舌下腺囊肿D-D、IL-6、MMP-2表达及临床意义

张启红 李春杨 营栋

舌下腺囊肿为口腔颌面外科涎腺疾病中常见类型，部分囊肿可经口底组织突入颌下表现为颌颈部或颌下肿块，易导致误诊误治发生［1-2］。既往研究显示，D-二聚体（D-dimer，D-D）与口腔颌面部间隙感染的发生、发展具有相关性，监测D-D 水平可辅助临床诊断口腔颌面部间隙感染，评估疾病预后［3］。基质金属蛋白酶-2（Matrix metalloproteinase-2，MMP-2）已被证实同与涎腺腺样囊性癌浸润生长有关，对肿瘤生长、浸润具有促进作用［4］。白介素-6（Interleukin-6，IL-6）为机体炎症反应重要介质，在口腔鳞癌患者中呈高表达水平［5］。而三者是否同舌下腺囊肿发生发展具有相关性，尚未见有研究报道。基于此，本研究首次探讨舌下腺囊肿D-D、IL-6、MMP-2 表达及临床意义。分析如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2015年10月至2020年10月本院104 例舌下腺囊肿患者作为观察组，另选取40 例健康体检者作为对照组。对照组男19 例，女21 例，平均年龄（34.70±7.36）岁；观察组男46 例，女58 例，平均年龄（33.69±7.95）岁；囊肿直径0.5～3.2 cm，平均（18.71±5.03）cm。两组性别、年龄等比较差异无统计学意义（P＞0.05）。

纳入标准：①术前穿刺检查以及术后病理确诊为舌下腺囊肿［5］；②无血栓及出血性疾病；③患者或家属知情本研究并签署同意书；④无麻醉禁忌者。排除标准：①年龄较小无法配合麻醉；②长期应用激素药物者；③术前存在感染者；④颈部、头面部放疗史；⑤伴有严重口腔溃疡者；⑥不符合舌下腺及囊肿切除术手术指征者。本实验经医院伦理委员会批准。

1.2 方法

①基线资料：收集所有入组研究对象性别、年龄、体质量指数（BMI）、病程、囊肿直径、病变类型、吸烟及饮酒情况等临床资料。②手术治疗：研究对象均接受舌下腺及囊肿切除术治疗。协助患者取半卧位，依照病情程度选择局部或全身麻醉；选择口内入路方式，沿囊肿表面轻柔切开口底黏膜组织，切口同下颌舌侧牙龈平衡，贯穿囊肿前后缘，注意保持囊壁完整；钝性分离黏膜，剥离周围腺体及囊壁，探明舌神经，完整摘除舌下腺及囊肿，结扎断端；止血、冲洗术野后缝合。③实验室检查：分别于术前、术后7 d 采集患者静脉血5 mL，以转速2 000 rpm 离心20 min，取血清，保存于-20℃环境中。采用酶联免疫吸附法测定IL-6水平，采用免疫比浊法测定D-D 水平，采用免疫组化法检测MMP-2 水平。④复发标准：术后半年内，X 线曲面断层检查见手术部位组织呈分叶状外形，经穿刺内容物检查抽出浅红色黏稠液。

1.3 观察指标

①比较两组D-D、IL-6、MMP-2 水平。②分析D-D、IL-6、MMP-2 与舌下腺囊肿的关系。③分析舌下腺囊肿患者D-D、IL-6、MMP-2 水平的相关性。④比较术后半年内，复发与未复发患者手术前后D-D、IL-6、MMP-2 水平。⑤分析舌下腺囊肿术后复发影响因素。⑥D-D、IL-6、MMP-2 对舌下腺囊肿术后复发的预测价值。

1.4 统计学分析

采用SPSS 22.0 软件进行数据处理，计数资料以n（%）描述，采用χ2检验，计量资料以（±s）描述，两组间比较用t检验，舌下腺囊肿术后复发影响因素通过Logistic 进行多因素回归分析，D-D、IL-6、MMP-2 对舌下腺囊肿术后复发的预测效能分析采用受试者工作特征（ROC）曲线，不同预测方案间曲线下面积比较采用DeLong 检验。以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组D-D、IL-6、MMP-2 水平比较

