Pyk2蛋白在非肌层浸润性膀胱癌中的表达及与该肿瘤预后的相关性
2021-04-28韩健乐杨帅平王晓勃
韩健乐 杨帅平 王晓勃
膀胱癌是泌尿系统中常见的1种恶性肿瘤,主要出现在膀胱壁黏膜上的实体肿瘤,而非肌层浸润性膀胱癌则指的是既往称之为的浅表性膀胱癌。膀胱癌患者临床确诊后有70%~80%均为非肌层浸润性膀胱癌,且该类肿瘤发病具有生物学行为的多变性,患者处于此病变阶段时极易复发和进展,具有很高的侵袭性和复杂的疾病进程[1-2]。目前,临床对非肌层浸润性膀胱癌的关注度不断提高,对于非肌层浸润性膀胱癌发生发展过程中分子生物学指标变化的认识不断加深,并且分子肿瘤病理学科的不断完善也推动了相关研究的深入[3]。富含脯氨酸的蛋白酪氨酸激酶2(proline rich protein tyrosine kinase 2,Pyk2)蛋白是1种富含脯氨酸的非受体型酪氨酸蛋白激酶[4],既往报道显示Pyk2在调节机体免疫、细胞增殖、迁移转化等方面发挥重要的作用[5]。既往报道显示Pyk2蛋白在多种肿瘤细胞的增殖转移过程中均有着异常表达,可能是肿瘤细胞生长的重要标志物,并与肿瘤细胞的生长转移和癌症的预后产生某种关联[6]。但在非肌层浸润性膀胱癌患者中Pyk2蛋白的表达研究相对较少,为此本研究中以非肌层浸润性膀胱癌患者为研究对象,探讨Pyk2蛋白在其病灶组织中的表达情况及与肿瘤预后的相关性,报告如下。
1 材料与方法
1.1 临床资料及入选标准
取2016年1月至2019年12月收治的62例非肌层浸润性膀胱癌患者为调查研究对象,纳入标准:① 患者经CT、MRI、组织病理学检查等手段确诊为非肌层浸润性膀胱癌;② 患者年龄40~75岁;③ 患者均具有手术根治治疗的指征;④ 患者均完成手术治疗,术中采集到完整的肿瘤病灶标本和癌旁组织标本;⑤ 患者自愿参与本项调查研究,研究方案经医院伦理学委员会审查通过。排除标准:① 患者并发其他肿瘤疾病;② 基础资料、临床检测资料缺失或不完善的患者;③ 合并严重的心血管疾病、自身免疫性疾病患者;④ 中途因各种原因自愿退出本研究的患者。62例患者男性34例、女性28例,年龄40~75岁,平均年龄(57.66±9.97)岁,病灶大小1.8~4.5 cm,平均病灶大小(3.79±1.76)cm,病灶数:单发40例、多发22例,肿瘤分期:Ⅰ期15例、Ⅱ期20例、Ⅲ期27例,分化程度:高26例、中22例、低14例。
1.2 检测方法
取非肌层浸润性膀胱癌患者手术后的肿瘤病灶组标本和癌旁正常黏膜组织标本进行免疫组化法检测Pyk2蛋白表达情况的检测。将标本进行脱水、包埋、固定等处理,并加入鼠抗人Pyk2单克隆抗体过夜,然后按照SP试剂盒操作说明对各组织标本进行免疫组化染色,SP试剂盒购自于上海艾博抗公司。在LV150N型光学显微镜(日本尼康公司)下观察Pyk2蛋白表达的阳性率,阳性率判断标准为:显微镜视野下出现棕黄色或棕褐色的特异性着色的棕色、黄色、褐色颗粒状物质即为阳性,否则为阴性。将显微镜调节值低倍镜视野(×100)下,选出每个标本下10个阳性细胞数较多的视野进行计数,计算各个标本中的Pyk2蛋白的表达水平。
1.3 评价指标
对观察组膀胱癌病灶标本和对照组癌旁正常黏膜组织标本的Pyk2蛋白阳性表达率、表达水平进行统计对比,并对Pyk2蛋白表达情况与非肌层浸润性膀胱癌的临床病理学特征间的相关性进行分析处理。并将患者分为Pyk2蛋白阳性表达组和Pyk2蛋白阴性表达组,对两组患者的预后效果进行随访观察,对比两组患者术后的复发率、无进展生存期(progression free survival,PFS)、总生存期(total survival,OS),并进行组间对比以探讨Pyk2蛋白表达与患者预后的相关性。
