四川省屏山县提升屠宰企业非洲猪瘟检测能力的实践与思考

柯玉洁，王 宾，李 成，牟 莉，吴玉疆

（1.屏山县动物疫病预防控制中心，四川屏山 645350；2.宜宾市动物疫病预防控制中心，四川宜宾 644000）

非洲猪瘟病毒（African swine fever virus，ASFV）感染动物后可导致高发病率、死亡率，为此我国将非洲猪瘟（African swine fever，ASF）列为一类动物疫病[1]。快速准确诊断ASF，防止病毒扩散，对其防控至关重要[2]。屠宰环节是生猪产销的重要环节，屠宰企业ASF 自检能力直接影响着能否有效阻断ASFV 在屠宰环节的传播。2019年，四川省屏山县5 家屠宰企业初步建立了ASFV检测实验室。经过1 年的实践与优化，通过提升实验室硬件设施建设水平、优化检测人员队伍、加强检测人员培训等措施，检测能力显著提升。本文对2019—2020 年县内5 家屠宰企业实验室基本情况开展调查与分析，并对提升屠宰企业ASFV 检测能力进行了若干思考，以期为其他地区屠宰企业提高ASF 检测能力提供参考。

1 问卷和现场调查

1.1 2019 年初建实验室硬件情况

屏山县共有5 家屠宰企业（企业名称A—E），其中持A 证1 家、持B 证4 家，均于2019 年初步建立了ASFV 检测实验室。除企业A 外，其他4家企业检测实验室均不是独立房间，未完全设置物理隔断，且C、D、E 企业检测实验室均与屠宰车间相连。实验室建设面积为10～20 m2，平均为14 m2；5 个实验室均配置了等温荧光定量PCR 仪、离心机、冰箱冰柜、储物柜和垃圾桶，但高压蒸汽灭菌锅、移动紫外灯等消毒设备和振荡器、水浴锅等其他设备均未配置（表1）。

1.2 2019 年初建实验室检测人员情况

5 家屠宰企业ASFV 检测实验室共配置5 名检测人员，以非专业人员为主，占比60.0%；检测人员以兼职为主，占比60.0%；学历以大专以下为主，占比80.0%；年龄结构偏中老年化，40 岁以上占比60.0%（表2）。

2 2019 年检测能力比对情况

2019 年开展1 次现场比对试验，设置5 个盲样，样品在比对前通过ASFV 荧光定量PCR 检测试剂盒（购自青岛立见诊断技术发展中心，批号040221901）进行验证，确认比对样品的真实性。比对所使用的PCR 仪、试剂和耗材均由各屠宰企业自备[3]。结果显示：阴性平均检出率为60.0%，阳性平均检出率为66.7%，阴阳对照平均检出率为90.0%，比对平均符合率为48.0%（表3）。结果表明，全县屠宰企业检测稳定性差，检测效果较为一般。

表1 2019 年屏山县屠宰企业ASFV 检测实验室硬件情况

表2 2019 年屏山县屠宰企业ASFV 检测实验室人员情况 单位：个

3 屠宰企业ASFV 检测实验室检测能力提升实践

3.1 措施

3.1.1 改造实验室硬件 一是领导重视。县分管领导多次现场督查屠宰企业ASFV 检测实验室工作，并督促企业进行硬件整改；二是指导迁址改建。县动物疫病预防控制中心到场指导屠宰企业实验室重新选址，屠宰企业配合指导意见，根据自身实际情况，进行实验室迁址改造；三是指导增购设备。县动物疫病预防控制中心和县动物卫生监督所每月到场监督，针对各屠宰企业实际情况，指导增购相应设备。

3.1.2 优化检测人员队伍 一是大力宣传。县动物疫病预防控制中心及时向屠宰企业传达ASFV 检测相关文件精神，并要求每家屠宰企业配备1 名全职检测人员；二是落实主体责任。要求屠宰企业通过社会招聘方式，配备实验检测人员。

3.1.3 加强检测人员培训 一是集中培训。县动物疫病预防控制中心召集实验检测人员和驻场官方兽医，针对PCR 原理、试验设备使用、试验操作流程和生物安全防护等内容开展集中理论培训，并现场解答试验操作中易出现的问题；二是到场指导。县动物疫病预防控制中心技术人员每季度到屠宰企业开展1 对1 现场实际操作培训，对检测过程中出现的问题进行针对性指导；三是试验比对。每年组织1～2 次检测能力比对，并在比对结束后，针对出现的问题及时现场分析并逐一提供解决措施。

