密蒙花胶囊对慢性阻塞性肺疾病模型大鼠气道重塑的影响

金韬 胡田魁 张建宏

摘要：目的 观察密蒙花胶囊对慢性阻塞性肺疾病（COPD）模型大鼠气道重塑的影响。方法 用烟熏和大鼠气管内注入脂多糖（LPS）的方法建立COPD模型，将雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、密蒙花胶囊高、中、低剂量组，共5组。正常对照组、模型对照组给予0.9%生理盐水灌胃，各给药组给予与0.9%生理盐水同体积的密蒙花胶囊灌胃，4周后进行支气管形态学观察、肺功能测量。结果 模型对照组大鼠支气管、肺组织改变符合COPD病理表现，与模型组比较，密蒙花胶囊高、中剂量组小支气管壁及平滑肌层厚度显著降低，FEV0.3/FVC显著升高（P<0.01），Re 、Ri显著降低（P<0.01）。结论 密蒙花胶囊能够减缓COPD大鼠气道重构，延缓或阻止COPD疾病的发生。

关键词：慢性阻塞性肺病;密蒙花胶囊;气道炎症;气道重塑

中图分类号：R285.5 文献标志码：A 文章编号：1007-2349（2021）03-0079-03

慢性阻塞性肺疾病（Chronic obsturctive pulmonary Disease，COPD.简称慢阻肺）是一种以不完全可逆性气流受阻为特征的渐进性疾病，气流受阻呈进行式发展，多与肺部对有害颗粒与气体的异常炎症反应有关[1]。慢阻肺是一种严重的呼吸系统疾病，患病人数多，病死率高，由于其缓慢进行性发展，严重影响患者的劳动力和生活质量。2018年中国成人肺部健康研究（CPHS）调查结果显示，我国慢阻肺患者人数9990万，已成为与高血压、糖尿病“等量齐观”的慢性疾病，构成我国重大疾病负担[2]。

目前，治疗慢阻肺以排痰，保持气道通畅为主要治疗手段，临床上以排痰剂（黏液溶解剂）、支气管舒张剂、糖皮质激素等药物治疗及吸氧、机械通气等疗法为主，虽然在一定程度上延迟疾病的发展，但不能从根本上改变患者的预后。由于COPD是多因素导致的复合疾病，现有单一活性成分的西药都无法逆转COPD的进程，疗效不能让人满意。因此，从中国传统中医药中开发，探寻治疗COPD的药物具有重大的现实意义。

在进行民族民间医药调研中，我们发现中药密蒙花（Buddleja officinlis Maxim）对COPO患者具有较好的治疗作用，经对患者疾病診断，用药情况进行核实，确认密蒙花在改善COPD患者症状方面具有显著的疗效，且无密蒙花在慢阻肺疾病治疗的文献报到。因此立项开展密蒙花治疗COPD的药理实验，以评价该药治疗COPD的疗效和治疗前景。

1 材料与方法

1.1 试剂与药物 密蒙花胶囊 本公司自制。香烟：市售红河牌香烟，焦油量13mg，气烟碱量1.3mg。脂多糖（LPS）：上海源叶生物有限公司。戊巴比妥钠：北京索莱宝科技有限公司。

1.2 仪器 试验动物肺功能分析系统：北京贝兰博科技有限公司;光学显微镜：上海光学仪器一厂;轮转式石蜡切片机：深圳市汇沃科技有限公司。

1.3 分组及方法 健康SD大鼠50只，雄性，体重（200±23）g，购自昆明医科大学实验动物中心。将大鼠随机分为组5组，即正常对照组、模型组及密蒙花胶囊高、中、低计量组，每组各10只。参照文献[3]烟熏加LPS造模，于模型复制的第1、14 d，除正常对照组外，其余各组用戊巴比妥钠麻醉大鼠后，打开其颈部，暴露气管，用1 mL注射器向气管内注入脂多糖（LPS）各0.2mL，（200μg/200mL），在皮肤伤口处滴入青霉素注射液，然后缝合皮肤并用碘酒棉球消毒。第2～13 d，15～28 d每日上午在75L密闭箱内熏红河牌香烟0.5h。给药，正常对照组、模型对照组灌服0.9%生理盐水10mL/kg，1次/d;密蒙花胶囊高剂量组灌服密蒙花胶囊（相当于临床成人剂量的10倍）：22.8 g/kg，2.28 g/mL;密蒙花胶囊中剂量组灌服密蒙花胶囊（相当于临床成人剂量的5倍）：11.4 g/kg，1.14 g/mL;密蒙花胶囊低剂量组灌服密蒙花胶囊（相当于临床成人剂量的2.5倍）：5.7 g/kg，0.57 g/mL。5组均连续灌胃28 d，灌胃结束第2 d，测定各项指标。

1.4 观察指标

1.4.1 支气管形态学测量 大鼠处死后，取左肺上叶位置于10%中性福尔马林溶液中固定。酒精梯度脱水，二甲苯透明标本，浸蜡，包埋，切片，HE染色，用图像分析系统测量小支气管管径、管壁及平滑肌层厚度。