观察组D-D、IL-6、MMP-2 水平高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 两组D-D、IL-6、MMP-2 水平比较（±s）Table 1 Comparison of the levels of D-D，IL-6 and MMP-2 between 2 groups（±s）

表1 两组D-D、IL-6、MMP-2 水平比较（±s）Table 1 Comparison of the levels of D-D，IL-6 and MMP-2 between 2 groups（±s）

组别观察组对照组t 值P 值n 104 40 D-D（mg/L）0.63±0.27 0.45±0.20 3.828＜0.001 IL-6（ng/L）14.85±3.26 10.41±2.94 7.516＜0.001 MMP-2 356.94±87.24 214.87±50.69 9.677＜0.001

2.2 D-D、IL-6、MMP-2 与舌下腺囊肿的相关性

以舌下腺囊肿发生与否作为因变量（未发生=0，发生=1），将D-D、IL-6、MMP-2 纳入Logistic 回归方程，分析可知，舌下腺囊肿患者D-D 与IL-6、MMP-2 水平呈正相关关系，IL-6 与MMP-2 水平呈正相关关系（r=0.814，0.693，0.779，P＜0.05）。见表2、图1。

表2 D-D、IL-6、MMP-2 与舌下腺囊肿的关系Table 2 The relationship between D-D，IL-6，MMP-2 and sublingual gland cyst

图1 舌下腺囊肿患者D-D、IL-6、MMP-2 水平的相关性Figure 1 The correlation of D-D，IL-6 and MMP-2 levels in patients with sublingual gland cysts

2.3 复发与未复发患者临床资料及手术前后D-D、IL-6、MMP-2 水平比较

复发与未复发患者病程、囊肿直径、吸烟及饮酒率相比，差异有统计学意义（P＜0.05）；复发患者术前、术后7 d D-D、IL-6、MMP-2 水平均高于未复发患者，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

表3 复发与未复发患者临床资料及手术前后D-D、IL-6、MMP-2 水平比较（±s）Table 3 Clinical data of relapsed and non-relapsed patients and comparison of D-D，IL-6 and MMP-2 levels before and after surgery（±s）

表3 复发与未复发患者临床资料及手术前后D-D、IL-6、MMP-2 水平比较（±s）Table 3 Clinical data of relapsed and non-relapsed patients and comparison of D-D，IL-6 and MMP-2 levels before and after surgery（±s）

指标性别χ2/t 值P 值男女0.0420.837年龄0.0140.906 BMI 0.0390.845病程5.0290.025囊肿直径5.8910.015病变类型≤18 岁＞18 岁≤23 kg/m2＞23 kg/m2≤3 个月＞3 个月≤3 cm＞3 cm单纯型口外型哑铃型0.3580.720吸烟6.0440.014饮酒D-D（mg/L）是否是否术前IL-6（ng/L）MMP-2（ng/mL）术后7 d术前术后7 d术前术后7 d复发（n=15）7（46.67）8（53.33）8（53.33）7（46.67）10（66.67）5（33.33）5（33.33）10（66.67）5（33.33）10（66.67）12（80.00）1（6.67）2（13.33）9（60.00）6（40.00）10（66.67）5（33.33）0.69±0.12 0.58±0.19 15.92±2.04 14.07±2.92 372.14±20.15 302.84±70.39未复发（n=89）39（43.82）50（56.18）46（51.69）43（48.31）57（64.04）32（35.96）57（64.04）32（35.96）59（66.29）30（3371）76（85.39）6（6.74）7（7.87）22（24.72）67（75.28）27（30.34）62（69.66）0.62±0.10 0.47±0.16 14.67±1.78 11.23±2.84 354.38±18.26 236.19±67.14 7.392 2.436 2.397 2.464 3.569 3.434 3.523 0.007 0.017 0.018 0.015 0.001 0.001 0.001

