UBE2T、FANCD2、USP1 在宫颈癌组织中的表达及临床意义

王 珏，陈 静，王 钊

（靖江市人民医院病理科 江苏 靖江 214500）

宫颈癌是最常见的女性恶性肿瘤之一，恶性程度高、侵袭性强、预后差，死亡率仅次于乳腺癌[1]。近年来，肿瘤标志物在诊断恶性肿瘤及预测其预后的应用价值越来越引起重视。基于此，本研究探讨UBE2T（泛素结合酶E2T）、FANCD2（范科尼贫血互补群D2）、USP1（泛素特异肽酶1）在宫颈癌组织中的表达以及临床意义。

1.资料与方法

1.1 一般资料

选取2015 年1 月—2018 年1 月期间于我院行广泛性子宫切除术的40 例宫颈鳞癌患者、120 例CIN 患者（低度病变、高度病变各60 例）、40 例正常宫颈的子宫肌瘤患者为研究对象。

符合以下标准的宫颈鳞癌细胞癌患者纳入本次研究：（1）病理学确诊为宫颈鳞状细胞癌的初诊患者；（2）未经过放疗和化疗治疗；（3）首次手术为经腹宫颈癌根治术；（4）临床资料完整。

符合以下标准的CIN 患者纳入本次研究：（1）初始病交为LSIL 和HSIL 病变，即宫颈上皮内瘤变（Cervical Intraepithelial Neoplasia，CIN 1，CIN 2 或CIN 3）；（2）接受宫颈锥切手术；（3）临床资料完整。

符合以下标准的患者纳入本次研究作为对照：（1）因子宫多发肌瘤或子宫脱垂行子宫全切术的患者；（2）术前人乳头状瘤病毒（human papillomavirus，HPV）阴性，并且液基薄层细胞检测（Thinprep Cytologic test，TCT）正常；（3）临床资料完整。

相关操作均获得患者知情同意，排除既往宫颈有赘生物史、有免疫缺陷型疾病。三组患者的年龄无统计学差异（P＞0.05）。

1.2 方法

将取得的宫颈正常组织、CIN 低度病变、CIN 高度病变以及宫颈癌患者宫颈组织经10%中性福尔马林浸泡后采用石蜡包埋，制作切片，厚度为4 μm。烤干后对相应的切片编号，选择相应的试剂盒行免疫组化染色，本实验所用标本均收集来自本院病理科病理检查标本，进行HE 染色和SP 染色实验。检测UBE2T、FANCD2、USP1 在宫颈癌组织中的表达水平。

1.3 统计学处理

采用SPSS 20.0 统计软件，计数资料采用[n（%）]表示，比较采用卡方检验，CDK8、Ki-67、P53 相关性采用Pearson 相关性分析，以P＜0.05 认为差异有统计学意义。

2.结果

2.1 FANCD2 在宫颈癌、CIN 中的表达情况

正常宫颈组织几乎无FANCD2 阳性细胞，CIN 低度病变中有散在阳性细胞表达，CIN 高度病变较正常宫颈组织阳性细胞增多，而宫颈癌组织中明显加深（见图1 所示）。CIN 低度病变的FANCD2 与正常宫颈组织无统计学差异（P＞0.05）。CIN 高度病变的FANCD2 高于正常宫颈组织，宫颈癌组织FANCD2 高于CIN 高度病变，差异有统计学意义（P＜0.05）。

图1 FANCD2 免疫组化情况

a,b,c,d 分别是FANCD2 阳性细胞在宫颈癌组，宫颈高级别上皮内瘤样病变、宫颈低级别上皮内瘤变、正常宫颈组织表达情况。

2.2 UBE2T、FANCD2、USP1 在各宫颈组织中的阳性率比较

UBE2T、FANCD2、USP1 在宫颈癌组中的表达高于CIN 高级病变组，CIN 高级病变组的UBE2T、FANCD2、USP1 表达高于正常宫颈组，差异有统计学意义（P＜0.05）。三者在正常宫颈与CIN 低度病变中的表达以及CIN 低度病变组与高度病变组的表达均无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

表1 UBE2T、FANCD2、USP1 在各宫颈组织中的表达情况

2.3 UBE2T、FANCD2、USP1 与宫颈癌临床病理参数的相关性

FANCD2 在宫颈癌中的表达与HPV 感染有关，UBE2T与细胞分化、HPV 感染有关，USP1 与临床分期、HPV 感染有关，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 UBE2T、FANCD2、USP1 与宫颈癌临床病理参数的相关性[n（%）]

2.4 UBE2T、FANCD2、USP1 在宫颈癌表达中的相关性分析

相关性分析显示，宫颈癌组织中的FANCD2 与UBE2T呈正相关（r=0.522，P=0.001），与USP1 呈正相关（r=9.143，P=0.004），USP1 与UBE2T 呈正相关（r=7.298，P=0.001）。

3.讨论

宫颈癌早期阶段几乎无症状，而到了中晚期可以通过常规筛查或是盆腔检查来进行确诊，比较简单，患者的临床表现大部分是阴道大出血[2]。早期发现宫颈癌，临床上可以通过手术切除和同步放化疗来达到临床上的治愈，而发展到中晚期，则临床治疗效果和预后不好，也因此，早期诊断和治疗能够对对宫颈癌患者的预后有着重要的改善作用。近年来，一直在寻找特异度和敏感度较高的宫颈癌分子标志物，这样才能够对宫颈癌早期诊断有更好的帮助，进而提高宫颈癌的治疗效率[3]。

FANCD2 基因在宫颈癌复发转移中的作用和机制被多项研究证实[4]，有研究认为FANCD2 去泛素化障碍同样可以使FA 通路失活，导致DNA 链间得不到修复，从而诱导宫颈癌的复发和转移；UBE2T 是泛素偶联酶之一，新近被发现，在很多肿瘤中常见，正常情况下，其在ATP 条件下能够结合酶E2 的产生发生促进作用，并介导蛋白质物质导致相应底物分子的降解，一旦功能改变，就会破坏上述酶的编码，从而导致恶性肿瘤的发生；泛素特异肽酶1（USP1）是一种泛素特异的半胱氨酸蛋白酶，它连同其辅助因子UAF1 共同介导FANCD2 的去泛素化。FANCD2 的去泛素化对于维持FA 通路的正常功能同样重要[5]。本次研究探讨UBE2T、FANCD2、USP1 在宫颈癌中的表达情况，并分析其发生机制是有着重要价值的。研究结果发现，随着病情严重程度的增加，UBE2T、FANCD2、USP1 的阳性表达率均有逐渐升高的趋势。相关性分析显示，宫颈癌组织中的FANCD2 与UBE2T,USP1 呈正相关，USP1 与UBE2T 呈正相关（P＜0.05）。

综上所示，宫颈癌患者的UBE2T、FANCD2、USP1 表达率较高，三者均有助于预测宫颈病变，且在宫颈癌的发生过程中可能存在协同作用。