早产新生儿呼吸窘迫综合征血清CD62E、IL-17表达水平及其与发病风险、病情程度的关系

刘莉 温晓红

新生儿呼吸窘迫综合征(neonatal respiratory distress syndrome，NRDS)是指出生后由于缺乏肺表面活性物质(pulmonary surfactant，PS)等因素造成的具有进行性加重特征的呼吸窘迫，常见于早产儿。国内一项研究数据显示：NRDS中胎龄24～27周新生儿占5.9%(12/204)，28～31周占比24%(49/204)，32～36周占比34.3%(70/204)，而足月儿仅占35.8%(73/204)[1]。近年来在PS应用、通气方式改进等背景下，NRDS患儿的整体预后得到一定改善。但仍有部分存活的早产儿并发支气管肺发育不良、肺损伤等，严重危及生存质量。故早期诊断与评估，对临床针对性防治至关重要。相关研究证实：炎症、内皮因子与NRDS病理生理关系密切[2]。白介素-17(interleukin-17，IL-17)是分泌自Th17细胞的促炎因子，近期研究[3]发现其在急性呼吸窘迫(acute respiratory distress dyndrome，ARDS)患者中与预后相关。E-选择素(E-selectin，CD62E)是能够介导炎性反应的内皮细胞特有选择素，动物实验[4]发现其参与肺微血管内皮炎症。但目前关于CD62E、IL-17与NRDS早产儿的研究少有报道。本研究旨在探讨早产儿NRDS中血清CD62E、IL-17表达水平及其与发病风险、病情程度的关系，为临床诊治提供依据。现报告如下。

资料与方法

一、研究对象

选取2017年1月～2019年12月本院诊治的NRDS早产儿78例为NRDS组。纳入标准：① NRDS诊断符合《实用新生儿学》[5]中的标准，生后12 h内进行性呼吸困难；② 单胎早产儿，胎龄28～35周；③家属知情同意。排除标准：① 宫内感染；② 乙肝表面抗原(+)，或长时间应用免疫抑制剂的孕产妇所生产的婴儿；③ 先天性心脏疾病、染色体异常、中枢神经系统畸形、遗传疾病、呼吸系统畸形的早产儿。同时选取无NRDS的60例早产儿为对照组，胎龄28～35周，均排除先天性疾病、染色体异常、中枢神经系统疾病、感染性疾病。

二、方法

检测方法：新生儿在出生后24 h内(NRDS患儿于治疗前)均采集静脉血2 mL，离心提取血清-80 ℃存留待测。采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验完成血清CD62E(试剂盒源自上海科顺生物科技公司)、IL-17(试剂盒源自江苏晶美生物科技公司)含量，每样本均设置复孔，完成标准曲线的绘制，统计指标表达量。

NRDS早产儿病情判定[6]：依据新生儿治疗前胸片检查结果进行分级判定。轻度：双肺呈现低透光度，有清晰心影，全肺阴影表现为细小颗粒、网状(Ⅰ级)。中度：病变扩展至肺野中外区域，支气管充气征可见(Ⅱ级)；双肺磨玻璃样，明显的透光度降低，心缘、横隔部分模糊影(Ⅲ级)。重度：明显的 支气管充气征加重(犹如秃叶树枝)，重则出现肺野呈“白肺”。

表1 两组基线资料比较

三、观察指标

观察NRDS组中血清CD62E、IL-17水平与对照组的对比结果，分析CD62E、IL-17对早产儿NRDS的影响及其诊断价值；比较不同病情的NRDS患儿CD62E、IL-17水平，分析CD62E、IL-17与病情的相关性。

四、统计学分析

结 果

一、 两组基线资料比较

基线资料在二组间比较，差异无统计学意义(P>0.05)(见表1)。

二、两组血清CD62E、IL-17表达比较

NRDS组血清CD62E、IL-17水平高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)(见表2)。

表2 两组血清CD62E、IL-17表达比较

三、Logistic回归分析结果

以早产儿有无发生NRDS为因变量(统计赋值：有=1，无=0)，以CD62E、IL-17为自变量，Logistic分析结果显示：CD62E、IL-17是早产儿发生NRDS的独立危险因素(P<0.05)(见表3)。

四、CD62E、IL-17诊断早产儿NRDS的价值

ROC曲线显示，CD62E、IL-17诊断早产儿NRDS的AUC(95%CI)为0.836(95%CI=0.770～0.902)、0.732(95%CI=0.645～0.819)(均>0.7)；CD62E敏感度、特异度依次为75.6%、81.7%，IL-17依次为56.4%、98.3%；CD62E、IL-17最佳临界值为24.5ng/mL、102.5ng/L。两项联合诊断的AUC(95%CI)为0.875(95%CI=0.815～0.934)，敏感度、特异度依次为78.2%、91.7%(见表4、图1、2)。

