血清Galectin-3水平与糖尿病足介入治疗预后的关系＊

王育强，卢兰涛，谷顺通

（天津市第五中心医院，天津300450）

糖尿病患者由于周围神经病变及外周血管疾病合并过度机械压力，造成患者足部与骨关节畸形或严重破坏，易出现糖尿病足。有数据表明，糖尿病病程＞10年的患者中＞50%患者伴下肢动脉硬化闭塞性疾病，高达20%患者出现足部溃疡，严重时需接受截肢手术[1]。由于糖尿病足会引起不同程度的血管狭窄或者闭塞，致使下肢或者足部血供减少，极易发生感染，形成溃疡，加重足部深部组织的破坏，最终导致截趾或截肢，因此早期评估糖尿病足病情程度对积极治疗、改善预后具有重要意义。有研究认为，血清Galectin-3（Gal-3）可诱导细胞增殖与凋亡，并介导细胞趋化与黏附等过程，参与动脉粥样硬化病理过程[2]。有动物实验发现，糖尿病大鼠的血清Gal-3 呈异常高表达，且血清Gal-3 水平较高者发生并发症风险更高[3]。本研究通过分析糖尿病足患者血清Gal-3 表达水平，探讨其与预后的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2016年3月—2018年12月天津市第五中心医院收治的糖尿病足患者80 例。其中，男性47 例，女性33 例；年龄42～68 岁，平均（58.15±6.27） 岁；溃疡面积1.51 cm×2.23 cm～6.98 cm×7.85 cm，平均（42.11±10.23）cm2；病程3～14年，平均（9.15±2.09）年。本研究获得医院伦理委员会批准。纳入标准：①确诊为糖尿病足患者；②年龄＞40 岁；③患者脚踝以下部位出现甲沟炎、化脓性关节炎、脓肿、骨髓炎等感染现象；④签署知情同意书。排除标准：①溃疡癌变患者；②近期接受过或正在接受免疫治疗者；③合并恶性肿瘤者；④近3 个月内接受过大型手术者；⑤合并甲状腺癌、甲状腺结节等甲状腺疾病者；⑥除足部外其他部位存在感染、炎症者。

1.2 方法

1.2.1 介入治疗使用Seldinger 穿刺技术，于患者健侧股动脉穿刺，在血管造影引导下行分段血管远端造影，不同病变部位使用不同型号球囊进行扩张，使用4～6 mm 球囊对股浅动脉进行扩张，同时使用直径＜4 mm 的球囊对腘动脉及以下动脉持续扩张180 s。术后进行抗感染、控制血糖等常规治疗，6 个月后行数字减影血管造影（digital subtraction angiography, DSA），并将患者分为再狭窄组与非狭窄组，分别有35 例和45 例。血管造影设备为德国西门子公司的ArtisZeefloor 型DSA 设备。

1.2.2 血清Gal-3水平检测清晨采集患者空腹肘静脉血5 ml，静置30 min，1 000 r/min 离心15 min，取上层血清，放置于-80℃环境中待用。使用酶联免疫吸附法测定血清Gal-3水平，严格按试剂盒（ZK-H1734，深圳子科生物科技有限公司）说明书操作。

1.2.3 炎症指标检测于治疗前采集患者肘静脉血5 ml，3 000 r/min 离心10 min，分离血清，使用免疫比浊法检测血清C 反应蛋白（C-reactive protein, CRP）水平，使用酶联免疫吸附法测定血清降钙素原（Procalcitonin, PCT）水平，使用血液检测仪测定白细胞计数（white blood cell, WBC）。检测试剂盒购自上海广锐生物科技有限公司。

1.3 观察指标

1.3.1 预后评估术后6 个月采用DSA 评估患者介入疗效。血管再狭窄：与远端正常血管相比支架内再狭窄程度＞50%或支架边缘5 mm 内狭窄程度＞50%。

1.3.2 糖尿病足介入治疗预后的影响因素比较两组患者的一般资料，包括性别、年龄、病程、溃疡平均面积、WBC、CRP、PCT、Gal-3、Wagner 分级、骨髓炎、肢体缺血、既往溃疡史。

1.4 统计学方法

数据分析采用SPSS 19.0 统计软件，计量资料以均数±标准差（±s）表示，比较用t检验；计数资料以率（%）或构成比表示，比较用χ2检验；糖尿病足介入治疗后血管再狭窄的影响因素采用多因素Logistic 回归分析；绘制ROC 曲线分析血清Gal-3预测糖尿病足介入治疗后再狭窄的价值，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者临床资料比较

两组患者性别、年龄、病程、溃疡面积、既往溃疡史比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。两组患者Gal-3、WBC、CRP、PCT 水平比较，差异有统计学意义（P＜0.05），再狭窄组较非狭窄组高。两组患者Wagner 分级3 级、无骨髓炎、无肢体缺血的占比比较，差异有统计学意义（P＜0.05），再狭窄组较非狭窄组高。见表1。

表1 两组患者临床资料比较

2.2 糖尿病足介入治疗预后的多因素Logistic 回归分析结果

以术后6 个月经DSA 证实再狭窄作为因变量（再狭窄=1，非狭窄=0），将Wagner 分级（3 级=1，1、2 级=0）、骨髓炎（有=1，无=0）、肢体缺血（有=1，无=0）、WBC、CRP、PCT 及Gal-3 作为自变量，进行多因素Logistic 回归分析。结果证实，Wagner 分级、肢体缺血、CRP、PCT、Gal-3 是糖尿病足介入治疗后血管再狭窄的影响因素（P＜0.05）。见表2。

