循环血miR类指标在脓毒症中的变化及与严重程度的关系分析

王滨　张宪华　徐志伟

【摘要】 目的：探究循環血miR类指标在脓毒症中的变化及其与严重程度的关系，以为脓毒症的临床诊治提供参考依据。方法：选取2019年6月-2021年2月本院收治的90例脓毒症患者为观察组，同时期的90名健康者为对照组。比较对照组和观察组的循环血miR类指标（miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107）表达量，同时比较观察组中不同病因（肺部感染、腹腔感染及其他病因）及严重程度（脓毒症、严重脓毒症及脓毒性休克）者的上述循环血miR类指标表达量，采用Spearman秩相关分析上述循环血miR类指标与脓毒症严重程度的关系。结果：观察组的循环血miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107表达量均显著高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。观察组中不同病因者的循环血miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107表达量比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。观察组中不同严重程度者的循环血miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107表达量比较，差异均有统计学意义（P<0.05）;脓毒性休克者的上述循环血miR类指标表达量均显著高于脓毒症者及严重脓毒症者，严重脓毒症者的上述循环血miR类指标表达量均显著高于脓毒症者，差异均有统计学意义（P<0.05）。Spearman秩相关分析显示，循环血miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107均与脓毒症严重程度呈正相关（P<0.05）。结论：循环血miR类指标在脓毒症中呈现异常表达的状态，且与脓毒症严重程度密切相关，在脓毒症患者中的检测价值较高。

【关键词】 循环血miR类指标 脓毒症 严重程度 病因

[Abstract] Objective： To explore the changes of circulating blood miR indexes in sepsis and its relationship with severity， so as to provide reference for clinical diagnosis and treatment of sepsis. Method： A total of 90 patients with sepsis admitted to our hospital from June 2019 to February 2021 were selected as the observation group， and 90 healthy subjects during the same period were selected as the control group. The expression levels of circulating blood miR indexes （miR-155-5p， miR-326， miR-223， miR-146a and miR-107） were compared between the control group and the observation group. At the same time， the expression levels of above circulating blood miR indexes in the observation group were compared with different etiologies （pulmonary infection， abdominal infection and other etiologies） and severity （sepsis， severe sepsis and septic shock）. Spearman rank correlation was used to analyze the relationship between the above circulating blood miR indexes and the severity of sepsis. Result： The expressions of miR-155-5p， miR-326， miR-223， miR-146a and miR-107 in the observation group were significantly higher than those in the control group， the differences were statistically significant （P<0.05）. There were no significant differences in the expression of miR-155-5p， miR-326， miR-223， miR-146a and miR-107 in patients with different etiologies of the observation group （P>0.05）. The expressions of miR-155-5p， miR-326， miR-223， miR-146a and miR-107 in patients with different severity in the observation group were compared， the differences were statistically significant （P<0.05）. The expression of above circulating blood miR indexes in septic shock group were significantly higher than those in sepsis group and severe sepsis group， the expression levels of above circulating blood miR indexes in severe sepsis were significantly higher than those in sepsis， the differences were statistically significant （P<0.05）. Spearman rank correlation analysis showed that miR-155-5p， miR-326， miR-223， miR-146a and miR-107 in circulating blood were positively correlated with the severity of sepsis （P<0.05）. Conclusion： Circulating blood miR indexes in sepsis showed abnormal expression， and is closely related to the severity of sepsis， which has high detection value in sepsis patients.

[Key words] Circulating blood miR indexes Sepsis Severity Etiology

First-authors address： Shenzhen Second Peoples Hospital， Shenzhen 518035， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2021.19.004

脓毒症主要为由于感染所致的全身炎症反应，患者的病情凶险，病死率较高，因此脓毒症是临床重点研究方面。临床中与脓毒症相关的研究中，miR相关指标是近年来在脓毒症中研究较多的指标，其中miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107等均是在脓毒症中研究较多的miR类指标，但也是在脓毒症中研究差异较多的指标，因此进一步细致探究的需求较高[1-2]。另外，上述miR指标作为与机体免疫、炎症状态等密切相关的指标，进一步研究其与感染及炎性反应疾病包括脓毒症的意义较高[3-4]。本研究就循环血miR类指标在脓毒症中的变化及其与严重程度的关系进行探究与分析，以为脓毒症的临床诊治提供参考依据，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2019年6月-2021年2月本院收治的90例脓毒症患者为观察组，同时期的90名健康者为对照组。（1）纳入标准：20～65岁者;男女不限;对照组为体检健康者，观察组为脓毒症者。（2）排除标准：合并创伤者;妊娠期者;合并代谢性疾病者;合并自身免疫性疾病者;合并高血压、糖尿病等慢性疾病者;发病前存在凝血异常者;临床资料不完整者。患者和/或家属对研究知情同意，本研究经医院伦理学委员会批准。

1.2 方法 采集对照组和观察组的外周静脉血标本，血标本采集量为5 mL，采用医用离心机将其进行离心（半径15 cm，速度3 000 r/min，时间

5 min），采集离心后的上清液進行miR类指标的检测，检测指标为miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107，提取血清总RNA，逆转录合成cDNA反应液，采用实时荧光定量PCR法进行操作检测，采用2-ΔCt进行计算，得出上述指标的表达量。上述检测由两名经验丰富者严格按照标准进行操作检测。

