寻常痤疮患者BDNF/TrkB通路相关蛋白变化与抑郁的相关性研究

周静芳 王岩军 宋淑红 郄永涛 张丹

[关键词]寻常痤疮;脑源性神经营养因子;酪氨酸激酶受体B;抑郁;相关性

寻常痤疮是一种多因素疾病，与毛囊、皮脂腺相关，可发生炎性和非炎性病变[1-2]。其发病机制归因于皮脂分泌增加，炎症过程，滤泡过度增殖和痤疮丙酸杆菌的增殖[3]。导致痤疮患者的身体及心理健康受到影响。有研究显示，一部分面部痤疮患者出现不同程度的抑郁，神经内分泌自身免疫功能障碍和紊乱，皮肤炎症反应增强T细胞浸润水平是几种机制之一[4]，这被认为可能是潜在的原因连接寻常痤疮与焦虑和抑郁，但确切的机制仍然缺乏依据。很多研究表明脑源性神经营养因子（Brain derivedneurotrophic factor，BDNF）/酪氨酸激酶受体B（Tyrosinekinase re-ceptor B，Trk B）途径可以调节一些神经递质[5]，这条通路已经牵连到了病理生理学和抑郁症的临床治疗。本研究旨在分析血清BDNF、TrkB水平差异对寻常痤疮患者严重程度的影响及其与患者抑郁状况的相关性，现报道如下。

1 资料和方法

1.1 临床资料：选择2016年1月-2018年1月笔者科室收治的200例寻常痤疮患者为研究对象，设为观察组。纳入标准：①符合《中国临床皮肤病学》的诊断标准;②年龄15～45岁;③入组前4周未进行抗抑郁治疗;④患者及家属知情同意。排除标准：①合并有恶性肿瘤及其他严重疾病者等;②由化学物质或者药物引起的职业性痤疮或药物性痤疮等;③服用过异维A酸治疗者。同时收集笔者医院同期健康体检者51例为对照组，两组临床资料比较无统计学差异（P >0.05），见表1。

1.2 评估方法：本次研究采用汉密顿抑郁量表（HamiltonDepression Scale，HAMD）及抑郁自评量表（Self-ratingdepression scale，SDS）[6]对两组研究对象治疗前后抑郁情况进行测定，分数越高抑郁程度越高。

1.3 检测方法：采集所有研究对象清晨时的空腹静脉血5ml，室温血液自然凝固15min后，3 000r离心5min后收集上清液，将内含细胞的沉淀物加入PMSF液制备细胞裂解液，采用BCA法测定蛋白的浓度，取细胞裂解液到样品孔中，用Westernblot法测定BDNF、TrkB蛋白水平，进行SDS-PAGE凝胶电泳，转膜、封闭，分别加入BDNF（稀释浓度1：50）、TrkBa（稀释浓度1：200）一抗，4℃孵育过夜，随后用PBS洗涤清洗3次，每次5min，随后分别加入加辣根过氧化物酶标记山羊抗兔二抗（稀释浓度1：800），在室温下置于摇床孵育1h，孵育后再同样用PBST清洗3次，内参使用的是β-actin，进行ECL检测，显影。使用QuantityOne 5.0软件对BDNF和TrkB的光密度值进行分析，并对BDNF和TrkB相对表达量进行计算。

1.4 判断标准：①抑郁自评量表（SDS）：量表有20项问题，由患者根据自己目前心理情绪状况作出回答，主要评定症状出现的频度，评分>41分为抑郁;②汉密顿抑郁量表（HAMD）：用于对情绪进行评估，一般在10～15min完成，包括17个项目条例，超过24分为研究对象严重抑郁;8～24分为研究对象有轻度到中度抑郁;低于7分为研究对象无抑郁症状;③痤疮分级：Ⅰ级为仅有粉刺，Ⅱ级为有炎性丘疹，Ⅲ级为出现脓疱，Ⅳ级为有结节、囊肿。

1.5 统计学分析：采用SPSS 22.0软件进行分析，计量资料采用x?±s表示，行t 检验，多组间比较采用方差分析，两两比较采用LSD-t 检验;基数资料行χ2检验;采用Pearson进行相关性分析。P <0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清BDNF、TrkB水平：观察组BDNF水平明显低于对照组，而TrkB明显高于对照组，具有统计学意义（P <0.05），见表2。

