贵阳地区规模化猪场主要疫病免疫效果评估

张 海，蔺俐仲，邓珊珊，徐春志，袁 林，杨 源，刘 艳，李照伟

（1.贵阳市动物疫病预防控制中心，贵州 贵阳 550081；2.贵阳市草地站，贵州 贵阳 550081；3.贵阳市清镇市农业农村局，贵州 贵阳 551400；4.贵阳市息烽县农业农村局，贵州 贵阳 550300；5.贵州省动物疫病预防控制中心，贵州 贵阳 550081）

随着生猪养殖规模化的不断发展，在生猪养殖生产过程中影响猪群生长的疾病因素主要分为病毒性、细菌性和寄生虫，其中病毒性动物疫病最为常见且影响最大。在病毒性疾病中猪瘟、猪口蹄疫、猪蓝耳病、猪伪狂犬病已经成为规模化猪场重点防控的动物疫病。口蹄疫（FMD）主要感染牛、猪等偶蹄类动物，感染后的典型临床特征为口舌黏膜、蹄部皮肤形成水疱、糜烂或溃疡病灶，传播迅速、发病率高，可引起幼畜死亡、成年畜生产性能下降[1]。被世界动物卫生组织列为A类传染病动物疫病，我国将其列为一类动物疫病。猪瘟（CSF）是由猪瘟病毒（CSFV）引起的一种急性、热性、高度接触性的传染病，也被称为“烂肠瘟”[2]。世界动物卫生组织将其定为A类传染病，我国将其列为一类动物传染病。猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起猪以繁殖障碍为主的动物传染病，也称为猪蓝耳病，我国将其列为二类动物传染病[3]。猪伪狂犬病（PR）是由猪伪狂犬病病毒（PRV）引起的多种家畜和野生动物以发热、奇痒（猪除外）及脑脊髓炎为主要症状的一种急性传染病[4]。世界动物卫生组织将其定为B类传染病，我国将其列为二类动物传染病。

本试验通过ELISA（酶联免疫吸附试验）方法，对贵阳市6个规模化猪场采集的576份血清样本，进行猪瘟病毒、猪蓝耳病病毒、猪伪狂犬病病毒gE蛋白、猪伪狂犬病病毒gB蛋白、猪O型口蹄疫病毒和猪A型口蹄疫病毒免疫抗体检测。旨在了解贵阳地区动物疫病的免疫效果，以期为贵阳市规模化猪场防控策略的制定提供参考数据。

1 材料与方法

1.1 血清样本

于2019年6—12月采集贵阳市6个规模化猪场猪血清样本576份病料。将6个规模化猪场依次编号为A～F，分别采集血清样本326份、40份、65份、30份、25份、90份。

1.2 免疫程序

猪瘟：仔猪28日龄首免，35、56日龄分别免疫1次，颈部肌肉注射，1头份/次；母猪每年4月、8月、12月15日各免疫1次，颈部肌肉注射，免疫剂量均为1头份/次。猪蓝耳病：仔猪15日龄（活疫苗）首免、35日龄（灭活苗）二免，1头份/次；母猪妊娠50 d后进行联合免疫，活疫苗2头份，灭活苗2 mL，母猪产后14 d（活疫苗）二免，免疫剂量为2头份。伪狂犬病：仔猪65日龄活疫苗免疫1头份；母猪妊娠30 d（活疫苗）、90 d（灭活苗）各免疫1次，免疫剂量活疫苗为1头份/次，2 mL/次。口蹄疫：仔猪50日龄疫苗（灭活苗）1 mL、70日龄疫苗（灭活苗）2 mL；母猪每年3月、6月、9月、12月各免疫1次灭活苗，免疫剂量均为2 mL/次。

1.3 检测试剂盒

猪O型口蹄疫病毒血清抗体ELISA检测试剂盒（液相阻断）、猪A型口蹄疫病毒血清抗体ELISA检测试剂盒（液相阻断）购自深圳市康百得生物科技有限公司；猪瘟病毒、猪蓝耳病病毒、猪伪狂犬病病毒gB蛋白、猪伪狂犬病病毒gE蛋白血清抗体ELISA检测试剂盒均购自无锡优联生物技术有限公司。