1.3 观察指标 统计及比较对照组和观察组的循环血miR类指标（miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107），同时比较观察组中不同病因（肺部感染、腹腔感染及其他病因）及严重程度（脓毒症、严重脓毒症及脓毒性休克）者的上述循环血miR类指标表达量，采用Spearman秩相关分析上述循环血miR类指标与脓毒症严重程度的关系。

1.4 统计学处理 采用SPSS 23.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用（x±s）表示，比较采用t检验，多组数据比较采用方差分析;计数资料以率（%）表示，比较采用字2检验。相关性分析采用Spearman秩相关分析，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组一般资料比较 对照组中男50名，女40名;年龄25～65岁，平均（43.3±6.7）岁。观察组中男51例，女39例;年龄25～63岁，平均（43.6±6.6）岁;病因：肺部感染者35例，腹腔感染者35例，其他20例;严重程度：脓毒症者39例，严重脓毒症者36例，脓毒性休克者15例。两组的性别、年龄比较，差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

2.2 两组的循环血miR类指标表达量比较 观察组的循环血miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107表达量均显著高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05），见表1。

2.3 观察组中不同病因者的循环血miR类指标表达量比较 观察组中不同病因者的循环血miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107表达量比较，差异均无统计学意义（P>0.05），见表2。

2.4 观察组中不同严重程度者的循环血miR类指标表达量比较 观察组中不同严重程度者的循环血miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107表达量比较，差异均有统计学意义（P<0.05）;脓毒性休克者的上述循环血miR类指标表达量均显著高于脓毒症者及严重脓毒症者，严重脓毒症者的上述循环血miR类指标表达量均显著高于脓毒症者，差异均有统计学意义（P<0.05）。见表3。

2.5 循环血miR类指标与脓毒症严重程度的关系分析 Spearman秩相关分析显示，循环血miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107均与脓毒症严重程度呈正相关（P<0.05），见表4。

3 讨论

脓毒症在临床并不乏见，对患者的危害极大。患者可表现出全身的炎性反应，严重者可导致多器官功能障碍及循环方面的异常，病死率较高，且存活者的并发症发生率较高，因此脓毒症是临床诊治与防控的重点[5-6]。临床中与脓毒症相关的研究众多，其中关于疾病发生发展及严重程度相关指标的研究是热点。miR类指标研究较多，但研究结果差异相对显著，同时为研究涉及面较广的一类指标，其多见于脓毒症发病机制的研究中[7-9]，与脓毒症严重程度的关系研究极为匮乏，导致其在脓毒症诊治方面的参考价值仍有待进一步探究。miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107等作为在脓毒症中研究较多的miR类指标，其在脓毒症患者中更为细致全面的探究意义相对更高。miR-155-5p作为在体液免疫调节中作用较强的指标，其受病毒、细菌感染的诱导作用，呈现高表达状态，且对TNF等指标具有反馈性调节作用[10];miR-326则主要为通过调控靶基因来达到影响多种细胞因子表达的作用，在炎性反应与免疫调节方面均有较强的作用[11];miR-223则主要为通过调节免疫细胞的分化、成熟及增殖等方面来达到影响机体免疫的作用，并对机体炎性反应状态起到一定影响作用[12];miR-146a则在机体感染过程中发挥促进促炎因子表达的作用，同时其还对免疫耐受及逃逸等多方面起到干预的作用，因此在脓毒症等感染性疾病中的检测意义较高[13];miR-107是与炎性反应相关的指标，除此之外，其对于肾脏损伤等多方面也有一定的反应作用[14]，但是其对于脓毒症严重程度的影响研究未见。

本研究就循环血miR类指标在脓毒症中的变化及其与严重程度的关系进行探究，结果显示，脓毒症患者的循环血miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107表达量均显著高于健康同龄者，不同病因者的上述循环血miR类指标表达量差异并不显著，而不同严重程度者的上述循环血miR类指标表达量差异显著，Spearman秩相关分析显示，循环血miR-155-5p、miR-326、miR-223、miR-146a及miR-107均与脓毒症严重程度呈正相关（P<0.05），因此肯定了上述循环血miR类指标在脓毒症患者中的检测价值及与脓毒症严重程度的关系。分析原因，脓毒症是由于感染所致的炎性反应，机体应激性的免疫变化也相对突出，而上述miR类指标在机体的上述感染、炎性反应及免疫状态变化中起到较强的影响作用[15-17]，因此其表达相对异常，且越为严重的患者，其上述应激反应程度越为严重，机体的上述方面也越为异常[18-23]，故认为上述循环血miR类指标在本类患者中的检测价值较高，对于脓毒症严重程度的检测意义也较高。

综上所述，笔者认为循环血miR类指标在脓毒症中呈现异常表达的状态，且与脓毒症严重程度密切相关，在脓毒症患者中的检测价值较高。

参考文献

[1]杨珍，张艳敏，王倩倩，等.微小RNA-103及RNA-107表达与120例脓毒症患者临床特征及预后的关联分析[J].山东大学学报（医学版），2020，58（12）：77-85，91.