表2 糖尿病足介入治疗预后的多因素Logistic回归分析参数

2.3 血清Gal-3 预测糖尿病足介入治疗预后的ROC曲线

以介入治疗后血管再狭窄为终点时间，血清Gal-3 为自变量，通过ROC 曲线分析其对糖尿病足介入治疗预后的判断价值。结果显示，ROC 曲线下面积为0.885（95% CI：0.799，0.960），当Gal-3为5.78 ng/ml 时，敏感性与特异性最高，分别达0.875（95% CI：0.751，0.943）和0.719（95% CI：0.629，0.893）。见图1。

图1 血清Gal-3预测糖尿病足介入治疗预后的ROC曲线

3 讨论

糖尿病足是糖尿病严重的并发症之一，主要原因在于患者体内持续的高血糖状态使血管内皮细胞膜受到损伤，动脉内膜中大量脂质沉积，使血液凝固性增加，动脉壁变硬，随着病情的进展会造成管腔狭窄或者血管闭塞[4]。糖尿病足患者微血管及神经发生病变，易遭受感染侵袭从而引起糖尿病足。若无法及时采取有效治疗，则截肢风险增加，因此糖尿病足的早期诊断对其治疗、预后具有重要临床意义。

介入治疗是目前临床上广泛用于治疗糖尿病足的一种微创治疗手段，具有高效、安全、副作用小的临床优势[5]。介入治疗是在患者大腿根部进行穿刺，将带有球囊的导管插入动脉腔内，到达病灶区域后充盈球囊，使狭窄段血管扩张，必要时可根据患者病情行血管内支架成形术，恢复其下肢远端血供，从而达到治疗目的。血管再狭窄指血管受损后平滑肌过度增殖与细胞外基质大量合成，造成新生内膜增厚，最终引起管腔狭窄[6-7]。有研究认为，介入治疗后易出现血管再狭窄，分析血管再狭窄的影响因素及预测指标有利于降低血管再狭窄发生风险[8]。

DSA 是一种临床上常用的辅助检查技术，适用于多种疾病的临床诊断及治疗，可有效且准确地反映血管病变区域以及程度。本研究中，患者介入治疗后经DSA 检查，血管再狭窄发生率为43.75%（35/80），患者的肢体缺血加重，狭窄血管程度＞50%，与以往相关研究接近[9]。另外45 例患者预后较好，造影结果显示患肢病变动脉较为通畅，狭窄血管＜50%。

多因素Logistic 回归分析结果显示，Wagner 分级、肢体缺血、CRP、PCT、Gal-3 是糖尿病足介入治疗后血管再狭窄的影响因素。本研究中Wanger分级3 级患者血管狭窄比例高于1、2 级患者，Wanger 分级与糖尿病足患者预后存在明显关联，分级评估方法重点考虑溃疡和感染情况。由于糖尿病足与炎症反应、组织损伤、感染等多种因素有关，因此血清CRP、PCT 也是常用的预后评估指标[10-11]。PCT 为降钙素的前肽糖蛋白，合成易受白细胞介素等炎症因子、细菌内毒素的影响，在严重感染与组织损伤患者中，PCT 水平异常升高。血清PCT 水平越高，机体组织损伤越明显，血管内皮损伤越严重，再狭窄风险越高。炎症机制在血管再狭窄过程中发挥重要作用，CRP 可激活人类内皮细胞黏附因子并增强其表达水平，并与脂多糖协同刺激血管内皮细胞，最终增加血管再狭窄风险。

Gal-3 是一种与血管疾病关系密切的蛋白，因此有研究认为，血清Gal-3 水平与糖尿病足密切相关[12]。Galectin属于糖黏白蛋白家族，目前已有15 个成员被分离及识别，其在炎症反应、肿瘤发生与进展、免疫系统、血管疾病等病理过程中发挥重要作用。Gal-3 是半乳糖凝集素家族中一员，主要由巨噬细胞分泌，由糖识别域和胶原蛋白融合形成，具有调节细胞增殖、凋亡、迁移及黏附功能，还参与免疫调节、肿瘤发生与转移等过程。Gal-3具有多种生物学功能，其一，可以依靠多种炎症因子参与炎症反应；其二，细胞表面中的Gal-3 是糖基化终产物的重要受体，在2 型糖尿病及其并发症病变过程中发挥重要作用，因此，Gal-3 对糖尿病并发症具有重要的诊断价值[13]。有研究证实，血清Gal-3 可作为血管疾病的血清生化标志物，在患者体内呈高表达[14-15]。糖尿病足患者由于长期处于高血糖状态，Gal-3 参与机体炎症反应，促进巨噬细胞大量分泌，从而促使内皮细胞分化、血管新生，参与外周动脉血管疾病形成与进展。本研究中，再狭窄组血清Gal-3 显著高于非狭窄组，Gal-3是糖尿病足介入治疗后血管再狭窄的影响因素。采用血清Gal-3 预测糖尿病足介入治疗预后的ROC曲线下面积为0.885（95% CI：0.799，0.960），最佳临界值为5.78 ng/ml，敏感性为0.875，特异性为0.719，提示积极检测血清Gal-3 有利于预测糖尿病足介入治疗的预后。

综上所述，Wagner 分级、肢体缺血、CRP、PCT、Gal-3 是糖尿病足介入治疗后再狭窄的影响因素，积极检测血清Gal-3 有利于预测患者介入术后血管再狭窄风险。