1.4 血清抗体检测及结果判断

猪群为150日龄到200日龄的后备母猪，在相应猪场疫苗免疫28 d后，无菌采集凝集血，分离血清。采用血清抗体ELISA检测试剂盒对A～F号猪场共576份血清样本进行猪瘟病毒和猪蓝耳病病毒抗体检测，对B、C、D号猪场135份血清样本进行猪O型口蹄疫病毒抗体检测，对B、C号猪场105份血清样本进行猪A型口蹄疫病毒抗体检测，对A、C、E号猪场的416份血清样本进行猪伪狂犬病病毒gB蛋白抗体检测，对A、B、C、E、F号猪场的546份血清样本进行猪伪狂犬病病毒gE蛋白抗体检测。检测结果判断参照试剂盒说明书进行判断血清样本的阴、阳性。

1.5 数据统计与分析

运用SPSS软件和Excel软件对血清抗体的检测结果进行统计和分析，计算样本的阴、阳性和离散度，离散度等于标准差（STDEV）比上平均数（AVERAGE）。

2 结果与分析

2.1 不同猪场猪瘟抗体的检测

从贵阳市6个规模化猪场共采集576份血清样本，采用ELISA进行检测猪瘟病毒血清抗体，结果见表1。

表1 不同猪场猪瘟病毒抗体ELISA检测结果

由表1可知，6个规模化猪场猪瘟抗体的平均抗体阳性率为94.62%，猪场A、B、C、D的抗体阳性率大于平均抗体阳性率，猪场E和F的抗体阳性率低于平均抗体阳性率，其中猪场E的抗体阳性率远低于农业农村部要求的70%。猪场A和C的抗体离散度相对较大，免疫水平相对不整齐。

2.2 不同猪场猪蓝耳病抗体的检测

从贵阳市6个规模化猪场共采集576份血清样本，采用ELISA进行检测猪蓝耳病病毒血清抗体，结果见表2。

表2 不同猪场猪蓝耳病病毒抗体ELISA检测结果

由表2可知，6个规模化猪场猪蓝耳病抗体的平均抗体阳性率为86.46%，猪场A、C、D的抗体阳性率大于平均抗体阳性率，猪场B、E、F的抗体阳性率低于平均抗体阳性率，其中猪场E、F的抗体阳性率低于农业农村部要求的70%。猪场B、D、F的抗体离散度相对较小，免疫水平相对比较整齐。

2.3 不同猪场猪伪狂犬病病毒gE抗体的检测

从贵阳市5个规模化猪场共采集546份血清样本，采用ELISA进行检测猪伪狂犬病病毒gE蛋白血清抗体，结果见表3。

表3 不同猪场猪伪狂犬病病毒gE抗体ELISA检测结果

由表3可知，在对5个规模化猪场猪伪狂犬病病毒gE抗体的检测中，猪场B出现了27份阳性样本，阳性率为67.50%（27/40）；猪场C出现了13份阳性样本，阳性率为20.00%（13/65）；猪场F出现了4份阳性样本，阳性率为4.44%（4/90）。猪场A、E未检测出血清抗体阳性样本。

2.4 不同猪场猪伪狂犬病病毒gB抗体的检测

从贵阳市3个规模化猪场共采集416份血清样本，采用ELISA进行检测猪伪狂犬病病毒gB血清抗体，结果见表4。

表4 不同猪场猪伪狂犬病病毒gB抗体ELISA检测结果

由表4可知，猪场A、C、E的猪伪狂犬病病毒gB血清抗体均大于农业农村部要求的70%的抗体阳性率，其中猪场C的抗体合格率最高达到了100%（65/65），其次是猪场A抗体合格率为99.69%（325/326），最低的是猪场E抗体合格率为76.00%（19/25）。