[2]刘红新，孟舰，武小娟，等.血必净注射液辅助治疗对脓毒症患者病情及微小高迁移率族蛋白B1、微小RNA-223表达的影响[J].解放军医药杂志，2021，33（2）：93-96.

[3]闫玉荣.MicroRNA-223抑制NLRP3炎症小体和TLR4/NF-κB信号通路减轻急性肺损伤炎症反应[D].济南：山东大学，2020：30-36.

[4]刘凯，贾玲玲，刘倩，等.miR-155-5P在脓毒症急性肺损伤时调控肺泡巨噬细胞IL-6、MIP-2的表达对中性粒细胞迁移的影响[J/OL].中华重症医学电子杂志（网络版），2020，6（2）：198-205.

[5]杨家伟，胥亚福，谢新，等.脓毒症患儿外周血miR-146a、miR-223的水平变化及意义[J].山东医药，2020，60（19）：57-60.

[6]杜斌，夏奇奂，卢跃，等.血清微小RNA-155-5p对脓毒症急性肝损伤患者预后的评估价值分析[J].中国医师进修杂志，2020，43（5）：397-400.

[7]李大勇，刘冠兰，袁新科.脓毒症合并急性肾损伤患者血清miR-21、miR-233和miR-107的表达水平及临床意义[J].热带医学杂志，2018，18（12）：1580-1584.

[8]邱玉霞，孙月玲，宫保强，等.miR-146a及APACHE Ⅱ评分预测脓毒症并发急性肾损伤患者28天死亡的价值[J].中国急救医学，2020，40（10）：943-946.

[9] Chen L，Yu L，Zhang R，et al.Correlation of microRNA-146a/b with disease risk， biochemical indices， inflammatory cytokines， overall disease severity， and prognosis of sepsis[J].Medicine （Baltimore），2020，99（22）：19754.

[10]杨晓梅，杭敏，许磊，等.脓毒症患者血清ESM-1、D-D、miR-155-5p、PCT的变化与患者预后的关系[J].医学临床研究，2019，36（4）：759-761.

[11]马海艳，刘学文，付盈菊，等.脓毒症患者外周血miR-326与miR-370-3p表达及其意义[J].中华医院感染学杂志，2021，31（4）：481-483.

[12]闫春江，黎永琳，李燕，等.血必净注射液对脓毒症患者血清miR-223及高迁移率族蛋白B1表达的影响[J].疑难病杂志，2019，18（3）：243-246.

[13]杨燕娣，排孜来提·阿布力孜，张会云，等.miR-146a在脓毒症相关性急性肺损伤中的表达及其早期诊断价值[J].实用休克杂志（中英文），2020，4（4）：215-218.

[14]穆红，杨磊.脓毒症相关微小RNA标志物功能机制研究进展与诊疗价值[J].中华检验医学杂志，2019，42（12）：1007-1013.

[15] Xie J，Zhang L，Fan X，et al.MicroRNA-146a improves sepsis-induced cardiomyopathy by regulating the TLR-4/NF-κB

signaling pathway[J].Exp Ther Med，2019，18（1）：779-785.

[16] Tong L，Tang C，Cai C，et al.Upregulation of the microRNA rno-miR-146b-5p may be involved in the development of intestinal injury through inhibition of Kruppel-like factor 4 in intestinal sepsis[J].Bioengineered，2020，11（1）：1334-1349.

[17]韓成须.脓毒症患者病情及预后评估中血清微小RNA-155联合IL-35水平检测的临床价值[J].山西卫生健康职业学院学报，2020，30（3）：17-19.

[18]郑燕玲，张应魏，邓小彦.连续性肾脏替代治疗对脓毒症患者外周血部分T淋巴细胞，miRNA-155和miRNA-466表达的影响[J].贵阳医学院学报，2020，45（4）：451-455，460.

[19] Lin Y，Ding Y，Song S，et al.Expression patterns and prognostic value of miR-210， miR-494， and miR-205 in middle-aged and old patients with sepsis-induced acute kidney injury[J].Bosn J Basic Med Sci，2019，19（3）：249-256.

[20]沈业周，余娇阳，周飞，等.脓毒症患者外周血微小RNA-155和CD4+CD25+ Treg细胞表达水平及意义[J].中国老年学杂志，2019，39（13）：3211-3213.

[21]王华，王莉，郭东风.脓毒症患者血浆微RNA-146a表达与患病风险，炎性因子水平及预后的相关性分析[J].第二军医大学学报，2020，41（2）：135-140.

[22]黄林枫，熊岚，吴奎，等.脓毒症患儿血浆miR-146a、miR-223表达与IL-6、IL-10、TNF-α水平变化的临床意义分析[J].现代生物医学进展，2017，17（32）：6323-6327，6344.

[23]张红玉，王佳，孙晓靖.血清微小RNA-155联合IL-35水平检测对脓毒症患者病情及预后的评估价值[J].山东医药，2018，58（29）：12-16.

（收稿日期：2021-05-31） （本文编辑：姬思雨）