1.4 统计学处理
2 结果
2.1 观察组、对照组Pyk2蛋白表达情况对比
观察组Pyk2蛋白阳性表达率、表达水平均高于对照组,组间对比差异有统计学意义(P<0.05),见表1。
表1 观察组、对照组Pyk2蛋白表达情况对比
2.2 Pyk2蛋白表达与临床病理特征的关系
Pyk2蛋白表达与非肌层浸润性膀胱癌患者年龄、性别、病灶大小、病灶数等因素无关,而与患者的肿瘤分期、分化程度有关,见表2。
表2 Pyk2蛋白表达与临床病理特征的关系
2.3 Pyk2蛋白表达与患者预后关系
Pyk2蛋白阳性表达组患者复发率高于阴性表达组,PFS、OS水平均低于Pyk2蛋白阴性表达患者,见表3。
表3 Pyk2蛋白表达与预后的关系
3 讨论
膀胱癌是泌尿系统中常见的恶性肿瘤疾病,随着社会工作压力的增加以及不良生活习惯的形成,膀胱癌在临床上的发病率呈现逐年升高的趋势,严重威胁患者的生命健康和生活质量。其中膀胱癌患者中有70%~80%患者分型均属于非肌层浸润性膀胱癌,此病程阶段患者复发率高、难治愈、预后效果差等特点,给此类患者的临床治疗带来了巨大挑战[7-8]。因此,对于此类患者诊疗过程中的病情监测、预后效果的评估判断是十分必要的,寻找1种无创敏感性、特异性高的生物标志物作为非肌层浸润性膀胱癌的诊断和随访依据有着重要意义。目前,虽然有多种生物标记物如血管内皮生长因子、环氧化酶、甲胎蛋白、核基质蛋白22等用于膀胱癌的诊疗过程中,但存在着敏感性、特异性较差等问题影响了其临床应用[9-10]。寻找1种敏感性和特异性更高的生物学标志物作为非肌层浸润性膀胱癌的诊断和预后监测指标,已成为近几年临床研究关注的重点方向。Pyk2蛋白是1种富含脯氨酸的非受体型酪氨酸蛋白激酶,既往报道显示Pyk2在调节机体免疫、细胞增殖、迁移转化等方面发挥重要的作用,为本项研究的开展提供了思路[11]。
在本研究中,选取非肌层浸润性膀胱癌患者的手术后的肿瘤病灶组织和癌旁正常黏膜组织为检测标本,以免疫组化法对两组标本中的Pyk2蛋白的表达情况进行检测对比,结果显示观察组Pyk2蛋白阳性表达率、表达水平均高于对照组,表明观察组Pyk2蛋白在非肌层浸润性膀胱癌患者中呈现高表达,初步推断Pyk2蛋白与非肌层浸润性膀胱癌的肿瘤细胞的侵袭转移具有一定的关联性,与既往临床报道的结果基本一致[12]。进一步对Pyk2蛋白表达与患者的临床病理学特征关系进行研究,结果显示Pyk2蛋白的表达与非肌层浸润性膀胱癌患者的年龄、性别、病灶大小、病灶数等因素无关,而与患者的肿瘤分期、分化程度有关。表明Pyk2蛋白的表达可能参与非肌层浸润性膀胱癌肿瘤的进展、分期、浸润、转移过程,对于宫颈癌肿瘤的加重扮演重要作用。也有报道表明Pyk2蛋白作为1个上游基因蛋白,可通过多种细胞通路对下游基因发挥广泛的调节作用,也有报道指出Pyk2蛋白表达的增多可抑制膀胱癌肿瘤细胞的凋亡因子的表达,从而促进肿瘤细胞的增殖,使得非肌层浸润性膀胱癌细胞大量繁殖,加重患者病情,促使患者的肿瘤细胞的进展、浸润和转移[13-14]。在预后效果对比中,Pyk2蛋白阳性表达组患者的复发率高于阴性表达组,PFS、OS水平均低于Pyk2蛋白阴性表达患者,表明Pyk2蛋白的表达与非肌层浸润性膀胱癌患者的预后效果有相关性,可用以预测患者的预后情况,有较高的临床指导意义。
综上所述,Pyk2蛋白在非肌层浸润性膀胱癌患者病灶组织中呈现高表达,其表达情况与非肌层浸润性膀胱癌病灶的浸润、转移、分期有密切关系,并与患者的肿瘤预后效果显著相关。Pyk2蛋白的检测对于非肌层浸润性膀胱癌病情评估、预后判断有指导意义。