1.4.2 肺功能测定 以戊巴比妥钠麻醉大鼠，气管插管，放入箱内，记录大鼠8个自主呼吸周期，获得气道压力（P）、容积（V）变化，相应计算得到肺呼气阻力（Re）、肺吸气阻力（Ri）。之后，经三通管快速向大鼠气道内注入6mL空气造成大鼠被动深呼吸，即可测定用力肺活量（FVC）、第0.3用力呼气量（FEV0.3，相应于人的FEV1），得出其比值FEV0.3/FVC。

1.5 统计学方法 采用SPSS22.0软件对相关数据进行统计学处理，数据以x2±s表示，多组间比较用方差分析，两组间比较采用LSD-t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 支气管形态学测量 随机选取支气管HE切片中较规整的小支气管，每个标本选3～6个支气管横切面积，采用图像分析系统进行计算：管壁总面积（WAt）=气道外壁所围面积（Ao）-管壁内侧的面积（Ai）;平滑肌层面积（WAsm）=平滑肌层外侧面积（Asmo）-平滑肌层内侧面积（Asmi）。以管壁内周长（Pi）进行标准化，结果以单位长度的管壁面积（WAt/Pi）表示管壁厚度，以单位长度的平滑肌层面积（WAsm/Pi）表示平滑肌层厚度。结果模型组大鼠小支气管壁和平滑肌层较对照组明显增厚（P<0.01），并伴有肺气肿的发生，说明COPD大鼠存在小气道组织结构的改变。经治疗后，密蒙花胶囊高、中剂量组大鼠小支气管壁及平滑肌层厚度较模型组显著降低（P<0.01）。支气管形态学测量结果见表1。

2.2 肺功能测量 与正常对照组比较，模型组大鼠FEV0.3/FVC显著降低（P<0.01），Re、Ri显著升高（P<0.01），提示模型大鼠有气流阻塞。与模型组比较，密蒙花胶囊高、中剂量组大鼠FEV0.3/FVC显著升高（P<0.01），Re 、Ri显著降低（P<0.01）。大鼠肺功能测定结果见表2。

3 讨论

本研究以香烟烟熏加气管注入脂多糖（LPS）建立COPD模型，结果发现：气道重塑主要的病理形态学改变是以胶原为主的细胞外基质沉积[3]，本实验中，模型组大鼠小支气管壁和平滑肌层较空白对照组明显增厚（P<0.01），并伴有肺气肿的发生，说明COPD大鼠存在小气道组织结构的改变。治疗组中，密蒙花胶囊高、中剂量组大鼠小支气管壁及平滑肌层厚度较模型组显著降低，提示其具有明显的抑制胶原合成减少气道周围胶原沉积，干预COPD大鼠气道重塑的作用。

密蒙花为马钱科植物，又名小锦花、黄饭花、鸡骨头花、染饭花等[5]，主要分布于我国西南及中南地区，资源十分丰富。该药始载于《开宝本草》，为中国药典收载品种，主要用于目赤肿痛，多泪羞明，眼生翳膜，肝虚目暗，视物昏花等症[6]，是传统中药材中重要的眼科用药。现代研究表明，密蒙花主要化学成分为刺槐苷、密蒙花苷、密蒙花萜苷A、B梓苷等类化合物[7]，具有抗炎、抗氧化、抑制醛糖还原酶及乙酰胆碱酯酶等作用及潜在预防和延缓糖尿病并发症的效果[8]。通过本研究证实，密蒙花对COPD具有潜在治疗作用。鉴于COPD的形成是由多因素参與的、复杂的慢性病理改变过程，任何针对单一因素的治疗不会有力地改变COPD病理进程，而中药具有多靶点、多因素、多环节的作用特点，使得中药在治疗COPD上具有天然优势。密蒙花治疗COPD值得进一步深入研究开发。

参考文献：

[1]中华医学会呼吸病学分会慢性阻塞性肺疾病学组.慢性阻塞性肺疾病诊治指南（2007 年修订版）[J].中华结核和呼吸杂志，2007，30（1）：8-17.

[2]Wang C，Xu J，Yang L，et al.Prevalence and Risk Factors of Chronic Obstructive Pulmonary Disease in China（the China Pulmonary Health[Cph]Study）：A National Cross-Sectional Study.The Lancet，2018，391：1706-17.

[3]宋一平，崔德健，茅培英，等.慢性阻塞性肺疾病大鼠模型的建立及药物干预的影响[J].中华内科杂志，2000，39（8）：556-557.

[4]GONZALEZ-AVILA G，BAZAN-PERKINS B，SANDOVAL C，et al.interstitial collagen turnover during airway remodeling in acute and chronic experimental asthma[J].Experimental and Therapeutic Med-icine，2016，12（3）：1419-1427.

[5]郭雷，朱文成，刘超，等.密蒙花化学成分及生物活性研究进展[J].食品研究与开发，2012，33（7）：222-225.

[6]国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].一部.北京：中国医药科技出版社，2015：329.

[7]李经纬.《中医大词典》[M].2版.北京：人民卫生出版社，2004.1659.

[8]HAN P，CUI Y J，GUO H Z，et al.Chemical constituents ofBuddleia officinalis and their bioactivities[J].Chin Tradit HerbDrugs（中草药），2004，35（10）：1086-1090.

（收稿日期：2020-09-10）