成人腹泻病原微生物的临床检验分析

林仁贵，谢琳峰

1.莆田学院附属医院检验科，福建莆田 351100；2.莆田学院药学与医学技术学院，福建莆田 351100

腹泻主要分为急性腹泻与慢性腹泻， 慢性腹泻病因较复杂，而急性腹泻多由细菌或病毒感染引起。 急性腹泻起病急骤，以排便次数明显增多，达10 次以上，粪便量多而稀薄，排便时常伴腹鸣腹痛，且发病率极高的临床常见症状[1]。 该研究主要针对成人腹泻进行分析，小儿腹泻不在此讨论范围。 目前腹泻主要依靠患者的发病诱因、临床症状及实验室指标进行临床诊断，但具体属于哪种细菌的感染需要参考粪便的病原菌检测结果，如若经验性抗感染治疗效果不佳，则需根据大便的病原菌培养结果与药敏结果给予针对性治疗[2]。 故该科对2018 年6 月—2019 年6 月因腹泻在该院消化内科治疗的100 例患者进行粪便的病原学检测， 明确致病率较高的菌群，为临床治疗提供更为有力的用药依据，并分析病原菌的检验结果及探讨病原菌检测的在腹泻临床诊断中的应用价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

采用筛选住院号尾数为“2、5”的方法，随机选取在该院急诊入院并在消化内科进行治疗的110 例腹泻患者作为研究对象，其中10 例患者因个人原因退出该次研究 [（该研究已获得莆田学院附属医院伦理委员会批准（临床研究号：Z2018-065-01）]，所有入组患者及家属均签署知情同意书。 最终纳入患者中男性48 例，女性52 例， 性别比为 1：1.08； 年龄 18～52 岁， 平均年龄（31.53±4.41）岁；其中稀便最多为 31 例，水样便为 30例，黏水样便及脓血便例数相近，为21 例和18 例。 按照季节进行分类，每个季节均纳入25 例患者，平均分布于春夏秋冬四季。

1.2 方法

将检验样品（研究对象的新鲜粪便）置入培养皿进行细菌常规培养，通过全自动细菌鉴定仪对病原菌进行检测，具体的操作步骤作如下[3-4]：（1）增菌与分离培养：将标本在碱性蛋白胶水、GN 增菌液和NaCl 结晶紫增菌液中接种并进行培养。 随后将其在由庆大霉素、MAC琼脂、SS 琼脂以及氯化钠蔗糖琼脂中接种并进行培养，2 次培养温度均为恒温 37℃，培养时间为 18～24 h。 （2）选择疑似菌落：①使用MAC 琼脂及革兰染色，筛选具有致泻性的革兰阴性杆菌（大肠埃希菌菌落），将其接种于三糖铁琼脂中，培养温度及时间保持不变。②使用SS琼脂及革兰染色，筛选革兰阴性杆菌（志贺菌菌落），将其接种于三糖铁琼脂中，培养温度及时间依旧同上。 ③使用NaCl 蔗糖琼脂， 初步筛选可疑副溶血性弧菌菌落，再将其接种于氯化钠三糖铁琼脂中，培养温度及时间依旧保持不变。 ④借助SS 琼脂，初步筛选呈现扩散现象的可疑变形杆菌菌落。 （3）生化检测：在反应试条上将以上菌落进行生化反应，随后进行比对，最后针对可疑的菌落，需借助全自动细菌鉴定仪进行判定。

1.3 观察指标

比较上文所检测的6 种菌属的检出率，具体包括 :①副溶血性弧菌；②沙门菌；③志贺菌；④大肠埃希菌；⑤邻单胞菌；⑥气单胞菌。 并进行根据季节进行发病率比较。

2 结果

2.1 粪便标本病原菌检验结果比较

病原菌检出率由高至低的前3 位分别为志贺菌>沙门菌>大肠埃希菌，见表1。

表1 粪便标本病原菌检验结果[n(%)]

2.2 不同季节患者大便常规检验情况

除沙门菌外的5 种菌属在一年四季中并无特别明显的分布特征，四季的发病率略有不同；沙门菌在四季中导致腹泻的发病率不同，夏秋两季较高。 见表2。

表2 不同季节患者大便常规检验情况[n(%)]

