ级的有关影响因素分析 以VD 患者预后功能障碍分级是否为Ⅲ级作为因变量，患者一般资料、血清NO、sICAM-1、NLRP3 为自变量，采取 Logistic 回归分析显示MMSE 评分、血清NO 为VD 患者预后功能障碍分级Ⅲ级重要保护因素，血清sICAM-1、NLRP3 为VD 患者预后功能障碍分级Ⅲ级重要危险因素（P＜0.05）。见表4。

表3 病例组不同预后患者一般资料与血清各指标水平对比

表4 VD患者预后功能障碍分级Ⅲ级的有关影响因素分析

2.6 血清各指标对VD 患者预后功能障碍分级Ⅲ级预测意义 血清NO、sICAM-1、NLRP3 联合预测VD 患者预后功能障碍分级Ⅲ级AUC 高于单一指标预测，联合预测时特异度为90.67%、 敏感度为73.68%。见表5、图2。

图2 血清各指标对VD患者预后功能障碍分级Ⅲ级预测ROC

3 讨论

VD 发病机制较复杂，但近期研究认为可能与机体炎症反应、 血管内皮细胞损伤等相互作用具有密切关系[8,9]。NO 为可调节血管源性舒张因子，能起到促进血管舒张、抑制炎症产生等作用[10]。本研究发现，VD 患者血清NO 水平偏低，且与患者MMSE 评分呈正相关。提示血清NO 在VD 发病及病情进展中具有重要作用。VD 患者常会出现脑白质病变，致使血液循环内非对称二甲基精氨酸水平增高，降低脑动脉NO 依赖性血管舒张功能，造成血管僵硬度提高，NO 水平降低。有关研究也报道，VD 患者NO 出现生成与释放障碍或者活性降低时，会造成血管收缩与血压增高[11]。而研究证实，高血压为脑血管疾病产生认知功能障碍的重要危险因素[12]。本研究发现，预后功能障碍分级Ⅲ级VD患者血清NO 含量偏低，且回归分析仍显示，血清NO 为VD 患者预后功能障碍分级Ⅲ级重要保护因素。表明血清NO 含量与VD 患者预后有关，通过测定其含量可能为患者预后预测提供一定参考。

表5 血清各指标对VD患者预后功能障碍分级Ⅲ级预测意义

sICAM-1 含量高低可反映内皮细胞活化与损伤状况，张琳等[13]研究报道，sICAM-1 可介导氧化应激反应，降低活性氮利用度，致使血管内皮细胞再生能力受损，从而造成脑内循环障碍与脑灌注损伤。本研究发现，VD 患者血清sICAM-1 含量增高，且增高程度与患者认知功能受损程度、预后有关。分析机制可能为ICAM-1 为免疫球蛋白超家族中一员，在正常生理状态下，处于低表达状态，当机体出现炎症反应或内皮细胞受损时,其可由内皮细胞释放并侵入血液循环，致使组织ICAM-1 与血清 sICAM-1 含量增高。同时，血清 sICAM-1 含量越高，机体炎症因子水平越高，斑块稳定性越差，可能会加剧脑血管病病情与发作频率,加重认知功能损伤，影响患者预后[14]。

NLRP3 为NLRP3 基因所编码蛋白质，本研究发现，VD 患者血清NLRP3 水平明显增高，且与患者认知功能损伤程度、 预后有关。推测原因在于NLRP3 可和半胱天冬酶及凋亡相关微粒蛋白一同组成NLRP3 炎症小体，促进促炎蛋白酶活化，提高C 反应蛋白、白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α 等多种炎性因子水平,经由相关信号通路介导炎症瀑布反应,进而加重局部炎症反应，引起神经细胞凋亡，致使VD 发病及病情进展，影响预后状况[15]。本研究绘制ROC 曲线发现，采用血清NO、sICAM-1、NLRP3 联合预测VD 患者预后功能障碍分级Ⅲ级的AUC 高于单一指标。提示应用血清各指标联合预测可为VD 患者预后预测提供更多参考信息，提高预测效能。

综上所述，VD 患者血清 NO、sICAM-1、NLRP3表达与患者病情、预后有关，可为临床诊治提供一定参考。参考文献

目前，国内外对湖泊沉积物污染状况的评价尚缺乏统一的评价方法和标准，本研究采用综合污染指数法和有机污染指数法评价洞庭湖表层沉积物的污染状况，这两种方法常被用于湖泊沉积物污染评价研究。

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