补肾活血方对少弱畸精症患者精子DNA完整率及体外受精效果的影响

郑敏华 谢福贤 高宇琳

1.广东省东莞市妇幼保健院生殖遗传研究所，广东东莞 523000；2.广东省东莞市妇幼保健院男科，广东东莞 523000

男性不育症是指夫妻同居1年以上，未避孕，由于男性原因造成女方不孕，约占总不孕不育比例的30%～40%，其中以精液异常最为常见[1-2]，其中少弱畸精症就是其中一种造成男性不育的生殖系统疾病，该病病因较为复杂，有研究表明，其与精子DNA完整率密切相关[3-4]。中医认为少弱畸精症大多是由于先天不足，禀赋薄弱，肾阳亏损，命火衰微而致脉浮弱而涩，造成气血不畅，精气清冷。补肾活血方由桂枝茯苓丸合五子衍宗丸加减而成，可化血通瘀，补肾益精共成生精助育之功[5]。为了改善精子质量，提供优秀的精子，助少弱畸精症患者受孕成功，通过前瞻性研究，本研究在左卡尼汀治疗的基础上，结合中医理论，给予患者补肾活血方，观察补肾活血方对少弱畸精症患者精子DNA完整率及体外受精结局的影响，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2016年11月至2019年5月于广东省东莞市妇幼保健院（我院）接受治疗的少弱畸精症患者70例，随机分为对照组（n=35）和观察组（n=35），对照组患者年龄26～43岁，平均（36.2±3.4）岁；病程2～6年，平均（4.48±1.76）年；平均睾酮（16.74±2.19）nmol/L；观察组患者年龄25～43岁，平均（35.7±3.1）岁；病程 2～ 6年，平均病程（4.11±2.20）年；平均睾酮（17.37±2.36）nmol/L。两组一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究经我院医学伦理委员会批准，患者均已签署知情同意书。

1.2 纳入及排除标准

纳入标准[6-7]：同时符合临床对少弱畸精症的诊断标准，即畸形精子症、少精症和弱精症的诊断标准，且在3个月治疗后接受体外受精助孕者。

排除标准：男方伴侣基础性激素检查、卵巢功能及输卵管异常者；存在染色体缺失、AZF基因异常者；合并精索静脉曲张、生殖系统感染、慢性前列腺炎症等引起的少弱畸精症者；长期服用药物影响精液质量者。

1.3 方法

对照组患者给予口服左卡尼汀口服液（东北制药集团沈阳第一制药有限公司，国药准字H19990372），用餐时服用，1 支 /次，3 次 / d，持续服药25 d，休息5 d。观察组服用根据补肾活血方制成的蜜丸，9 g/丸，早晚各服1丸，连续服药25 d，休息5 d。两组患者均连续治疗3个月。补肾活血基本方如下：茯苓10 g，桂枝10 g，桃仁10 g，丹皮10 g，蜂房10 g，赤芍10 g，菟丝子15 g，水蛭10 g，淫羊藿15 g，车前子10 g，枸杞子15 g。兼脾虚者加黄芪20 g，党参10 g；兼湿热者加薏苡仁30 g，黄柏10 g；气滞甚者加枳壳15 g，柴胡10 g。

1.4 观察指标

使用精子自动分析系统，观察并对比两组患者的精液质量，包括精液常规指标[4-5]：精子浓度、精子活率、前向运动精子数（PR）；使用SCD法检测精子DNA碎片指数（DNA fragmentation index，DFI），试剂盒购自安科生物股份有限公司。比较分析两组患者体外受精情况[1]，包括受精率、卵裂率和优胚率，受精率=（受精卵数/总卵数）×100%，卵裂率=（受精卵裂胚胎数/受精卵数）×100%，优胚率=（优质胚胎数/正常受精卵裂胚胎数）×100%；跟踪随访自伴侣移植胚胎1年内两组患者妊娠结局。

1.5 统计学分析

2 结果

2.1 两组患者精液质量比较

治疗前，两组治疗前精子浓度、精子活率、PR、DFI比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；治疗后，两组患者的精子浓度、精子活率、PR数明显高于治疗前，DFI比率明显低于治疗前，差异有统计学意义（P＜0.05），且观察组患者精子浓度、精子活率、PR数高于对照组，DFI比率低于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 两组患者精液质量比较（）