3 讨论

腹泻是一种高发的肠道症状，多由饮食不洁引起。有学者调查了浙江省湖州市食源性腹泻的流行病学特征，发现青壮年为食源性腹泻的主要人群，以致泻性大肠埃希菌为主（44.5%），其中以6～8 月份检出率最高[5]。正常人群每日排便次数固定， 只要患者每天的排便次数高于固定次数则记为腹泻， 同时需符合排出量＞200 g，且粪质稀薄不粘稠结块，含水量高，且粪便中存在黏液和未消化完全的食物， 部分患者粪便中还会出现脓血、黏液等。 腹泻最常见的伴随症状有排便紧迫、肛门异物感等，甚至还会出现失禁等严重症状。

腹泻的致病因素有很多， 其中最主要的原因为细菌感染， 如该研究中检测出来的致病原100%为细菌，而细菌的滋生多与食物的处理及储存相关， 例如副溶血弧菌大多是因为海鲜在加工的过程中没有进行消毒处理， 或者加热的时间不够， 食物没有完全成熟而产生；变形杆菌则是因为肉类食物没有采取保鲜措施，出现腐烂变质继而变成细菌培养皿； 沙门菌则是与环境脏乱或者存放有误相关。 此外，由于抗生素的滥用，目前抗生素相关性腹泻亦十分常见[6]，因而检验科室很有必要把好用药的第一关， 为精准化用药提供最强有力的依据。

由于感染的细菌不同，腹泻的症状也有所不同，例如：感染副溶血弧菌时症状较轻，粪便大都呈稀便或者水样便，偶有带有黏脓和血水情况；而气单胞菌感染造成的腹泻则会出现便血及水样粪便，或者脓血便。 但依据症状对腹泻的病因进行诊断指导治疗可能会出现偏差， 所以对于腹泻病因的最准确诊断依据为粪便的致病菌检测。 只有对致病菌进行详尽的检测及分析，才能保证准确与科学的综合治疗。 此外，其中有部分菌株是危险传染源，具有广泛传播性，需对其采取针对性的防护措施从而避免流行性腹泻大爆发， 因此对于病原菌的准确检测尤为必要。

该次研究结果显示，志贺菌属检出率为52%，明显高于其他菌属检出率差异有统计学意义（P＜0.05）。此结果与吴祥铭、邓定华、王硕及吕幸福等[3-4，6-7]的研究得出结果基本一致，其中吕氏检测结果为志贺菌属（SHI）检出率最高（44.30%），其次是沙门菌属（15.19%），而王秀红等[8]对急性感染性腹泻的致病菌特征探讨亦发现志贺菌属、副溶血性弧菌及沙门菌属为主要致病菌，构成比分别为29.89%、27.40%及22.42%， 该研究还发现致病菌仅对亚胺培南、美罗培南、哌拉西林他唑巴坦等高级别抗生素耐药率较低。 沙门菌属检出率为18%，明显低于副溶血性弧菌、志贺菌的检出率，与其他菌属检查率相近。 此次结果与邓定华[4]研究结果基本吻合，其研究提示志贺菌属显著高于其他均属。 沙门菌在四季中导致腹泻的发病率存在差异，夏秋两季之和较高，且与春冬两季之和的差异有统计学意义。 此次结果与张会品、王珊珊、吴华等[9-11]研究结果大致相同，其中张氏发现在夏季与秋季感染沙门菌、 副溶血弧菌的患者多于春冬两季， 在四季中均有患者感染志贺菌与大肠埃希菌， 王氏则发现沙门菌在一年四季中均有明显分布规律，一般夏秋两季发病率较高。 但与王秀红等[8]研究结果恰好相反， 其结果显示志贺菌属和副溶血性弧菌引起的腹泻具有明显季节性， 而沙门菌属及其他菌属则无明显季节性。 结合上述结果，考虑每个地区的细菌感染存在明显差异， 季节或许非细菌感染高发期的主要因素，该问题仍留待后来学者以继续研究。 除沙门菌外的其他5 种菌属在一年四季中并没有特别明显的分布特征，在四季中发病率相近。 此次结果中，副溶血弧菌感染的发病特征与张会品、吴华[9，11]的研究结果有一定出入，在其研究中发现，副溶血弧菌也具有和沙门菌一样的季节规律，而该研究中未发现此规律，原因可能与该次研究中纳入的患者感染菌属例数分布不均有关。

该研究还需进一步纳入更多患者进一步论证腹泻症状与季节有关， 原因可能为致病微生物的不同而引起[12]的相关结论。 因腹泻病因复杂，故为了保证临床治疗准确度，准确检测致病菌和条件致病菌缺一不可。

综上所述， 导致成人腹泻的主要病原菌是志贺菌与沙门菌，需对致病菌及条件致病菌同时检测，给予综合治疗，以确保治疗效果。