3.2 成效

3.2.1 硬件改造情况 经过1 年多的实验室硬件升级改造，5 家屠宰企业ASFV 检测实验室均迁址改建，其中A 屠宰企业实验室从原后门门卫室旁改建到冻库后单独搭建的房间，并将原桌台和柜子换成了标准实验室桌台柜；B 屠宰企业实验室从原大门口改建到屠宰场1 楼办公室；C 屠宰企业实验室从屠宰车间旁改建到1 楼办公室；D 屠宰企业实验室从屠宰车间旁改建到2 楼办公室；E 屠宰企业实验室从屠宰车间旁改建到1 楼办公室。实验室均有独立且进行了简单分区的检测室，平均面积增加至22 m2。5 家企业均增购了相应设施设备（表4）：一是垃圾桶均增设至2 个，用于区分生物废弃物垃圾和普通垃圾；二是均增设了消毒设施，购买了消毒喷壶，并按照农业农村部印发的《非洲猪瘟疫情应急实施方案（2020 年版）》（农牧发〔2020〕10 号）附件《非洲猪瘟消毒规范》中内容，使用含氯消毒液喷洒地面，酒精擦拭实验桌台和设备进行消毒；三是均增设了设备，其中A 屠宰企业增设PCR 仪、紫外灯、高压灭菌锅、振荡器和水浴锅各1 台，现已基本符合《四川省生猪屠宰企业非洲猪瘟检测实验室建设及生物安全技术要求》；B 屠宰企业增设紫外灯和高压灭菌锅各1 台；C 屠宰企业增设PCR仪、紫外灯和高压灭菌锅各1 台；D 屠宰企业增设紫外灯1 台、煮沸消毒专用电磁锅炉1 套；E 屠宰企业增设煮沸消毒专用电磁锅炉1 套。

表3 2019 年屏山县屠宰企业ASFV 检测现场比对结果

表4 2020 年屏山县屠宰企业ASFV 检测实验室硬件改造情况

3.2.2 检测人员优化情况 经过1 年来的人员优化调整，检测人员增至8 个，其中专业人员5 个，占比由40.0%提升至62.5%，专业化占比增加；每家屠宰企业均配置了1 名以上全职检测人员，全职人员共6 人，占比由40.0%提升至75.0%，逐渐以全职为主；大专及以上学历占比从20.0%提升至37.5%，年龄40 岁以下的7 人，占比由40.0%提升至87.5%，年龄结构已向年轻化转变。具体见表5。

3.2.3 检测能力提升情况 自屠宰企业开展ASFV 检测以来，县动物疫病预防控制中心组织屠宰企业和驻场官方兽医开展检测技术集中培训4 次，到场指导25 次。2020 年再次进行了检测能力现场比对试验。结果（表6）显示：阴性检出率、阳性检出率、阴阳对照检出率和比对符合率均为100%，比对结果平均符合率由48.0%提升至100%，检测效果提升明显。

4 有关思考

4.1 做好督查、督导和督促，不断提升实验室硬件水平

一是各级领导不定期到屠宰企业督查发现和解决问题，不断强化屠宰企业对实验室硬件改造的重视程度；二是县动物疫病预防控制中心根据各屠宰企业实际情况，对检测实验室位置进行选址指导，一次性完成整改，减少企业成本；三是对硬件改造进度慢的屠宰企业，通过到场监督、下达《责令整改通知书》和责令停产等多形式进行督促整改。

表5 2020 年屏山县屠宰企业ASFV 检测实验室人员分布情况 单位：个

表6 2020 年屏山县屠宰企业ASFV 检测现场比对结果统计

4.2 多形式优化检测人员队伍，确保检测到位

一是宣传指导要到位。通过网络和到场指导的方式，将屠宰企业开展ASFV 自检的相关文件要求宣传到位；二是多举措保障检测人员数量。对于有经济实力的屠宰企业，可通过社会招聘的方式引进新检测人员。对于经济实力差的屠宰企业，可探索通过邀请亲友，经岗前培训合格后聘用，以稳定人员节约成本。

4.3 加强检测人员培训、检测比对和实验室管理指导

一是定期培训。到场培训能针对性地发现问题，如E 屠宰企业将阳性对照试剂加到阴性对照管中，并在加入后试图将加错的试剂吸出来，未重新配置阴性对照，导致阴性对照检测出阳性结果而失败；B 屠宰企业将检测试剂盒长时间室温放置，导致检测试剂酶活力下降，影响试验结果；A 屠宰企业PCR 仪未做好内外部去污等保养，仪器内部被阳性对照污染，导致试验出现假阳性结果。通过分析、及时解决问题，并结合集中理论培训，收到了较好效果。二是开展现场检测比对试验。2020年检测比对允许屠宰企业立即复检1 次，以排除心理因素等导致的失误，更接近于实际水平。三是定期抽检。县动物疫病预防控制中心定期检查屠宰企业的样品保存情况，并对环境样品及试验样品进行抽样检测。四是加强监管。在每月检查中要求屠宰企业完善实验室管理和生物安全制度，做好试验检测记录、消毒记录等相关资料，定期检查试验试剂及仪器设备，要求发现设备损坏及时维修，检查试剂盒是否过期并及时处理，定期清理检测样品和试验废弃物，做好实验室生物废弃物处理工作。