TN-C和Ki-67的表达与非小细胞肺癌临床病理特征的相关性

司 华 闫 灿 曾宪焕

相关癌症调查报告显示：2018年肺癌新发病例及死亡病例均居恶性肿瘤第一位，而原发性肺癌中非小细胞肺癌占比达到80%左右，其治疗方式主要以手术治疗、放疗、化疗以及联合治疗等[1-2]。近年来，基因分子药物的应用为肺癌的治疗提供了新思路，因此其新的生物标志物的寻找以及在此基础上采取靶向药物的治疗是未来肺癌治疗的研究重点[3]。细胞外间质韧黏素-C(Tenascin-C,TN-C)属于细胞外机制糖蛋白，在炎性反应中高表达，可调节细胞增殖与分化，在恶性肿瘤发生、进展过程中也呈高表达[4]。Ki-67是与细胞周期调控密切相关的蛋白，在大多数肿瘤发生、发展以及患者预后评估中至关重要，相关研究显示，其可能在NSCLC转移及肿瘤细胞侵袭过程中具有重要作用[5-6]。但目前这两个指标的表达与非小细胞肺癌临床病理学特征相关研究仍为该肿瘤的热点。

1 材料与方法

1.1 一般资料

选择南阳市第二人民医院2017年12月至2019年12月收治的459例非小细胞肺癌患者作为本次研究对象，所有患者均经临床病理学证实为非小细胞肺癌。收集所有患者手术后病理组织样本。所有患者中，男性324例，女性135例；年龄30～76岁，平均(49.71±4.22)岁；组织学类型：鳞癌243例，腺癌216例；分化程度：高度分化94例，中度分化202例，低度分化163例；肿瘤位置：周围型238例，中央型221例；转移情况：淋巴结转移158例，无转移例301；肿瘤直径：1～7 cm，平均(2.83±0.63)cm；TMN分期：Ⅰ期～Ⅳ期。

1.2 免疫组化检测TN-C和ki-67阳性表达

取非小细胞肺癌患者病理组织标本，常规病理学切片，然后采用TN-C和ki-67免疫组化试剂盒(购自美国Thermo fisher Scientific)进行染色，具体步骤根据试剂盒说明进行操作，最后DBA显色，显微镜下观察并拍照。

蛋白阳性判定标准[5]：①阴性(-)：胞核与胞质中均无明显棕黄色颗粒出现；②弱阳性(+)：胞核或胞质中出现明显棕黄色小颗粒；③中阳性(++)：胞核或胞质中出现明显棕黄色大颗粒；④强阳性(+++)：胞核或胞质中出现明显棕褐色大颗粒。判定结果：阳性：(++)、(+++)和(+)例数之和；阴性：(-)例数。

1.3 统计学方法

采用SPSS 22.0进行数据处理和分析，计数资料以率(%)表示，比较采用卡方检验(χ2)，检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 TN-C阳性表达结果与临床病理特征关系

TN-C在不同性别、年龄、组织学类型、分化程度以及肿瘤位置非小细胞肺癌患者中的阳性表达差异无统计学意义(P>0.05)；而与非淋巴结转移患者相比，淋巴结转移患者TN-C阳性表达率显著升高(P<0.05)；与肿瘤直径<3 cm患者相比，肿瘤直径≥3 cm的患者TN-C阳性表达率显著升高(P<0.05)；与Ⅰ～Ⅱ期患者相比，Ⅲ～Ⅳ期患者TN-C阳性表达率显著升高(P<0.05)。见表1。

Ki-67在不同性别、年龄、肿瘤位置、淋巴结转移以及肿瘤直径的非小细胞肺癌患者中的阳性表达差异无统计学意义(P>0.05)；而与鳞癌患者相比，腺癌患者Ki-67阳性表达率显著升高(P<0.05)；与中、高分化程度肿瘤患者相比，低分化程度患者Ki-67阳性表达率显著升高(P<0.05)；与Ⅰ～Ⅱ期患者相比，Ⅲ～Ⅳ期患者Ki-67阳性表达率显著升高(P<0.05)。见表1。