2.5 不同猪场猪O型口蹄疫抗体的检测

从贵阳市3个规模化猪场共采集135份血清样本，采用ELISA进行检测猪O型口蹄疫血清抗体，结果见表5。

表5 不同猪场猪O型口蹄疫抗体ELISA检测结果

由表5可知，对来自猪场B、C、D的135份血清样本进行猪O型口蹄疫抗体检测，猪场B和猪场C的抗体阳性率分别为97.50%（39/40）和100%（65/65），均大于农业农村部要求的70%的抗体阳性率；其中猪场D的抗体阳性率为66.67%（20/30）未达到农业农村部要求的70%的抗体阳性率。猪场B和猪场C的抗体阳性率均达到了95%以上且离散度相对比较低，整体免疫情况较好。

2.6 不同猪场猪A型口蹄疫抗体的检测

从贵阳市2个规模化猪场共采集105份血清样本，采用ELISA进行检测猪A型口蹄疫血清抗体，结果见表6。

表6 不同猪场猪A型口蹄疫抗体ELISA检测结果

由表6可知，对来自猪场B、C的105份血清样本进行猪A型口蹄疫抗体检测，猪场B和猪场C的抗体阳性率分别为92.50%（37/40）和100%（65/65），均大于农业农村部要求的70%的抗体阳性率。

3 讨论

本研究对贵阳市部分地区6个规模化猪场进行了猪瘟病毒、猪蓝耳病病毒、猪伪狂犬病病毒gB蛋白、猪O型口蹄疫病毒和猪A型口蹄疫病毒免疫抗体和猪伪狂犬病病毒gE蛋白感染抗体调查，结果显示免疫抗体阳性率分别为94.62%、86.46%、98.32%、91.85%和97.14%，感染伪狂犬病gE抗体阳性率为8.06%。说明贵阳市规模化猪场猪瘟、猪蓝耳病、猪伪狂犬病、猪O型口蹄疫和猪A型口蹄疫免疫抗体总体水平比较高，但是仍然有个别养殖场存在猪瘟、猪蓝耳病和猪O型口蹄疫免疫不合格，部分猪场存在猪伪狂犬病野毒感染的情况。

猪口蹄疫是我国强制免疫的病种，各级政府和动物防疫部门对该病都非常的重视。祖立闯等[5]统计了2007—2017年中国知网中发表的54篇针对我国不同地区的免疫抗体监测文献，其中有47篇文献报道的猪口蹄疫免疫抗体合格率≥70%，即有87.04%（47/54）的文献报道达到了国家强制免疫方案的要求，甚至有部分地区的免疫抗体合格率达到了95.0%，表明我国猪口蹄疫疫苗免疫状况整体较好。吕翠等[6]对2017年来源于全国25个省（市），448个猪场共13 449份血清进行了主要动物疫病的抗体检测，其中猪瘟抗体平均抗体合格率为80.3%，伪狂犬病野毒平均带毒率33.44%，伪狂犬病gB抗体平均合格率为92.86%，猪蓝耳病平均抗体合格率为78.05%。从以上数据并结合本试验的抗体检测结果，分析可知猪口蹄疫、猪瘟、猪蓝耳病、猪伪狂犬病的总体免疫水平都达到了国家农业农村部的要求，但是猪伪狂犬病野毒感染仍然很严峻，需要引起动物防疫部门和养殖场的高度重视，做好相关防控工作。

自2017年来，猪瘟和猪高致病性蓝耳病退出国家强制免疫病种，贵阳市根据区域动物疫病防控的实际情况，仍然将猪瘟列为强制免疫的动物疫病[7]。猪口蹄疫、猪瘟、猪蓝耳病、猪伪狂犬病对养猪业的影响非常大，尤其是在生猪养殖高度密集的规模化猪场，猪只一旦发病后果极为严重。猪场需要根据实际情况，制定适合自身的免疫程序，做好免疫抗体监测，加强免疫抗体评估。同时还应该做好猪蓝耳病和猪圆环病毒病等免疫抑制病的检测、选择适宜该地区流行的毒株核酸同源性较高的疫苗进行免疫，以避免疫苗免疫效果不好或免疫失败。目前是非洲猪瘟防控的关键时期，养殖场应重视猪场生物安全防护措施，严格执行生物安全规程，适时开展动物疫病净化工作。