2011—2018年厦门市集美区霍乱监测结果分析

邱艺燕，欧秀华，陈嘉祥

厦门市集美区疾病预防控制中心，福建 厦门 361022

霍乱是甲类传染病之一，是由霍乱弧菌引起的急性肠道传染病，以发病急、传播快、波及范围广为特征，可引起散发、暴发和大流行。其临床特征为剧烈腹泻、呕吐、大量米泔样排泄物、水电解质紊乱等。为了解厦门市集美区外环境水体和水产品中O1 和O139 群霍乱弧菌的污染状况，及时掌握霍乱的疫情动态并为制定霍乱预防控制措施提供依据，本文对厦门市集美区2011—2018年霍乱监测情况进行统计分析，结果如下。

1 对象、材料与方法

1.1研究对象

1.1.1水体与水产品 检测的水体包括江河水、池塘水、生活水、沿海水、养殖水(龙舟池养殖水、灌口陈井养殖水、马銮湾养殖水、杏林湾养殖水)。

选择永辉集美店、大润发集美店、杏林白泉菜市场、集美菜市场作为水产品采样点，轮流采样监测。在每年霍乱流行季节的5—10月份，每月至少采集30份水体标本和35份水产品标本。

1.1.2腹泻病人标本 在4个社区卫生服务中心，2个卫生院(灌口卫生院、侨英卫生院)设置肠道门诊监测点,全年开展腹泻患者肠道门诊监测并采集腹泻病人标本。

1.2材料 碱性蛋白胨水增菌液、庆大霉素琼脂培养基、霍乱生化鉴定试剂由北京路桥技术股份有限责任公司生产；霍乱诊断血清由天津生物芯片技术有限责任公司生产；VITEK 2 革兰氏阴性细菌鉴定卡由生物梅里埃股份有限公司生产。以上培养基及诊断血清均在有效期内使用。VITEK 2全自动微生物鉴定仪由法国梅里埃公司生产。

1.3方法 按《全国霍乱监测方案》《霍乱诊断标准》(WS 289-2008)和《霍乱防治手册(第6版)》的规定进行采样、送检、检验和鉴定。

1.3.1增菌 将适量样品放入碱性蛋白胨水中增菌，培养8 h后，吸取第一次增菌的表层增菌液0.2 mL，加入10 mL碱性蛋白胨水管中，36 ℃培养8 h，进行二次增菌。

1.3.2分离培养 用接种环蘸取一环二次增菌后的表层增菌液在庆大霉素琼脂上划线分离培养。培养24 h后，挑取5个可疑菌落(略带青灰色、半透明、扁平、微隆起、光滑湿润的菌落)，划线接种于营养琼脂平板，(36±1) ℃培养24 h。

1.3.3疑似菌落鉴定 挑取营养琼脂平板上的菌落，做氧化酶试验、黏丝试验、革兰染色镜检、三糖铁发酵试验，再挑取初步鉴定结果符合的菌落，用VITEK 2全自动微生物鉴定仪做生化鉴定。

1.3.4血清分型 生化结果符合的菌落再用霍乱诊断血清做O1/O139凝集实验。

1.3.5毒力鉴定 阳性菌种送到厦门市疾病预防控制中心复核确认，同时进行霍乱弧菌毒力基因ctxAB的检测。

2 结 果

2.1各类标本的霍乱弧菌检出情况 2011—2018年，集美区共检测标本4 509份，检出霍乱弧菌6份，阳性率为0.13%。其中，腹泻病人粪便标本1 039份，未检出霍乱弧菌；水体标本共检测1 410份，检出2份，阳性率为0.14%；水产品标本共检测2 060份，检出4份，阳性率为0.19%。不同年份霍乱弧菌阳性率不同。见表1。

表1 2011—2018年不同样本霍乱弧菌检出情况

2.2阳性标本血清分型 6份阳性标本中4份为O1群稻叶型，占66.7%；2份为O1群小川型，占33.3%。阳性标本送厦门市疾控中心做霍乱弧菌毒力基因ctxAB检测，均为阴性。

2.3阳性标本溯源 对6份阳性标本的来源进行调查，结果显示：水体检出2份，均为灌口陈井的牛蛙养殖水；水产品检出4份，其中牛蛙检出3份，2份来自白泉菜市场，1份来自大润发集美店；田螺检出1份，来自白泉菜市场。

3 讨 论

霍乱监测是为了及时发现传染源，了解霍乱弧菌在外环境水和水产品中的分布情况、菌株类型及其毒力情况，是预防和控制霍乱流行的重要工作。2011—2018年对集美区辖区的肠道门诊腹泻物、水产品以及外环境水体开展霍乱弧菌监测，结果显示：集美区肠道门诊腹泻物、外环境水和水产品的阳性率为0、0.14%和0.19%，与福建省的霍乱监测阳性检出率基本持平[1]，但低于厦门市整体的外环境水(1.01%)、水产品(1.21%)的阳性检出率[2]。这可能与集美区蛙类及其养殖水采样比例较低有关，集美区蛙类及其养殖水构成比约占15%，而厦门市外环境标本中蛙类和池水标本近五年的采样构成比为34.11%[3]。

集美区2011—2018年检出的6份阳性标本中,牛蛙养殖水2份,牛蛙3份,田螺1份。霍乱弧菌主要在水产品中检出，牛蛙等两栖类水产品中霍乱弧菌的阳性率明显高于其他类型水产品，比如甲壳类、鱼类、贝壳类等，这与其他区、市历年水产品的监测结果一致[4-5]。牛蛙多来自养殖场，一旦养殖场中的养殖水被霍乱弧菌污染，则牛蛙的阳性率较高[6]。建议今后重点对蛙类及蛙类养殖水进行监测，适当提高其标本监测比重。

霍乱毒素是引起霍乱流行的重要影响因素之一，不产霍乱毒素的霍乱弧菌一般不会致病或者仅引起散发的腹泻病例，大概率不会引起霍乱的流行。集美区近几年外环境检出的霍乱弧菌经检测均为无毒力株，但有研究发现霍乱弧菌毒力基因能在产毒株和非产毒株之间水平转移，从而产生新的致病菌株[7]，所以仍应加强监测，密切关注毒力的变迁，及早发现菌株的毒力变化。

2011年以来，我国霍乱疫情进入低水平流行阶段，每年霍乱病例总数不超过100例[8]。尽管集美区腹泻物多年监测阳性率为0,但仍不能忽视肠道门诊在早期监测霍乱疫情中的重要作用。因此，应加强对基层检验人员的培训，提高规范化采样水平，保证采样质量和时效，同时提升实验室人员的检测水平，及时发现霍乱病例，以便尽快采取相应措施进行控制，防止霍乱弧菌流行扩散。