2.4 舌下腺囊肿术后复发影响因素分析

以舌下腺囊肿术后复发与否作为因变量（未复发=0，复发=1），将表3、表4中差异有统计学意义的指标纳入Logistic 回归方程，分析可知，病程、囊肿直径、吸烟、饮酒、手术前后D-D、IL-6、MMP-2均为舌下腺囊肿复发影响因素（P＜0.05）。见表4。

表4 舌下腺囊肿术后复发影响因素分析Table 4 Analysis of influencing factors for postoperative recurrence of sublingual gland cyst

2.5 D-D、IL-6、MMP-2 对舌下腺囊肿术后复发的预测价值

ROC 曲线显示AUC 值：术后7 d D-D、IL-6、MMP-2 均＞术前，且术后7 d 联合预测价值更高，AUC 为0.941，最佳敏感度、特异度分别为87.12%、95.51%。见图2、表5。

图2 不同时期ROC 曲线Figure 2 ROC curve in different periods

3 讨论

本研究发现，舌下腺囊肿患者血清MMP-2 处于显著高表达状态，提示其可能在舌下腺囊肿发生过程中发挥正向调节作用。基底膜为舌下腺囊肿发生过程中必须克服的生理屏障，MMP-2 通过降解舌下腺体细胞外基质成分，以及原血管基底膜，促进舌下腺体淋巴管及血管结构发育，进而有助于舌下腺体组织中血管生长，形成舌下腺囊肿。本研究还发现，MMP-2 与舌下腺囊肿有关，在舌下腺囊肿的发生过程中发挥促进作用。

表5 D-D、IL-6、MMP-2 对舌下腺囊肿术后复发的预测价值Table 5 The predictive value of D-D,IL-6,and MMP-2 for postoperative recurrence of sublingual gland cyst

IL-6 主要在组织细胞胞浆中表达，推测舌下腺囊肿患者血清IL-6 水平升高原因，可能是病毒侵袭感染，致使机体细胞因子网络失调，IL-6 表达水平发生改变，随着IL-6 浓度增加，引发局部炎症反应，对组织细胞损伤发挥介导作用，诱导细胞分化增殖，导致舌下腺开口阻塞，分泌物潴留［6-7］。陈丹丹等［8］报道显示，卵巢异位囊肿患者IL-6 水平升高，可刺激T、B 淋巴细胞发生增殖与分化，致使盆腔局部纤维化、粘连，认为炎症在囊肿发生、发展中具有重要作用，同本研究结果具有相似性，均认为血清IL-6 水平升高为舌下腺囊肿发生危险因素。

D-D 为交联纤维蛋白于纤溶酶作用下裂解产生的分子标志物，其水平异常升高，代表机体继发纤溶亢进，该状态可为瘤体生长创造有利条件［9］。作者推测舌下腺囊肿患者血清D-D 水平较高原因，舌下腺囊肿可能激活机体凝血系统，导致血小板活性增加、血管内皮细胞损伤，以及纤溶蛋白溶解异常，舌下腺囊肿状态下机体血管内活化血栓形成及纤维溶解活动，可致使D-D 水平升高。

目前，舌下腺及囊肿切除术为临床治疗舌下腺囊肿最直接有效的方法，在控制疾病进展、改善患者预后方面具有重要作用［10-11］。但也可能因舌下腺腺体组织残留、术后瘢痕愈合等导致舌下腺囊肿复发，本研究发现，舌下腺囊肿患者经舌下腺及囊肿切除术术后仍存在一定早期复发率。本研究发现各指标均具有良好预测效能，且术后7 d D-D、IL-6、MMP-2 的AUC＞术前，其原因可能在于术后7 d与复发时间间隔更短，可较为准确地反映舌下腺囊肿组织病理变化情况，进而提高预测效能。

综上，舌下腺囊肿患者D-D、IL-6、MMP-2 水平呈高表达，各指标变化同舌下腺囊肿发生具有相关性，可为术后复发情况提供有效参考。