2.2 观察组不同分级患者血清BDNF、TrkB水平比较：随着病情加重，患者血清BDNF水平明显降低（P <0.05），而TrkB水平明显升高（P <0.05）;观察组Ⅳ级患者血清DNF水平明显低于Ⅰ级、Ⅱ级和Ⅲ级患者，而TrkB水平明显高于Ⅰ级、Ⅱ级和Ⅲ级患者，差异比较有统计学意义（P<0.05），见表3。

2.3 观察组不同分级患者SDS、HAMD评分比较：随着病情加重，患者SDS、HAMD评分明显升高（P <0.05），观察组Ⅳ级患者SDS、HAMD评分明显高于Ⅰ级、Ⅱ级和Ⅲ级患者，差异比较有统计学意义（P <0.05），见表4。

2.4 相关性分析：将观察组血清BDNF、TrkB水平与SDS、HAMD评分进行相关分析，结果显示：血清BDNF与SDS、HAMD评分呈负相关（r =-0.462和-0.431，P <0.05），血清TrKB与SDS、HAMD评分呈正相关（r =0.337和0.342，P <0.05）。

3 讨论

有关寻常痤疮患者抑郁的研究已成为皮肤病研究中的热点，近年来，国外相关研究将痤疮患者抑郁等心理状况改善作为评价治疗效果的标准之一。

BDNF作为神经营养因子家族中最具代表性的成员之一，有着促进神经元修复、轴突再生及调节突触可塑性和传递神经递质等功能，是脑源性神经营养因子的特异性受体[8-9]。BDNF的作用必须通过TrkB受体酪氨酸磷酸化来实现。已有研究表明，BDNF或TrkB均与痤疮存在密切联系，但关于两者联合对寻常痤疮患者进行的研究较少[9]。抑郁与海马及其周围部位损伤会导致突触联系中断，BDNF可以与其受体TrkB蛋白相结合，并逆转突触的丢失，促进海马神经的再生[10]。在此基础上，其还能够改善细胞信号的传导，进而稳定基因的表达，减轻抑郁程度。从本次研究结果可见，观察组患者的BDNF水平明显低于对照组，而TrkB水平显著高于对照组。分析原因是，当人体产生焦虑等信号后，将刺激垂体-肾上腺体系，引起肾上腺皮质激素大量分泌，大量肾上腺素进入人血液后，使硫酸脱氢表雄酮-游离睾酮等的合成增加，硫酸脱氢表雄酮-游离睾酮水平失衡将加重皮质的损伤[11]。随着病情加重，观察组Ⅳ级患者血清BDNF水平明显低于Ⅰ级、Ⅱ级和Ⅲ级患者，观察组Ⅳ级患者TrkB水平明显高于Ⅰ级、Ⅱ级和Ⅲ级患者，提示BDNF和TrkB参与了痤疮的病理过程，这也证实了血清BDNF和TrkB水平能够作为寻常痤疮的生物学标记物。

将观察组血清BDNF、TrkB水平与得到的SDS、HAMD分值进行分析，寻常痤疮患者血清BDNF与SDS、HAMD评分呈负相关，TrkB水平与SDS、HAMD评分呈正相关。发现痤疮严重者的HAMD和SDS评分值高于较轻者，中重度痤疮患者更易引起焦虑和抑郁。结果提示，由于机体BDNF可穿过血脑屏障，外周血的BDNF浓度可在一定程度反映脑组织中BDNF水平，而海马、前额叶皮质等脑组织中BDNF水平与抑郁的密切联系已经在大量实验中得到证实。近年来，研究者们认为血清BDNF水平可作为抑郁疾病的生物学指标[12]。BDNF在人血清中含量很高。过去的临床经验一致报道了抑郁症患者的BDNF水平低于健康人，这种降低在一些病例中是和特定的抑郁评定量表的高分值相关的，且抑郁症患者的TrkB水平是高于正常人的。而给予抗抑郁治疗后，血清中BDNF水平出现了显著的升高趋势，TrkB水平降低[13]。在临床实践中，这种血清学检测方法可能成为一种对寻常痤疮者患者病情及预后判断有重要参考价值的，方便、可靠的检测手段。

本次研究对寻常痤疮患者进行抑郁等心理评估，檢测患者血清BDNF、TrkB水平，并对其水平与SDS、HAMD评分进行相关性分析，为探究其发生、发展的因素以及对病情治疗及预后判断提供重要参考。寻常痤疮患者血清BDNF降低，而TrkB水平升高，与患者抑郁状况有一定关系，值得进一步研究。