表1 两组患者精液质量比较（）

组别 n 精子浓度（×106/ml） 精子活率（%）治疗前 治疗后 t值 P值 治疗前 治疗后 t值 P值观察组 35 11.43±4.37 52.20±7.44 27.954 0.000 31.53±7.62 56.50±9.29 12.295 0.000对照组 35 12.13±4.08 40.38±6.70 9.993 0.000 30.96±7.31 51.34±9.42 10.112 0.000 t值 0.693 15.847 0.319 2.307 P值 0.491 0.000 0.750 0.024组别 n PR（×106个） DFI（%）治疗前 治疗后 t值 P值 治疗前 治疗后 t值 P值观察组 35 8.48±2.73 21.80±5.50 12.833 0.000 20.52±2.16 14.36±3.60 8.680 0.000对照组 35 8.29±2.17 15.26±4.21 8.706 0.000 21.38±2.22 18.29±2.79 5.127 0.000 t值 0.322 5.586 1.643 5.105 P值 0.748 0.000 0.105 0.000

2.2 两组患者体外受精情况比较

观察组患者体外受精的受精率、卵裂率与对照组比较，差异无统计学意义（P＞0.05），优胚率高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 两组患者体外受精情况比较（，%）

表2 两组患者体外受精情况比较（，%）

组别 n 受精率 卵裂率 优胚率观察组 35 88.77±9.45 89.90±12.47 49.88±6.78对照组 35 85.43±10.91 87.00±11.59 45.71±6.03 t值 1.369 1.008 2.719 P值 0.176 0.317 0.008

2.3 两组患者伴侣妊娠结局比较

随访期间发现观察组17例患者伴侣妊娠，2例流产，对照组14例患者伴侣妊娠，其中4例流产。观察组妊娠率为48.57%（17/35）、流产率为11.76%（2/17），对照组妊娠率为 40.00%（14/35）、流产率为28.57%（4/14），与对照组比较，观察组妊娠率较高，流产率较低，两组妊娠率比较差异无统计学意义（χ2=0.512，P=0.470），两组流产率比较经Fisher精确检验差异无统计学意义（P=0.370＞0.05）。

3 讨论

男性不育症一直是男科领域中的重要议题，病因复杂，发病率逐年升高，病因大多是由精液异常引起的[8]。精子质量是衡量男性生育能力的一个重要指标，而对于一部分少弱畸精症患者来说，单纯依靠药物治疗仍然无法做到自然妊娠，必须依靠人工生育技术才能达到妊娠目的。然而不管是人工授精，还是体外受精～胚胎移植技术，都需要对精子进行筛选，分离出精子活力、形态更好的优质精子[9-10]。补肾活血方是由桂枝茯苓丸合五子衍宗丸加减而成，桂枝茯苓丸是活血化瘀的名方，原本是用于女性宿有癥瘕、妊娠漏下的方剂，由桂枝、茯苓、丹皮、芍药、桃仁组成，方中桂枝温通经脉，芍药疏肝安脾，桂枝、白芍相配调和营卫、通畅血脉；桃仁破瘀消癥，丹皮化瘀清热，茯苓健脾渗湿，共同达到祛瘀生新、利水渗湿的功能[11-12]。也可用于瘀血阻滞所致的男性疾病，如精索静脉曲张、慢性前列腺炎、前列腺增生、免疫性不育等[13]。五子衍宗丸亦是著名的补肾良方，对男性不育症疗效甚佳，被誉为“古今种子第一方”，有“五子壮阳、六味滋阴”之说。由枸杞子、菟丝子、覆盆子、五味子、车前子五味药组成。方中菟丝子、枸杞子补肾精，壮阳道，助精神；覆盆子养真阴，固精关，起阳痿；五味子补肾水，益肺气，止遗泄；车前子利小便，与其他四子相配，补中寓泻，补而不腻[14-15]。此两方诸药合理加减，相配成方，共成补肾化瘀、生精助育之功。

本研究结果显示，治疗后，观察组患者精液质量指标（精子浓度、精子活率、PR数）均明显高于对照组，且DFI比率低于对照组，提示补肾活血方可大大提高少弱畸精症患者的精子质量及精子DNA完整率。根据体外受精情况来进行比较，观察组患者的优胚率也明显高于对照组。吕小洽[16]的研究结果与本研究相近，认为可能与补肾活血方改善患者的精液质量有关，因为补肾活血方可能有助于精子直线运动速度的提高，增强精子的活力，改善精子低渗透膨胀率，提高精子顶体酶活性，其详细机制还有待进一步研究。另外，随访期间观察组患者伴侣的妊娠率、流产率与对照组差异无统计学意义，这可能因本研究纳入病例相对较少，补肾活血方对妊娠最终结局的影响还需要扩大样本量进一步分析，此不足也将在下一步研究过程中加以改进和完善。

综上所述，补肾活血方能改善少弱畸精症患者精子质量，提高精子DNA完整率对体外受精效果有一定的促进作用，具有较高的临床价值。