图1 CD62E、IL-17诊断早产儿NRDS的ROC曲线

图2 CD62E联合IL-17诊断早产儿NRDS的ROC曲线

表3 CD62E、IL-17影响早产儿发生NRDS的Logistic结果

表4 CD62E、IL-17及两项联合诊断早产儿NRDS的ROC曲线结果

五、不同病情程度NRDS早产儿血清CD62E、IL-17比较

中度、重度NRDS早产儿血清CD62E、IL-17水平高于轻度患儿，且重度患儿CD62E、IL-17水平高于中度患儿，差异有统计学意义(P<0.05)(见表5、6)。

六、CD62E、IL-17与早产儿NRDS病情程度的相关性

Pearson相关性结果显示，CD62E、IL-17与早产儿NRDS病情程度均正相关(r=0.671、0.747，P<0.05)(见图3)。

表5 不同病情程度NRDS早产儿血清CD62E、IL-17比较

表6 不同病情程度组CD62E、IL-17比较的LSD-t检验结果

图3 CD62E、IL-17与早产儿NRDS病情程度的相关性

讨 论

NRDS早产儿在炎症、内毒素等各损害因素下会出现内皮细胞活化，而CD62E能够反映炎症的早期阶段，故在该过程中作为其特有选择素的CD62E含量增加，且由于炎症反应关键途径在于白细胞黏附内皮细胞，因此CD62E在该炎症过程中起重要作用[7-8]。本研究显示：NRDS组血清CD62E较对照组高，CD62E是NRDS发病的风险因子。究其原因，CD62E在诱导蛋白酶、氧自由基释放的同时，还介导白细胞与血管壁的黏附，通过相互作用效应，进一步生成大量炎性介质，造成内皮损害、肺内滞留中性粒细胞、组织水肿等，参与NRDS病理生理过程[9-10]。江苏省新生儿ARDS研究协作组[11]通过一项肺损伤生物学标志物的研究发现：CD62E在ARDS患者血液中的表达明显上升，能够反映肺损伤。本研究则进一步发现：CD62E对早产儿NRDS有诊断价值(AUC为0.836，95%CI=0.770～0.902，敏感度、特异度75.6%、81.7%，最佳临界值24.5 ng/mL)。这对临床早期辅助诊断具有客观应用价值。邓笑伟等[12]研究表明：随患者呼吸功能状态加重，CD62E浓度升高，提示CD62E有助于反映呼吸系统疾病的严重程度。本研究血清CD62E水平在NRDS重度组>中度组>轻度组。且CD62E与NRDS病情正相关，证实了CD62E对NRDS早产儿病情评估有一定作用，可帮助临床早期检测，尽早采取措施防治，有利于病情逆转。

IL-17作为前炎症细胞因子已被证实其表达上升与哮喘、关节炎等关系密切[13]。近期研究发现：IL-17家族成员IL-17A在ARDS肺泡炎症中浓度增高，且与病情进展、28d预后有关[14]。故推测IL-17可能与NRDS有关。本研究显示：NRDS组血清IL-17较对照组高，IL-17是NRDS发病的风险因子。究其原因，IL-17可激活炎性反应，促使中性粒细胞大量汇聚及炎症因子分泌，进而损害上皮、内皮，增大肺泡-动脉氧分压差，增加组织细胞通透性，影响氧合功能[15]；另一方面考虑也与IL-17参与炎性浸润、肺泡组织损伤有关[16]。本研究ROC曲线分析发现IL-17对早产儿NRDS有诊断价值，AUC为0.732，95%CI=0.645～0.819，敏感度、特异度56.4%、98.3%，最佳临界值102.5 ng/L；且IL-17联合CD62E诊断的AUC(95%CI)为0.875(95%CI=0.815～0.934)，敏感度78.2%、特异度91.7%；同时发现IL-17与早产儿NRDS病情程度正相关。说明IL-17具有辅助诊断作用，且联合CD62E可提高诊断价值，同时IL-17具有评估病情的作用，这对临床适时、合理选择防治方案具有指导意义。虽然IL-17敏感度相对低，但其对内皮、上皮细胞及白细胞、成纤维细胞等细胞的合成方面，均具有促进性效应，同时又可激活特异免疫反应[17]，增加炎症损害，故其特异性不容忽视。细胞学实验发现：重组IL-17对肺泡上皮细胞(体外培养)有破坏性影响，可增加其通透性[18]。且有资料显示IL-17可预测呼吸窘迫预后[19]。故IL-17可能成为NRDS新的潜在生物标记物。

综上所述，血清CD62E、IL-17在NRDS早产儿中呈相对高表达，CD62E、IL-17水平增高的早产儿发生NRDS的风险更大，且CD62E、IL-17在NRDS中具有诊断价值与病情评估价值，具有重要监测意义。