2.2 TN-C和Ki-67表达与非小细胞肺癌病理学特征的相关性分析

相关性分析结果显示：TN-C表达阳性率与非小细胞肺癌患者淋巴结转移、肿瘤直径以及TMN分期均呈正显著相关性(γ>0，P<0.05)，Ki-67表达阳性率与非小细胞肺癌患者分化程度和TMN分期均呈正显著相关性(γ>0，P<0.05)，与组织学类型无显著相关性(P>0.05)。见表2。

3 讨论

肺癌早期发病隐匿，且易发生远处转移，因此其早期诊断较为困难，中晚期患者治愈率及生存率均较低[7-8]。目前该肿瘤治疗方式以手术、放化疗以及免疫治疗为主[9-10]。

近年来癌症标志性指标研究对其临床诊断的发展具有积极意义，非小细胞肺癌标志指标，如：基质金属蛋白酶家族蛋白(MMPs)、环氧化酶(Cyclooxygenase,COX)等均为临床诊治的研究热点内容[11-12]。但是标志性指标的诊断仍存在局限性，因此新指标及联合靶标的应用是非小细胞肺癌诊治中仍待解决的问题。TN-C是1种细胞外机制糖蛋白，相关研究表明，该蛋白在肿瘤组织或肿瘤细胞中呈高表达状态，并对肿瘤细胞侵袭、迁移具有促进作用[13]。Ki-67是1种增殖细胞的相关抗原，其功能与细胞有丝分裂以及细胞增殖等过程密切相关，相关研究显示：Ki-67增殖指数与非小细胞患者的生存期成反比[14]。

表1 不同临床病理特征非小细胞肺癌组织中TN-C、Ki-67阳性表达差异/例

表2 TN-C和Ki-67表达与非小细胞肺癌病理学特征相关性分析

本研究采用免疫组化检测所有患者病理组织样本中TN-C和ki-67阳性率，从而进一步分析TN-C和Ki-67的表达与非小细胞肺癌临床病理特征的相关性，结果显示：TN-C在不同性别、年龄、组织学类型、分化程度以及肿瘤位置非小细胞肺癌患者中其阳性表达差异无统计学意义(P>0.05)，而与非淋巴结转移患者相比，淋巴结转移患者TN-C阳性表达率显著升高(P<0.05)，与肿瘤直径<3 cm患者相比，肿瘤直径≥3 cm的患者TN-C阳性表达率显著升高(P<0.05)，与Ⅰ～Ⅱ期患者相比，Ⅲ～Ⅳ期患者TN-C阳性表达率显著升高(P<0.05)，表明TN-C的表达在淋巴结转移、肿瘤直径<3 cm以及Ⅲ～Ⅳ期患者中呈现显著阳性表达，对以上病理特征具有准确诊断率。另外，Ki-67在不同性别、年龄、肿瘤位置、淋巴结转移以及肿瘤直径的非小细胞肺癌患者中其阳性表达差异无统计学意义(P>0.05)，而与腺癌患者相比，鳞癌患者Ki-67阳性表达率显著升高(P<0.05)，与中、高分化程度肿瘤患者相比，低分化程度患者Ki-67阳性表达率显著升高(P<0.05)，与Ⅰ～Ⅱ期患者相比，Ⅲ～Ⅳ期患者Ki-67阳性表达率显著升高(P<0.05)，表明：Ki-67的表达在组织学类型为鳞癌、低分化程度以及Ⅲ～Ⅳ期患者中呈现显著阳性表达，对以上病理特征具有准确诊断率。相关性分析结果显示：TN-C表达阳性率与非小细胞肺癌患者淋巴结转移、肿瘤直径以及TMN分期均呈正显著相关性(γ>0，P<0.05)，Ki-67表达阳性率与非小细胞肺癌患者分化程度和TMN分期均呈正显著相关性(γ>0，P<0.05)，与组织学类型无显著相关性(P>0.05)。

总之，TN-C和Ki-67的表达均与非小细胞肺癌的发生、进展等密切相关，可作为该肿瘤临床诊治的病理学依据。